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中国药理学通报 2013年第3期29卷 297-303页

作者：张玲盛树力秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展。目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰。潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移... 详细信息

随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展。目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰。潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移酶抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白乙酰基转移酶抑制剂、含溴结构域蛋白抑制剂及甲基化组蛋白结合蛋白的抑制剂等。该文综述了近年来表观遗传学治疗在药理学上的进展,以期为疾病防治和基础研究提供一些新的思路。

关键词：表观遗传学 DNA甲基化 DNA甲基转移酶组蛋白修饰组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶组蛋白甲基化

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恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的影响

恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的...

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：董志会王卫熊圣文丛喆骆杨陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴tetherin的cSNP位点;通过蛋白质结... 详细信息

目的筛查恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴tetherin的cSNP位点;通过蛋白质结构分析软件对蛋白结构进行预测;比较不同基因型猴SIVmac239复制水平的差异.结果序列比对发现8个非同义突变位点;经Psipred软件预测,其中G41A、T128C、C129和A333C cSNP位点可影响Tetherin蛋白二级结构.在SIV-mac239感染平台期,参考基因型猴(DLQ)病毒复制水平要高于GLQ型猴(p＜0.05),其他基因型猴之间无显著差异.结论 cSNP(G41A)可能影响Tetherin的抗病毒功能,这为后续研究提供参考信息.

关键词： Tetherin cSNP 蛋白质结构恒河猴

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90K/Mac-2BP基因沉默增强HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡

90K/Mac-2BP基因沉默增强HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：傅春燕蒋虹薛婧丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京 100021

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响.方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937... 详细信息

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响.方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937细胞5d后,细胞经PE-Annexin V,PerCP-7-AAD染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.采用基因沉默技术,将U937细胞中的90K/Mac-2BP基因沉默后,再经HIV-1感染,5d后检测细胞凋亡情况.结果正常人单核巨噬细胞株U937,经HIV-1感染后细胞凋亡率为(16.27±0.30)％,而90K/Mac-2BP基因沉默后的U937细胞,经HIV-1感染后细胞凋亡率分别增加至(31.26±0.35)％、(25.76±0.30)％、(23.69±0.33)％,具有统计学差异(p＜0.01).结论 90K/Mac-2BP的表达水平能调节HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡.

关键词：人单核巨噬细胞株巨细胞-2结合蛋白 HIV-1 凋亡

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恒河猴samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

恒河猴samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：熊圣文王卫董志会陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件... 详细信息

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件对该蛋白结构进行分析;使用SNaPshot方法筛查138只恒河猴基因背景.结果序列比对发现5个非同义突变位点C15G (2.17％)、C320T (6.88％)、G547A (13.41％)、A552T (4.35％)、T839C(17.39％);其中除C15G外的其它四个cSNP位点均处于SAMHD1蛋白重要结构域上,且G547A、A552T、T839C三个cSNP位点改变SAMHD1蛋白二级结构,可能影响SAMHD1蛋白功能.结论恒河猴samhd1基因编码区存在三个可能影响SAMHD1蛋白功能的cSNP位点,为后续研究提供了参考信息.

关键词： SAMHD1 cSNP 蛋白质结构功能恒河猴

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肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：徐珮丛喆陈霆王卫薛婧骆杨吴小闲魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况.比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点.方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac... 详细信息

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况.比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点.方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac251病毒,通过有限稀释分离培养病毒单克隆,提取病毒RNA后反转录,PCR扩增病毒gp120序列进行系统进化树分析.同时分析两组不同嗜性毒株Gp120氨基酸序列及糖基化位点的变化情况.结果 SIV-mac239在四只恒河猴体内发生不同的变异进化.肠道嗜性毒株与神经嗜性毒株氨基酸序列的差异集中在V1和V4区,肠道嗜性毒株在V4区与一个糖基化位点的增加,而神经嗜性毒株的糖基化位点的变化都发生在保守区C1、C2和C3.结论 SIV肠道嗜性和神经嗜性的增强分别与包膜蛋白Gp120上V4区糖基化位点的增加和C1区的糖基化位点缺失相关,两种嗜性的差异并不表现在与嗜性形成有紧密联系的V3区上.

关键词： SIV Gp120 变异肠道嗜性神经嗜性糖基化位点

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中药提取物雷公藤内酯醇对过敏性哮喘治疗的研究进展

中药提取物雷公藤内酯醇对过敏性哮喘治疗的研究进展

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：陶婧婧秦川刘云波张星东卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

过敏性哮喘是一种常见病，发病率呈不断升高的趋势，严重影响患者的健康，且迄今还没有较理想的治疗药物。其主要病理变化是肺组织嗜酸性粒细胞浸润性炎症。目前对病人的主要治疗药物是肾上腺糖皮质激素，但该类药物较大的副作用限制了... 详细信息

过敏性哮喘是一种常见病，发病率呈不断升高的趋势，严重影响患者的健康，且迄今还没有较理想的治疗药物。其主要病理变化是肺组织嗜酸性粒细胞浸润性炎症。目前对病人的主要治疗药物是肾上腺糖皮质激素，但该类药物较大的副作用限制了其临床应用。因此，研发新的疗效好、成本低、副作用少或没有副作用的新一代治疗药物成为当务之急。我国中药治疗过敏性哮喘历史悠久，积累了丰富的临床资料。在这个领域的深入研究可能会发现新的治疗药物的突破口。雷公藤是近年来研究比较多的一种中药，其提取物雷公藤内酯醇可能是其有效成分，具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制等多种作用。本文总结了近几年来雷公藤内酯醇治疗过敏性哮喘的研究概况和特点。

关键词：雷公藤内酯醇过敏性哮喘治疗炎症

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小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射比较

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中国比较医学杂志 2014年第1期24卷 72-73页

作者：陈霆李枫棣邓巍秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的对小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射进行比较。方法对4—6周的BALB／c小鼠注射等量生理盐水，对其操作的难易程度以及操作时间进行对比。结果小鼠内眦静脉对于刚刚开始操作的实验人员来说更容易上手；小鼠尾静脉注射相比内眦静脉注... 详细信息

目的对小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射进行比较。方法对4—6周的BALB／c小鼠注射等量生理盐水，对其操作的难易程度以及操作时间进行对比。结果小鼠内眦静脉对于刚刚开始操作的实验人员来说更容易上手；小鼠尾静脉注射相比内眦静脉注射难度稍高，且实验之前需多次训练方可熟练操作。结论小鼠内眦静脉注射是一种操更简便，且成功率更高的小鼠静脉注射方法。

关键词：小鼠内眦静脉丛注射尾静脉注射难易程度

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耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株的筛选

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微生物与感染 2014年第2期9卷 83-88页

作者：丁海榕林树柱卢锦标邓海清王国治秦川占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国食品药品检定研究院结核疫苗室北京100050 温州医科大学环境与公共卫生学院温州325035

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药... 详细信息

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药物的药敏试验,筛选出对二线药物敏感而对一线药物利福平或异烟肼耐药或敏感的菌株,然后进行小鼠体内毒力实验,对异烟肼耐药相关基因katG和利福平耐药相关基因rpoB测序并进行基因突变分析。从98株菌中筛选出药物敏感谱清晰的40株,进行小鼠体内毒力实验。结果显示,共35株半数死亡时间≤H37Rv的半数死亡时间,其中18株耐利福平合并耐异烟肼、5株单耐利福平,7株单耐异烟肼、5株对利福平和异烟肼均敏感。通过小鼠毒力研究,分别筛选出基因背景清晰,半数死亡时间≤7d的耐利福平合并耐异烟肼的菌株1株、半数死亡时间≤7d单耐利福平和异烟肼的菌株各1株,作为耐药结核分枝杆菌感染小鼠模型所用菌株及进一步进行豚鼠等其他动物模型感染用候选菌株。

关键词：结核分枝杆菌利福平耐药小鼠体内毒力实验

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血液免疫学指标在过敏性紫癜大鼠和兔模型及患儿体内的比较

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中国比较医学杂志 2014年第1期24卷 62-67,F0003页

作者：李彦红黄澜朱华徐艳峰隋小龙徐玉环韩云林冯晓纯秦川中国医学科学院、北京协和医学院、医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 长春中医药大学附属医院长春130021

目的通过检测过敏性紫癜大鼠及兔模型的血液学指标的改变,并与人类患者血液学指标改变进行比较,为进一步探索该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。方法首先构建模型;进行过敏性紫癜大鼠及兔的症状观察和病理分析;血常规检测;检测... 详细信息

目的通过检测过敏性紫癜大鼠及兔模型的血液学指标的改变,并与人类患者血液学指标改变进行比较,为进一步探索该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。方法首先构建模型;进行过敏性紫癜大鼠及兔的症状观察和病理分析;血常规检测;检测大鼠、兔及患儿血清中细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α,白细胞表面标记分子CD3、CD4、CD8等,免疫球蛋白IgA,IgE,IgG及补体C3,C4的含量。结果模型大鼠和兔皮肤均有不同程度的出血斑点,皮肤,胃肠道,关节及肾脏也表现为不同程度的炎症反应;模型大鼠、兔及患者急性期血常规均有不同程度的白细胞(WBC)升高,淋巴细胞(LYM)及百分比(LYM%)下降,中性粒细胞(UEN)及百分比(UEN%)升高,血小板(TLP)正常;血清CD4+T细胞减少,CD4/CD8比值下降,IL-4及TNF-α水平升高;IgA升高,C3、C4减少;差别有统计学意义。但这些指标改变的程度不同,血清IL-2、IgG、IgE水平改变不完全一致。结论过敏性紫癜大鼠及兔模型大部分血液学指标改变与人类相似,可为深入研究该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。

关键词：过敏性紫癜大鼠模型兔模型血液免疫学

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人骨髓间充质细胞脑内移植治疗食蟹猴脑缺血

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基础医学与临床 2013年第1期33卷 33-38页

作者：朱华冯铭卢珊李秦刘颖安沂华赵春华王任直秦川中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心卫生部比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所北京100005 中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所Motac合作实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院北京神经外科研究所北京100039

目的评价人骨髓间充质干细胞脑内移植对食蟹猴脑缺血模型的治疗作用。方法健康成年食蟹猴18只,光化学法造模4周后,用脑立体定位法在缺血灶周围植入人骨髓间充质干细胞5×106和1×106,对照组等体积0.9%氯化钠注射液。利用影像学(... 详细信息

目的评价人骨髓间充质干细胞脑内移植对食蟹猴脑缺血模型的治疗作用。方法健康成年食蟹猴18只,光化学法造模4周后,用脑立体定位法在缺血灶周围植入人骨髓间充质干细胞5×106和1×106,对照组等体积0.9%氯化钠注射液。利用影像学(MRI、PET)、行为学(神经功能评分、精准上肢测试系统)和组织病理学对干细胞移植效果进行评价。结果神经功能评分和精准上肢运动测试分别在在干细胞植入2周和3 d后显著降低(P<0.05)。PET结果显示干细胞移植后4、6周高、低剂量组缺血灶周围皮质、基底节核团的SUV%值比对照组显著升高(P<0.05)。MRI显示剂量组缺血灶的修复速度大于对照组。病理检查可见低剂量组坏死灶面积小于对照组(P<0.05),出血灶周围有大量新生血管生成。结论在缺血灶周围植入hBMSC可促进食蟹猴损伤神经组织的恢复,为进一步研究干细胞治疗神经系统疾病的临床应用提供了参考。

关键词：间充质干细胞脑缺血移植食蟹猴

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