检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2008年第9期18卷 48-52,I0008,I0009页

作者：代小伟朱华黄澜刘亚莉马春梅魏强秦川北京协和医学院中国医学科学院实验动物学研究所北京100021

目的观测不同感染途径实验性感染BALB/c小鼠后的感染状况,了解H5N1病毒的感染特点,为更深入的流行病学研究提供理论基础。方法分别通过口腔接种、污染饲料、腹腔注射、皮肤损伤途径感染6-8周龄BALB/c小鼠,定期安乐动物采血及各器官组织... 详细信息

目的观测不同感染途径实验性感染BALB/c小鼠后的感染状况,了解H5N1病毒的感染特点,为更深入的流行病学研究提供理论基础。方法分别通过口腔接种、污染饲料、腹腔注射、皮肤损伤途径感染6-8周龄BALB/c小鼠,定期安乐动物采血及各器官组织进行血清学、病原学、病理学检查,记录抗体变化、病毒分离情况及病理学改变。结果各途径感染小鼠感染后出现竖毛、弓背、觅食减少、体重减轻、精神呆滞及神经系统症状,肺组织病毒分离及RT-PCR阳性,病理表现间质性肺炎。感染后第7 d动物血清中可检测到H5N1抗体。结论通过口腔接种、污染饲料、腹腔注射及皮肤损伤多种途径感染BALB/c小鼠,均能发生感染,提示呼吸道以外的感染方式不容忽视,有益于人类更好的防控禽流感;可通过多种方式建模,深入研究禽流感的发病机制。

关键词：禽流感 H5N1病毒 BALB/c小鼠感染途径模型动物

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阿尔茨海默病中mir-222作用机制的初步研究

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中国比较医学杂志 2008年第9期18卷 13-15,I0003页

作者：王晓映宗园媛张连峰秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的探讨mir-222在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法取6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR对芯片检测结果进行验证;构建mir-222表达载体,将其转染至SH-SY5Y细胞中,转染后48小时提取蛋白检测p27k... 详细信息

目的探讨mir-222在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法取6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR对芯片检测结果进行验证;构建mir-222表达载体,将其转染至SH-SY5Y细胞中,转染后48小时提取蛋白检测p27kip1的表达情况。结果芯片结果显示,与野生型C57BL/6J小鼠相比,6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中mir-222表达明显下降,经real-time PCR验证,差别具有统计学意义(P=0.012);将mir-222表达载体转染至SH-SY5Y细胞后,p27kip1表达减少。结论mir-222可能通过调节细胞周期抑制因子p27kip1的表达参与阿尔茨海默病的发生。

关键词：阿尔茨海默病 microRNA 转基因小鼠 microRNA芯片

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猴免疫缺陷病毒(SIV)在艾滋病模型恒河猴组织中的分布和载量测定

猴免疫缺陷病毒(SIV)在艾滋病模型恒河猴组织中的分布和载量测定

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：侯俊乔红伟朱华丛喆徐艳峰王卫刘秀英佟巍蒋虹涂新明黄澜刘亚莉马春梅吴小闲卢耀增魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的研究当艾滋病恒河猴模型的血浆病毒载量处于低水平或阴性时,猴免疫缺陷病毒(Simian ImmunodeficiencyViruses,SIV)在宿主组织中的分布情况。方法 SIVmac251感染恒河猴10只,定期检测其血浆载量,感染病毒平均高峰时间第14 day时,活检... 详细信息

目的研究当艾滋病恒河猴模型的血浆病毒载量处于低水平或阴性时,猴免疫缺陷病毒(Simian ImmunodeficiencyViruses,SIV)在宿主组织中的分布情况。方法 SIVmac251感染恒河猴10只,定期检测其血浆载量,感染病毒平均高峰时间第14 day时,活检取淋巴结。选取感染18个月后病毒载量最低水平和阴性的2只艾滋病猴(SAIDS),经安死术后取淋巴结、脾、肝、肺、肾、脑等组织,用原位杂交和实时荧光定量PCR的方法检测病毒在组织中的分布和组织中的病毒载量。结果感染第14 day时,10只猴血浆病毒载量达到10～7 copies/ml,淋巴结组织病毒载量为10～5-10～8 copies/g,原位杂交方法在腹股沟淋巴结中检测到强阳性斑点。感染后第18个月的2只猴,血浆病毒载量下降并维持不高于10～2copies/ml水平或阴性,但组织分布不尽相同,在肠系膜淋巴结、肾上腺、海马回、空肠、脾脏等组织中检测到10～5-10～6 copies/g的病毒载量,于一只猴的脑积液中检测到10～3 copies/ml的病毒载量。用原位杂交的方法在肠系膜淋巴结和空肠中检测到强阳性斑点,其它组织中未检测到阳性斑点。结论实验证实SAIDS猴在血浆病毒载量低甚至阴性时,病毒在不同组织中仍有分布,有些组织中甚至出现高病毒载量,提示在制备SIV/SAIDS模型中,尤其在药物筛选和疫苗评价时,应考虑组织病毒载量指标的测定和药物、疫苗对组织病毒的治疗清除作用的评价。

关键词：猴免疫缺陷病毒(SIV) 恒河猴模型病毒载量组织分布

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痘苗病毒毒力测定及其免疫血清的制备

痘苗病毒毒力测定及其免疫血清的制备

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：谢军芳侯丽波佟巍乔红伟丛喆王卫蒋虹魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的测试痘苗病毒毒力,制备痘苗病毒免疫血清,为药物评价和病毒检测奠定基础。方法鸡胚绒毛尿囊膜培养痘苗病毒,测定病毒的TCID50和小鼠毒力。将痘苗病毒悬液稀释成100TCID,0.2%福尔马林灭活,分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫BALB/... 详细信息

目的测试痘苗病毒毒力,制备痘苗病毒免疫血清,为药物评价和病毒检测奠定基础。方法鸡胚绒毛尿囊膜培养痘苗病毒,测定病毒的TCID50和小鼠毒力。将痘苗病毒悬液稀释成100TCID,0.2%福尔马林灭活,分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫BALB/c小鼠,用IFA、IEA、ELISA方法评价血清的敏感性和特异性。结果痘苗病毒TCID/0.05ml=1.8×10～4,小鼠LD/0.2ml=106.8;制备的免疫血清经IFA法测定效价为1:320,IEA法测血清效价为1:160,ELISA测血清效价1:6400。结论确定的细胞和小鼠毒力将为药物测定提供基础比对数据;制备的痘苗病毒免疫血清具有高度的敏感性和特异性,可作为测试对照血清使用。

关键词：痘苗病毒 BALB/c小鼠免疫血清

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小鼠仙台病毒标准化血清的制备及鉴定

小鼠仙台病毒标准化血清的制备及鉴定

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：侯丽波谢军芳佟巍乔红伟丛哲蒋虹王卫魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的制备标准化抗小鼠仙台病毒(Sendai Virus,SV)免疫血清,为清洁级及SPF级实验小鼠质量检测提供批量、稳定、敏感的质控血清。方法使用动物来源的仙台病毒(SV)感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清,经IFA、IEA、ELISA等方法检测血清效价... 详细信息

目的制备标准化抗小鼠仙台病毒(Sendai Virus,SV)免疫血清,为清洁级及SPF级实验小鼠质量检测提供批量、稳定、敏感的质控血清。方法使用动物来源的仙台病毒(SV)感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清,经IFA、IEA、ELISA等方法检测血清效价。结果制备多量抗SV血清,经多种方法检定,IFA效价达1:640,IEA效价达1:320,ELISA效价达1:102,400～1:204,800。结论本研究中制备的SV抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为检测实验小鼠中SV病原的标准化质控血清。

关键词：仙台病毒血清质量控制

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荧光定量测定SIV/SHIV RNA拷贝数标准品的制备——NASBA

荧光定量测定SIV/SHIV RNA拷贝数标准品的制备——NASBA

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：丛喆刘秀英侯丽波蒋虹陈志伟魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的应用NASBA方法制备SIV/SHIV RNA定量测定标准品。方法应用NASBA方法直接扩增SIVmac251病毒gag基因上1476-1685之间的片段,扩增的RNA产物(RS-NASBA)纯化后10倍系列稀释,测定定量曲线、标准曲线,测定该标准品的稳定性和重复性。结果应... 详细信息

目的应用NASBA方法制备SIV/SHIV RNA定量测定标准品。方法应用NASBA方法直接扩增SIVmac251病毒gag基因上1476-1685之间的片段,扩增的RNA产物(RS-NASBA)纯化后10倍系列稀释,测定定量曲线、标准曲线,测定该标准品的稳定性和重复性。结果应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到2.033×10copies/μL。结论外标准品RS-NASBA纯度高,稳定性好,可用于定量测定SIV/SHIV RNA拷贝数。

关键词：依赖核酸序列的扩增技术病毒载量实时荧光定量RT-PCR

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SHIV-KB9感染猴病毒组织分布研究

SHIV-KB9感染猴病毒组织分布研究

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：侯俊乔红伟丛喆王卫刘秀英佟巍蒋虹涂新明魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的研究当SHIV艾滋病恒河猴模型的血浆病毒载量处于低水平或阴性时,SHIV在宿主组织中的分布情况。方法 SHIV-KB9感染恒河猴2只,定期检测其血浆载量,选取感染18个月后病毒载量为很低水平和阴性时,经安死术后取淋巴结、消化系统、脑、生... 详细信息

目的研究当SHIV艾滋病恒河猴模型的血浆病毒载量处于低水平或阴性时,SHIV在宿主组织中的分布情况。方法 SHIV-KB9感染恒河猴2只,定期检测其血浆载量,选取感染18个月后病毒载量为很低水平和阴性时,经安死术后取淋巴结、消化系统、脑、生殖系统等组织,用原位杂交和实时荧光定量PCR的方法检测病毒在组织中的分布和组织中的病毒载量。结果在两只猴的消化系统、脑组织、睾丸中都检测到10～5-10～6 copies/g的病毒载量,用原位杂交的方法在淋巴结、脾脏、食道、十二指肠、空肠、回肠、直肠、视丘中检测到阳性。结论实验证实SHIV感染猴在血浆病毒载量低甚至阴性时,病毒在不同组织中仍有分布,在脑组织、消化道、睾丸中可出现高病毒载量,提示在制备SIV/SAIDS模型中,尤其在药物筛选和疫苗评价时,应考虑组织病毒载量指标的测定和药物、疫苗对组织病毒的治疗清除作用的评价。

关键词：猴免疫缺陷病毒(SIV) 恒河猴模型病毒载量组织分布

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SARS-CoV细胞空斑试验

SARS-CoV细胞空斑试验

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：蒋虹乔红伟丛喆佟巍魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的建立适用于生物安全三级实验室操作的SARS-CoV空斑试验方法。方法 SARS-CoV10倍系列稀释接种Vero-E6细胞,用0.6%琼脂糖覆盖中性红着色(琼脂糖-中性红法)或覆盖1%甲基纤维素,4%甲醛固定,结晶紫染色(甲基纤维素-结晶紫法),空斑计数。... 详细信息

目的建立适用于生物安全三级实验室操作的SARS-CoV空斑试验方法。方法 SARS-CoV10倍系列稀释接种Vero-E6细胞,用0.6%琼脂糖覆盖中性红着色(琼脂糖-中性红法)或覆盖1%甲基纤维素,4%甲醛固定,结晶紫染色(甲基纤维素-结晶紫法),空斑计数。结果琼脂糖-中性红法病毒滴度为6.14Lg pfu/mL,甲基纤维素-结晶紫法病毒滴度为6.57Lg pfu/mL。结论二种空斑试验方法相比,病毒滴度无明显差异。甲基纤维素-结晶紫空斑试验法形成的空斑比琼脂糖-中性红法清晰、操作简单安全、结果可长期保存。

关键词： SARS冠状病毒空斑试验

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北京地区实验恒河猴外周血T淋巴细胞亚群分析

北京地区实验恒河猴外周血T淋巴细胞亚群分析

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：佟巍王卫魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的测定正常实验恒河猴外周血T淋巴细胞亚群,获取基础数值。方法使用BD FACS Calibur流式细胞仪,Cell QuestTM3.3分析软件,应用CD3-Percp、CD4-FITC、CD8-PE荧光标记的抗体,对北京地区84只实验恒河猴的外周血T淋巴细胞亚群进行统计分... 详细信息

目的测定正常实验恒河猴外周血T淋巴细胞亚群,获取基础数值。方法使用BD FACS Calibur流式细胞仪,Cell QuestTM3.3分析软件,应用CD3-Percp、CD4-FITC、CD8-PE荧光标记的抗体,对北京地区84只实验恒河猴的外周血T淋巴细胞亚群进行统计分析。结果北京地区实验恒河猴外周血CD3 CD4细胞淋巴细胞的百分比为32.82±5.93%;CD3CD8细胞百分比为23.99±6.34%;CD4/CD8的比值为1.45±0.41;LYM百分比为白细胞的49.70±14.00%;LYMF为(4.634±2.181)×10/ml。结论实验用恒河猴T淋巴细胞亚群的基础数值测定为相关比较医学研究奠定基础。

关键词： T淋巴细胞亚群流式细胞技术

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SIV/SHIV/SAIDS恒河猴动物模型的比较研究

SIV/SHIV/SAIDS恒河猴动物模型的比较研究

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：魏强王卫丛喆秦川中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所

目的实验比较研究SIV/恒河猴动物模型与SHIV/恒河猴动物模型的异同,为筛选、评价抗HIV-1药物和候选疫苗选择合适的动物模型提供实验依据。方法实验前采集猴血进行病原和血清学检查,确定无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用SIV... 详细信息

目的实验比较研究SIV/恒河猴动物模型与SHIV/恒河猴动物模型的异同,为筛选、评价抗HIV-1药物和候选疫苗选择合适的动物模型提供实验依据。方法实验前采集猴血进行病原和血清学检查,确定无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用SIVmac239、SIVmac251病毒和SHIV-KB9等不同嵌合病毒经不同途径感染实验猴,使用流氏细胞仪、血常规、DNA-PCR、RT-PCR及ELISPOT等方法测定两种病毒感染恒河猴后,动物发病情况、疾病进程、体内病毒复制、病理学和免疫细胞、器官损伤情况,比对不同病毒感染情况,建立模型确定评价指标。结果不同病毒感染水平不尽相同,SHIV-KB9感染恒河猴和SIVmac251、SIVmac239感染恒河猴的病毒载量峰值都在106copies/mL水平,SHIV-KB9感染恒河猴的病毒载量下降比SIV感染恒河猴慢,SIV感染恒河猴的CD4 T细胞数在急性期的衰竭速度没有SHIV-KB9感染恒河猴的衰竭速度快;不同途径感染SIV病毒血症出现时间有先后差别,分别为:静脉3d、直肠7d和阴道10d,没有观察到高峰期延迟现象,都是在14d达到高峰,以后迅速下降。用病毒分离的方法,粘膜感染猴较静脉感染猴有高峰期延长现象。中国恒河猴在感染SIVmac239后,虽然四只实验猴的ELISPOT结果之间相差较大,但他们的趋势及SFC平均数还是具有规律性的,从感染后30天的小高峰,之后进入平台期,然后是感染后20周的高峰,随后进入一个波动期。在整个感染过程中,四只实验猴的SFC数都在每106个细胞2-497个SFC之间波动,没产生很高的SFC数。结论 SHIV致病差异较大,大都不出现典型的SAIDS症状,作为含有人HIV靶部位的嵌合病毒SHIV更符合药物筛选和疫苗评价,但其对恒河猴的致病性及稳定性需进一步提高。

关键词： SHIV SIV 中国恒河猴 AIDS 动物模型

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