检索结果-内蒙古大学图书馆

心脏组织特异性表达Neuregulin-2转基因小鼠的建立及心脏功能分析

中国比较医学杂志 2014年第3期24卷 78-82,F0004页

作者：路迎冬鲍丹刘宁张旭马元武吕丹张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的神经调节蛋白2(neuregulin-2,NRG2)可促进神经系统发育,基因缺失表现早期生长延迟,NRG2在心脏中也有表达,但其在心脏发育尤其是病理刺激时对心脏结构及功能的影响尚未见报道。本文目的是建立心脏组织特异性表达NRG2转基因小鼠,分析... 详细信息

目的神经调节蛋白2(neuregulin-2,NRG2)可促进神经系统发育,基因缺失表现早期生长延迟,NRG2在心脏中也有表达,但其在心脏发育尤其是病理刺激时对心脏结构及功能的影响尚未见报道。本文目的是建立心脏组织特异性表达NRG2转基因小鼠,分析其在正常及压力负荷刺激时对心脏结构及功能的影响。方法将人NRG2基因插入到心脏特异性启动子α-MHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立NRG2转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,western blot鉴定NRG2蛋白在心脏中的表达并筛选高表达的转基因品系,主动脉缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)制备压力负荷诱导的心肌肥厚小鼠模型。利用超声影像分析和病理学观察小鼠心脏结构和功能改变。结果建立了心脏组织特异性高表达NRG2转基因小鼠品系。与同窝阴性转基因小鼠相比,转基因小鼠左心室舒张末期后壁厚度(LVPWD)明显增加,3月龄时可达15.6%(P<0.05),经压力负荷刺激后,NRG2转基因手术小鼠心室壁增厚程度显著下降,心室腔增大,同时心肌排列紊乱程度和纤维化程度明显比NTG手术小鼠严重。结论在压力负荷下,转基因表达NRG2缩短了肥厚过程,同时加速了心衰进程。

关键词： NRG2 转基因压力负荷心室重构

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H7N9禽流感病毒小鼠感染动物模型的建立

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 18-21,I0008页

作者：朱华许黎黎鲍琳琳邓巍陈霆吕琦李枫棣袁静徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳峰于品雍卫东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立H7N9禽流感病毒小鼠感染模型。方法 1×108,1×107或1×106TCID50H7N9禽流感病毒原液(A/Anhui/1/2013)滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标:临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果被感染的小鼠... 详细信息

目的建立H7N9禽流感病毒小鼠感染模型。方法 1×108,1×107或1×106TCID50H7N9禽流感病毒原液(A/Anhui/1/2013)滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标:临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果被感染的小鼠表现为竖毛、弓背、体重下降;病理表现为间质性肺炎,感染后第2天开始在呼吸道脱落细胞中检测到病毒;免疫组化或病毒分离方法在肺、肾、脑、肠、脾等组织检测到病毒;感染后14 d在小鼠血清中血凝抑制试验特异性抗体效价达到160;淋巴细胞减少,中性粒细胞增多。结论 H7N9感染BALB/c小鼠模型与人类禽流感感染疾病的基本特征相似,为研究该病的发病机制及药物疫苗的研发提供了工作基础。

关键词： H7N9禽流感病毒感染动物模型 BALB c小鼠

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小鼠诺如病毒间接免疫荧光检测方法的建立

小鼠诺如病毒间接免疫荧光检测方法的建立

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：田胜男佟巍张丽芳常慧李雨函苏静芬刘先菊向志光刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的:建立小鼠诺如病毒(MNV)的间接免疫荧光试验(IFA)的检测方法. 方法:将MNV-1接种RAW264.7细胞,培养36小时收集病毒培养物及未感染细胞培养物,点制抗原玻片;以107TCID50的MNV-1灌胃接种BALB/c小鼠,收集感染血清做阳性对照血清.收... 详细信息

目的:建立小鼠诺如病毒(MNV)的间接免疫荧光试验(IFA)的检测方法. 方法:将MNV-1接种RAW264.7细胞,培养36小时收集病毒培养物及未感染细胞培养物,点制抗原玻片;以107TCID50的MNV-1灌胃接种BALB/c小鼠,收集感染血清做阳性对照血清.收集人工感染后不同时间点的血清样品,以1∶10的稀释度使用IFA法测定感染血清MNV抗体滴度.选取80份送检小鼠血清样品,以IFA和ELISA方法测定,差异样品使用Western blot方法进行验证. 结果:MNV-1感染RAW264.7细胞(36 ～48)h,细胞感染率为60％,以36 h感染细胞状态为佳;IFA法测定感染小鼠血清,小鼠感染1周后抗体水平逐濒提高,在4周时抗体滴度达到最高值,之后维持稳定,采集感染4周的动物血清做IFA方法的阳性质控品;80份血清中,IFA法测定阳性27份,阴性53份,ELISA法测定阳性32份,阴性48份;Western blot方法对差异样品验证,其中阳性3份,阴性2份,IFA法和ELISA法检测符合率分别为96.0％和97.5％. 结论:IFA方法检测小鼠诺如病毒基本可以反应小鼠的感染情况,偶有假阴性的出现,可以选择IFA方法和ELISA方法作为初筛,差异样品用Western blot方法验证.

关键词：诺如病毒间接免疫荧光法酶联免疫吸附测定检测效率

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蒽醌类药物毒性的研究进展

蒽醌类药物毒性的研究进展

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：贺银丽高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

蒽醌类化合物(anthraquinones)是大黄、何首乌、决明子、芦荟等植物的主要活性成分，药理作用广泛，如泻下、抗菌、保肝利胆等。目前，含有蒽醌的中药或中成药广泛应用于便秘、慢性肾功能衰竭等多种疾病，由于服用含有蒽醌成分的中药而... 详细信息

蒽醌类化合物(anthraquinones)是大黄、何首乌、决明子、芦荟等植物的主要活性成分，药理作用广泛，如泻下、抗菌、保肝利胆等。目前，含有蒽醌的中药或中成药广泛应用于便秘、慢性肾功能衰竭等多种疾病，由于服用含有蒽醌成分的中药而引起大肠黑病变报道日益增加，蒽醌类化合物的毒性越来越受到人们的重视。本文总结了近年来对蒽醌毒理作用的基础及临床研究，对其在消化系统、泌尿系统、循环系统、生殖系统的毒性进行综述，为临床合理应用含有蒽醌的中药或中成药制剂提供参考。

关键词：大肠黑病变蒽醌肝毒性肾毒性

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慢病毒载体用于转基因技术的研究进展

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中华临床医师杂志(电子版) 2014年第10期 1949-1953页

作者：张曼孙秀萍宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

慢病毒载体作为目前研究最多的外源性转基因载体之一,已成为一种高效率的转基因和基因治疗工具。该载体最大的优势是能够感染分裂和静止状态下的细胞,并且能够高效、稳定地整合于宿主细胞内。目前研究该载体在多种动物转基因技术方面的... 详细信息

慢病毒载体作为目前研究最多的外源性转基因载体之一,已成为一种高效率的转基因和基因治疗工具。该载体最大的优势是能够感染分裂和静止状态下的细胞,并且能够高效、稳定地整合于宿主细胞内。目前研究该载体在多种动物转基因技术方面的应用,有助于我们利用除了大鼠和小鼠以外的多种实验动物来研究基因的功能,并实现通过调节基因表达治疗人类疾病的目的。

关键词：病毒整合慢病毒载体宿主细胞基因治疗

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BALB/c小鼠和雪貂感染H7N9禽流感病毒后的肺组织动态病理学变化

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 13-17,I0006-I0007页

作者：邓巍李彦红朱华徐艳峰陈霆李枫棣鲍琳琳许黎黎黄澜吕琦袁静向志光高凯姚艳丰于品秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的了解用H7N9禽流感病毒分别感染BALB/c小鼠和雪貂后,其肺部动态病理改变,为临床诊断、治疗、预防及机制研究提供帮助.方法 BALB/c小鼠经鼻腔接种106EID50（50 μL）H7N9禽流感病毒后第1、2、3、5、7、14、28天分别安乐死2～3只小鼠... 详细信息

目的了解用H7N9禽流感病毒分别感染BALB/c小鼠和雪貂后,其肺部动态病理改变,为临床诊断、治疗、预防及机制研究提供帮助.方法 BALB/c小鼠经鼻腔接种106EID50（50 μL）H7N9禽流感病毒后第1、2、3、5、7、14、28天分别安乐死2～3只小鼠;雪貂经鼻腔吸入接种106EID50（500 μL）H7N9禽流感病毒后第3、7、14、28天分别安乐死1只雪貂,分别观察动物的临床特征改变,肺组织的大体组织形态学变化,HE染色观察动态病理改变,免疫组化染色观察病毒分布及肺组织各种炎细胞的浸润情况.结果感染病毒后的小鼠出现竖毛、嗜睡、死亡等表现,雪貂表现为打喷嚏、鼻腔分泌物、稀便、嗜睡等;大体观察小鼠与雪貂肺组织均可见到暗红色病灶;光镜观察小鼠与雪貂的肺组织均呈现坏死性支气管炎和渗出性间质性肺炎、肺泡炎.感染第2天开始出现炎性病变,7～9 d炎症病变最严重,14 d后逐渐修复吸收,28 d基本完全吸收; T、B淋巴细胞,巨噬细胞不同程度的表达增多,以T细胞增多为主,尤其是CD8＋ T细胞两种动物均大量表达.结论 H7N9禽流感病毒感染可引起BALB/c小鼠和雪貂肺组织急性支气管炎和肺炎,感染后7～9 d肺部炎症的组织病理学变化最严重,CD8＋T细胞明显增多,14 d后病灶逐渐吸收.该研究可为临床诊断、治疗、预防该病及进行疾病机制研究提供帮助.

关键词： H7N9禽流感病毒 BALB c小鼠雪貂肺组织病理学变化

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H7N9禽流感病毒与其他流感病毒对雪貂致病性与传播力的比较

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 32-37,I0010页

作者：邓巍许黎黎鲍琳琳朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红姚艳丰于品雍伟东张连峰秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的针对2013年3月中国爆发的人感染H7N9禽流感病毒,在雪貂体内进行致病性及传播力的研究,并与甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒进行比较。方法对新发H7N9毒株、甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒感染雪貂后的临床症状、体征,呼吸道排... 详细信息

目的针对2013年3月中国爆发的人感染H7N9禽流感病毒,在雪貂体内进行致病性及传播力的研究,并与甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒进行比较。方法对新发H7N9毒株、甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒感染雪貂后的临床症状、体征,呼吸道排毒情况,组织病理学变化等进行评价和比较,并对H7N9毒株在雪貂群体中的传播力进行研究。结果雪貂模型的临床症状、死亡率、病毒传播以及组织病理学分析显示:H7N9病毒的致病性低于H5N1,与2009年起源于北美的甲型H1N1流感病毒相当。新发H7N9禽流感病毒可以在雪貂的呼吸道、心脏、肝脏以及嗅球进行复制。值得注意的是H7N9禽流感可以通过飞沫在雪貂间进行低水平的传播,并且在传播过程中,病毒基因组内有多个位点的氨基酸发生了替换。结论 H7N9禽流感病毒对雪貂的致病性较H5N1禽流感病毒低,与甲型H1N1流感病毒对雪貂的致病性相当,H7N9禽流感病毒可在雪貂间进行传播。

关键词： H7N9禽流感病毒致病性传播力动物模型雪貂

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中药Ⅰ号方对APP/PS1双转基因模型小鼠APP代谢的影响

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中国实验动物学报 2014年第6期22卷 49-53,I0004,I0005页

作者：隋小龙梁良张玲朱华徐艳峰黄澜徐玉环韩云林姚志刚秦川邓巍中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究中药I号方对APP/PS1双转基因模型小鼠APP代谢的影响。方法将5月龄APP/PS1双转基因模型小鼠随机分为模型组(vehicle)、中药Ⅰ号方低剂量组(0.6 g/kg)、中剂量组(1.2 g/kg)和高剂量组(2.4 g/kg),并以同窝阴性小鼠作为正常对照组(w... 详细信息

目的研究中药I号方对APP/PS1双转基因模型小鼠APP代谢的影响。方法将5月龄APP/PS1双转基因模型小鼠随机分为模型组(vehicle)、中药Ⅰ号方低剂量组(0.6 g/kg)、中剂量组(1.2 g/kg)和高剂量组(2.4 g/kg),并以同窝阴性小鼠作为正常对照组(wild-type,WT),每组16只,雌雄各半。给药小鼠每天灌胃一次,模型组和正常对照组分别给予等体积的双蒸水灌胃。给药四个月后,用免疫组化和Western blot检测淀粉样前体蛋白(APP)及其代谢产物和分解酶的变化。结果 Western blot结果显示,与模型组相比,治疗组低剂量、中剂量和高剂量给药组能显著降低APP分解酶(ADAM10和BACE1)(P<0.01)及APP的分解产物的量,如:β-CTF(C99)、α-CTF(C83)、s APPα、s APPβ(P<0.01)。结论中药I号方通过影响APP的分解过程减少淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)的生成,减少脑内老年斑的沉积。

关键词：中药Ⅰ号方阿尔茨海默病 APP分解酶 APP/PS1双转基因AD模型小鼠

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实验动物准备对裸鼠移植瘤模型microPET 显像的影响

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中国比较医学杂志 2014年第2期24卷 57-62,69,F0003页

作者：周丽娜高凯李小颖梁颖张连峰吴宁中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院影像诊断科北京100021 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院PET-CT 中心100021

目的探讨实验动物准备条件对18 F-FDG microPET 裸鼠移植瘤模型显像的影响,以选择最佳的实验动物准备条件.方法 36 只人表皮样癌细胞A431 裸鼠皮下移植瘤模型.随机分为6 组（6 只/组）;A 组：无禁食、室温（20 ～22）℃、无麻醉（注射1... 详细信息

目的探讨实验动物准备条件对18 F-FDG microPET 裸鼠移植瘤模型显像的影响,以选择最佳的实验动物准备条件.方法 36 只人表皮样癌细胞A431 裸鼠皮下移植瘤模型.随机分为6 组（6 只/组）;A 组：无禁食、室温（20 ～22）℃、无麻醉（注射18 F-FDG 后60 min 清醒状态）、尾静脉注射18 F-FDG;B 组：禁食（6 ～8）h、加温（30 ～32）℃、麻醉（吸入2%异氟烷麻醉）、尾静脉注射18 F-FDG;C 组：无禁食、加温、麻醉、尾静脉注射18 F-FDG;D组：禁食、室温、麻醉、尾静脉注射18 F-FDG;E 组：禁食、加温、无麻醉、尾静脉注射18 F-FDG;F 组：禁食、加温、麻醉、腹腔注射18 F-FDG.注射18 F-FDG 约1 h 后,行microPET 显像,测量皮下移植瘤、颈部肌肉、棕色脂肪、脑、肝脏、肾脏、心脏、哈氏腺最大每克组织摄取率（%ID/gmax ）.扫描前裸鼠均测血糖.结果（1）B 组、C 组、F 组裸鼠的血糖水平与肿瘤摄取之间均呈直线负相关.（2）棕色脂肪：A 组摄取最高（8.03 ±1.29）,B 组摄取降低71.98%（P ＝0.000）.颈部肌肉：A 组摄取最高（16.07 ±5.20）,B 组摄取降低最多达81.84%（P ＝0.000）.各组脑、心脏、肝脏、肾脏、哈氏腺摄取差异无统计学意义.（3）A 组皮下移植瘤/组织或器官的摄取率最低.B 组移植瘤/颈部肌肉,移植瘤/肝脏,移植瘤/棕色脂肪的摄取率较A 组分别升高6.50 倍、1.29 倍、4.76 倍（P 均＜0.05）,肿瘤与组织或器官的图像对比度明显改善.（4）第1 次microPET 显像,尾静脉注射与腹腔注射皮下移植瘤摄取值差别无统计学意义（P ＝0.364）.第2 次microPET 显像,腹腔注射腹腔可见不同程度显像剂浓聚,其他正常组织、器官及皮下移植瘤的摄取均减低.腹腔注射方式,两次皮下移植瘤的摄取值差异有统计学意义（P ＝0.025）.结论实验动物准备明显影响18 F-FDG 在裸鼠正常组织的分布及皮下移植瘤的摄取.禁食、加温、麻醉及尾静脉注射方式,可以改善肿瘤对18 F-FDG 的摄取,保证图像有较好的稳定性及可重复性.

关键词：异种移植,裸鼠氟脱氧葡萄糖正电子发射型断层摄影术,小动物实验动物准备

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瘦素基因敲除肥胖大鼠的血糖及病理长期观察

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中国比较医学杂志 2014年第3期24卷 45-49,I0007页

作者：张丽关菲菲张旭陈炜孙彩显张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的：对Leptin基因敲除SD大鼠血糖变化及病理表型进行长期分析，为使用该大鼠作为糖尿病和脂代谢模型积累数据。方法 western blot检测Leptin＋/＋大鼠和Leptin-/-大鼠肝脏中Leptin的表达。利用称量方法测定Leptin基因敲除的SD大鼠（Le... 详细信息

目的：对Leptin基因敲除SD大鼠血糖变化及病理表型进行长期分析，为使用该大鼠作为糖尿病和脂代谢模型积累数据。方法 western blot检测Leptin＋/＋大鼠和Leptin-/-大鼠肝脏中Leptin的表达。利用称量方法测定Leptin基因敲除的SD大鼠（Leptin-/-）1，3，6，8月龄的体重变化，利用稳豪血糖仪采尾血测定1，3，6，8月龄Leptin-/-大鼠空腹血糖值。 HE染色和免疫组织化学观察Leptin-/-大鼠胰腺及肝脏的病理学变化。结果 Leptin-/-大鼠肝脏中表达变短的功能异常的Leptin蛋白。 Leptin-/-大鼠从1月龄开始出现显著的体重增加，8月龄时雌性体重为884 g，雄性体重可以达到1200 g，是野生SD大鼠的2倍。自1月龄起， Leptin-/-雌鼠的空腹血糖值显著高于野生大鼠，在1月龄到6月龄之间差别明显（40％～26％），到8月龄和野生大鼠恢复到近正常水平。8月龄Leptin-/-大鼠肝脏肝小叶中出现大量脂肪空泡，胰腺内较多脂肪细胞浸润、胰岛数量明显增多，体积增大，胰岛素阳性β细胞增多。结论 Leptin-/-大鼠表型表现为肥胖，脂肪肝，胰岛增生和早期高血糖。

关键词：瘦素基因敲除空腹血糖肥胖大鼠

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