检索结果-内蒙古大学图书馆

科学通报 2023年第6期68卷 656-670页

作者：邓怡段梦婕郭建国胡晓敏张晟瑜刘荔清华大学建筑学院北京100084 清华大学生态规划与绿色建筑教育部重点实验室北京100084 清华大学万科公共卫生与健康学院北京100084 中国医学科学院医学实验动物研究所北京100021 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院医学科学研究中心北京100730 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院消化内科北京100730

室内空气微生物是人体呼吸系统疾病的重要诱因,明确室内空气微生物与呼吸系统健康效应关系对建立室内健康微生物环境标准具有积极意义.近十多年,环境和人类呼吸道健康相关的微生物学深入研究已使人们对微生物的看法从纯粹致病性、传染... 详细信息

室内空气微生物是人体呼吸系统疾病的重要诱因,明确室内空气微生物与呼吸系统健康效应关系对建立室内健康微生物环境标准具有积极意义.近十多年,环境和人类呼吸道健康相关的微生物学深入研究已使人们对微生物的看法从纯粹致病性、传染性的负面作用逐渐转变为潜在保护性、预防性的正面作用.然而,目前室内空气微生物与呼吸系统的量化作用机制尚未建立,现行的公共卫生政策和室内空气微生物控制标准仍倾向于使室内保持尽可能低的微生物浓度,以防止致病菌传播和人群感染.本文总结了室内空气微生物与呼吸系统健康效应的相关研究,指出了基于呼吸道健康效应的室内空气微生物定量表征的关键理论欠缺和技术瓶颈,并以此为依据,提出了基于采样工具、统计学工具以及实验工具优化的研究展望,为未来量化呼吸系统健康效应与室内空气微生物作用的关系、室内空气微生物的表征提供借鉴.

关键词：呼吸道健康室内空气微生物

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科技期刊对实验动物描述要求的调查分析及其规范建议

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中国科技期刊研究 2016年第1期27卷 53-58页

作者：李继平赵永坤孔琪中国医学科学院医学实验动物研究所、北京协和医学院比较医学中心北京朝阳区100021 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省长春130122

【目的】规范生命科学研究领域及航天、航海、防原、防化等特殊领域的科学研究中,科研论文涉及实验动物科学描述规范,以保证结果的科学性和可重复性。【方法】通过文献检索、网站浏览等方式调查了40多种国内外科技期刊投稿指南中对实验... 详细信息

【目的】规范生命科学研究领域及航天、航海、防原、防化等特殊领域的科学研究中,科研论文涉及实验动物科学描述规范,以保证结果的科学性和可重复性。【方法】通过文献检索、网站浏览等方式调查了40多种国内外科技期刊投稿指南中对实验动物描述的要求。【结果】国外SCI期刊对实验动物描述要求跟期刊特色密切相关,差异较大,且具有针对性。我国期刊对实验动物描述的要求相对统一,多为简单照搬,实用性不强。提出了科技论文中实验动物描述规范。【结论】各相关期刊应根据各自专业特色,把对实验动物描述的有关要求写入投稿指南,便于作者在投稿前阅读并进行符合科学的实验设计。

关键词：科研论文实验动物动物实验描述规范

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野生型p53诱导的磷酸酶1基因缺失对小鼠心功能的影响

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中国循环杂志 2017年第8期32卷 792-796页

作者：刘可美刘臣周鹏刘娟谭宇李健楠张连峰张宏冰颜红兵北京协和医学院中国医学科学院国家心血管病中心阜外医院北京市100037 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院

目的:探讨敲除野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因对小鼠心功能的影响及心脏组织中基因和蛋白表达水平的变化。方法:随机选取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10只,分别检测两组小鼠的心功能和心重/体重比,应用苏木精伊红(HE... 详细信息

目的:探讨敲除野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因对小鼠心功能的影响及心脏组织中基因和蛋白表达水平的变化。方法:随机选取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10只,分别检测两组小鼠的心功能和心重/体重比,应用苏木精伊红(HE)染色观察小鼠心肌组织的病理形态,应用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌组织中心房利钠肽(ANP)、B型利钠肽(BNP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的基因表达水平,并应用蛋白免疫印迹(Western blot)检测凋亡相关蛋白包括B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(c-Caspase3)的表达水平。结果:与WT组小鼠相比,Wip1-KO组小鼠心肌组织中Wip1 mRNA表达明显降低(P<0.05),左心室射血分数和左心室缩短分数降低(P<0.05),左心室收缩末期内径增大(P<0.05)。虽然Wip1-KO组小鼠与WT小鼠的心脏重量没有差异,但Wip1-KO组小鼠体重较WT组小鼠减轻(P<0.05),心重/体重比增加(P<0.05)。HE染色显示Wip1-KO组小鼠的心肌形态与WT组小鼠之间没有明显差异。心肌组织中ANP、BNP、MCP-1和α-SMA基因表达水平在两组小鼠之间差异无统计学意义(P>0.05)。Wip1-KO组小鼠心肌组织中凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2和c-Caspase3表达水平与WT组小鼠之间没有明显差异(P>0.05)。结论:敲除Wip1基因可以损害小鼠心功能,但相关的机制还有待进一步阐明。

关键词：小鼠,基因敲除心脏功能试验细胞凋亡

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一种包含转座子Sleeping Beauty和PiggyBac的新型多功能载体的构建

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第2期28卷 182-189页

作者：马元武廉虹王冬梅王贵利张连峰中国医学科学院和北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院和北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

DNA转座子作为一种遗传学工具对脊椎动物的转基因、突变体产生、癌基因发现和基因治疗方面都有巨大的贡献.目前,哺乳动物中应用最为广泛、活性最高的DNA转座子为重构于鲑鱼的Sleeping Beauty(SB)转座子和来源于甘蓝蠖度尺蛾(cabbage loo... 详细信息

DNA转座子作为一种遗传学工具对脊椎动物的转基因、突变体产生、癌基因发现和基因治疗方面都有巨大的贡献.目前,哺乳动物中应用最为广泛、活性最高的DNA转座子为重构于鲑鱼的Sleeping Beauty(SB)转座子和来源于甘蓝蠖度尺蛾(cabbage looper moth Trichoplusia ni)的PiggyBac(PB)转座子.本研究中,我们成功构建了包含PB和SB两种转座子的杂合转座载体,命名为PBSBD.在杂合转座载体中融入了基因捕获框及loxp/Frt元件,用以实现转座过程中的基因捕获和条件性敲除.在HepG2细胞中通过检测报告基因的表达情况及阳性克隆的定位,对构建的杂合转座载体PBSBD进行了活性的初步验证.结果表明,PBSBD能够有效被2种转座酶识别,并能检测到报告基因的表达.本研究所构建的杂合转座载体PBSBD结合2种转座酶,可以应用于大规模筛选突变基因和研究基因功能.并且该杂合转座载体还可以利用SB转座酶的邻近转座特性,结合载体内所包含的loxp/Frt元件用以邻近区域DNA片段的条件性敲除,研究大片段DNA在生物体中的作用.

关键词：转座子 Sleeping Beauty PiggyBac 基因工程载体

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无菌APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠模型建立及脑内斑块变化初步观察

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中国实验动物学报 2019年第4期27卷 521-526页

作者：朱华郭亚茜杜晓鹏李卓秦川卫健委人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心

目的使用剖宫产净化方法建立无菌APPswe/PS1ΔE9(PAP)双转基因小鼠模型并对动物脑内斑块沉积情况进行初步观察,为研究肠道菌群与阿尔茨海默症关系提供新的动物模型。方法选择阳性PAP雄性杂合子鼠与经产的C57野生型雌鼠1∶2进行交配。... 详细信息

目的使用剖宫产净化方法建立无菌APPswe/PS1ΔE9(PAP)双转基因小鼠模型并对动物脑内斑块沉积情况进行初步观察,为研究肠道菌群与阿尔茨海默症关系提供新的动物模型。方法选择阳性PAP雄性杂合子鼠与经产的C57野生型雌鼠1∶2进行交配。怀孕母鼠在超净工作台内行剖宫产手术,用无菌ICR小鼠代乳。术后每个月进行无菌状态检测;PCR方法检测剖宫产所得PAP仔鼠的基因型;免疫组化方法定量检测9月龄PAP小鼠脑内斑块变化情况。结果实施剖宫产手术12例,获仔鼠66只,剖宫产存活率及离乳存活率分别为95.45%(63/66)和95.24%(60/63),净化后按国标检测无菌状态均为合格。免疫组化结果显示9月龄无菌PAP小鼠海马内斑块较同月龄SPF级动物减少。结论通过剖宫产净化技术去除了PAP小鼠携带的菌群,9月龄无菌PAP小鼠脑内斑块减少。

关键词：转基因小鼠无菌动物剖宫产淀粉样斑块

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肌萎缩侧索硬化症相关基因突变与疾病动物模型

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中国比较医学杂志 2017年第10期27卷 89-95页

作者：张丽张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫计委人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

肌萎缩侧索硬化症是一种累进性神经退行疾病,以上、下运动神经元选择性退化和凋亡为特征,引发瘫痪、最终导致死亡。大量引发ALS的基因突变被鉴定出,包括FUS/TLS、EPHA4、SS18 L1、ATXN2和C9ORF72等基因,这些基因突变的发现拓宽了RNA调... 详细信息

肌萎缩侧索硬化症是一种累进性神经退行疾病,以上、下运动神经元选择性退化和凋亡为特征,引发瘫痪、最终导致死亡。大量引发ALS的基因突变被鉴定出,包括FUS/TLS、EPHA4、SS18 L1、ATXN2和C9ORF72等基因,这些基因突变的发现拓宽了RNA调节参与ALS病理生成的理解。本文对家族性ALS相关的基因突变及现有的ALS啮齿类动物模型进行总结概括。

关键词：肌萎缩侧索硬化症基因突变动物模型

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小胶质细胞在神经发育和神经退行性疾病中的吞噬作用与调节机制

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中国比较医学杂志 2018年第4期28卷 120-126,102页

作者：李晶文张丽张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫计委人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

小胶质细胞是神经胶质细胞的一种,具有吞噬、清除、抗原提呈、促进损伤修复和分泌细胞外信号分子等多种功能。其中,吞噬功能在神经发育、脑组织维持、突触重塑、神经退行性疾病发生发展及淀粉样β蛋白的清除等方面都发挥着重要作用。本... 详细信息

小胶质细胞是神经胶质细胞的一种,具有吞噬、清除、抗原提呈、促进损伤修复和分泌细胞外信号分子等多种功能。其中,吞噬功能在神经发育、脑组织维持、突触重塑、神经退行性疾病发生发展及淀粉样β蛋白的清除等方面都发挥着重要作用。本文就小胶质细胞在神经发育及神经退行性疾病中的吞噬功能及其调节机制作一简要综述,以期为神经退行性疾病的治疗提供新思路。

关键词：小胶质细胞吞噬神经发育淀粉样β蛋白神经退行性疾病

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利用dCas9-FokⅠ编辑大鼠Dnmt1基因

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第7期32卷 841-848页

作者：张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武中国医学科学院&北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型Fok I核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的Cas... 详细信息

CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型Fok I核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的Cas9蛋白(dCas9)进行融合,形成融合蛋白用于降低脱靶效应。FokⅠ是一种依赖于二聚化才能行使内切酶活性的核酸酶,在本研究中,通过将FokⅠ功能结构融合到dCas9的N端,构建表达质粒p ST1374-dCas9-FokⅠ。我们前期研究中,发现一个sgRNA在介导Cas9编辑Dnmt1基因建立条件敲除大鼠时,存在显著的脱靶现象。以此为基础,我们利用dCas9-FokⅠ/sgRNA系统编辑大鼠Dnmt1基因,研究该系统是否能够进行基因编辑以及是否能够提高基因编辑特异性。将转录好的dCas9-FokⅠmRNA和sgRNA显微注射到SD大鼠的受精卵中,用于产生基因编辑大鼠。通过显微注射以及胚胎移植,最终获得43只F0代大鼠,其中两只在靶点位置包含突变,突变效率达4.5%。对脱靶情况进行分析,结果显示,无脱靶现象存在。综上,表明dCas9-FokⅠ/sgRNA可以应用于编辑大鼠基因,并能显著提高特异性。尽管dCas9-FokⅠ/sgRNA系统相比于Cas9/sgRNA系统,基因编辑效率有所下降,但是该技术的发展为基因治疗提供了可供选择的潜在工具。

关键词： Dnmt1 基因编辑大鼠 dCas9 FokⅠ 脱靶

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心肌肌钙蛋白Ⅰ基因突变与心肌病的研究进展

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中国实验动物学报 2007年第5期15卷 387-389页

作者：冯娟张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌肌钙蛋白复合物的亚单位之一,与心肌肌钙蛋白T和C相互作用,与肌动蛋白-原肌球蛋白结合从而抑制肌动蛋白-肌球蛋白的收缩作用。在肥厚型、扩张型和限制型心肌病中发现30多种cTnI基因的突变,cTnI基因突变转基因... 详细信息

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌肌钙蛋白复合物的亚单位之一,与心肌肌钙蛋白T和C相互作用,与肌动蛋白-原肌球蛋白结合从而抑制肌动蛋白-肌球蛋白的收缩作用。在肥厚型、扩张型和限制型心肌病中发现30多种cTnI基因的突变,cTnI基因突变转基因小鼠也反映了心肌病的特征。本文总结了cTnI基因突变在心肌病发病机制中的研究情况。

关键词：心肌肌钙蛋白Ⅰ 基因突变心肌病转基因动物

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LGK-974对人肝癌细胞系HepG2的辐射增敏作用

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辐射研究与辐射工艺学报 2016年第6期34卷 29-37页

作者：田丹王彦王芹杜利清徐畅刘强樊飞跃北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津300192 北京协和医学院比较动物中心中国医学科学院医学实验动物研究所北京100021

观察LGK-974(CAS:1243244-14-5)对人肝癌细胞系HepG2的辐射增敏作用,并探讨可能的作用机制。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测LGK-974对HepG2细胞的生长抑制作用;细胞克隆形成法确定1.0mmol/L LGK-974对HepG2细胞放疗敏感性的影响;H2D... 详细信息

观察LGK-974(CAS:1243244-14-5)对人肝癌细胞系HepG2的辐射增敏作用,并探讨可能的作用机制。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测LGK-974对HepG2细胞的生长抑制作用;细胞克隆形成法确定1.0mmol/L LGK-974对HepG2细胞放疗敏感性的影响;H2DCFH-DA探针流式细胞法检测细胞活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;RT-PCR及Western Blot法检测Nrf2及其下游NQO-1、HO-1基因的转录水平和蛋白表达水平。结果显示,LGK-974抑制HepG2细胞的生长分裂和增殖,24、48、72 h的半抑制浓度(IC50)为4.3、2.14、0.536mmol/L(p<0.05);1.0mmol/L LGK-974对HepG2细胞的放射增敏比(SERD0)为1.37;LGK-974能增大辐射产生的ROS水平(p<0.05);照射后Nrf2及其下游基因HO-1、NQO-1的转录水平和表达水平均增加;LGK-974能降低辐射对Nrf2、HO-1和NQO-1的转录和表达水平的增加作用(p<0.05)。由此得出,LGK-974对人肝癌细胞系HepG2具有明显的辐射增敏作用,其机制可能是抑制Nrf2信号通路,阻止细胞缓解辐射产生的氧化压力。

关键词： LGK-974 HepG2细胞 Nrf2 活性氧辐射增敏

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