检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2021年第4期31卷 33-37页

作者：罗嘉慧卢秋翰李国萃张京京丛喆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8^(+)T细胞反应强度,探究不同保存条件对CD8+T细胞活性影响。方法采集9只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至... 详细信息

目的通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8^(+)T细胞反应强度,探究不同保存条件对CD8+T细胞活性影响。方法采集9只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至-80℃和液氮,冻存1周和1年再用于检测,检测时用阳性刺激物进行刺激,流式分析活细胞比例,MIP-1β、TNF-α、IL-2、IFN-γ四种细胞因子分泌情况和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况。结果随着冻存时间的增加,细胞存活率降低,且液氮冻存比-80℃冻存有更高的存活率。在细胞因子分泌和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况中,冻存一年的细胞MIP-1β、TNF-α分泌量显著高于正常细胞,细胞状态发生了改变,冻存一周的细胞与新鲜细胞状态更为相近。结论想要保持低的细胞死亡率和正常的CD8+T细胞反应,应使用新鲜细胞或短期冻存的细胞进行测量CD8^(+)T细胞反应水平的实验。

关键词：细胞内细胞因子染色 CD8^(+)T细胞细胞活性恒河猴

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新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在三文鱼食材中的活性

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中国比较医学杂志 2021年第2期31卷 98-101页

作者：吕琦刘明娅戚菲菲龚姝然周沙沙鲍琳琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SARS-CoV-2粘附在三文鱼肉上的活性保持情况,为科学防控冠状病毒提供理论依据。方法检测在4℃和22℃条件下,粘附在三文鱼肉上和4%Na Cl仿海盐水中SARS-CoV-2病毒的活性情况。结果4℃条件下,三文鱼表面病毒活性可保持4 d,4%Na C... 详细信息

目的研究SARS-CoV-2粘附在三文鱼肉上的活性保持情况,为科学防控冠状病毒提供理论依据。方法检测在4℃和22℃条件下,粘附在三文鱼肉上和4%Na Cl仿海盐水中SARS-CoV-2病毒的活性情况。结果4℃条件下,三文鱼表面病毒活性可保持4 d,4%Na Cl仿海盐水中病毒活性可保持7 d,1 d内病毒活性均衰减超过50%。22℃条件下,三文鱼表面病毒活性可维持1 d,4%Na Cl仿海盐水中病毒活性可维持2 d,1 d内病毒活性衰减均超过50%。结论4℃~22℃条件下,三文鱼表面SARS-CoV-2病毒可存活1~4 d,4%仿海盐水中SARS-CoV-2病毒可存活2~7 d。

关键词： SARS-CoV-2 三文鱼活性 4%Na Cl仿海盐水

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发光二极管光源照射日本大耳白兔皮肤的安全性评价

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中国比较医学杂志 2016年第7期26卷 24-30页

作者：李彦红张继刚徐艳峰韩云林黄澜江彬彬朱华徐玉环杨维玲秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021 中国人民解放军火箭军总医院北京100088

目的通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织,对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发,LED光源照射,强度为50 mw/cm2,对照组动物以普通日光灯光源照射,两组均每天照射5 h,连续... 详细信息

目的通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织,对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发,LED光源照射,强度为50 mw/cm2,对照组动物以普通日光灯光源照射,两组均每天照射5 h,连续3个月。观察动物皮肤有无红肿,测量动物进食、体重、体温等改变情况;照射完毕采集外周血测量常规、生化指标;Elisa分析免疫细胞及细胞因子改变情况;脏器组织病理检测,及分析皮肤弹力纤维变化情况;皮肤免疫组织化学分析C-myc、P53、细胞周期蛋白D1(CCND1)等癌基因及抑癌基因的表达变化。结果照射组兔皮肤未见红肿表现,体重在6周后稍高于对照组,体温3周、6周有差别,进食未见异常;血常规有白细胞增多,生化检测尿素、肌酐水平有增高,但在正常范围内;ELISA分析血免疫细胞CD3T细胞、细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ水平在两组无明显差别,照射组动物CD19B细胞,IL-4水平升高;照射组动物脏器组织病理未见明显异常结构改变,皮肤弹性纤维分布无异常;皮肤组织内细胞周期蛋白(CCND1),C-Myc蛋白,P53蛋白表达与对照组相比没有差异。结论 LED光源照射日本大耳白兔3个月后,未引起体内明显的组织病理学改变,也未引起皮肤肿瘤相关因子的改变。

关键词：发光二极管日本大耳白兔皮肤安全评价

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高脂食物对动脉硬化合并类风湿关节炎小鼠肠道菌群的影响

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中国微生态学杂志 2019年第4期31卷 373-379页

作者：石娜张抒扬牛海涛国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室(中国医学科学院医学实验动物研究所) 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 北京协和医院北京100021

目的分析高脂食物对动脉硬化合并类风湿关节炎小鼠肠道微生物的影响,了解动脉硬化合并类风湿关节炎小鼠肠道微生物的变化。方法 8周龄ApoE^(-/-)小鼠饲喂高脂食物和普通食物至17周龄来诱发动脉硬化症状,再通过给17周龄ApoE^(-/-)小鼠腹... 详细信息

目的分析高脂食物对动脉硬化合并类风湿关节炎小鼠肠道微生物的影响,了解动脉硬化合并类风湿关节炎小鼠肠道微生物的变化。方法 8周龄ApoE^(-/-)小鼠饲喂高脂食物和普通食物至17周龄来诱发动脉硬化症状,再通过给17周龄ApoE^(-/-)小鼠腹腔注射抗6-磷酸葡萄糖异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)抗体呈阳性的K/BxN血清,从而诱导其产生类风湿关节炎症状。通过Illumina HiSeq平台对各组小鼠粪便进行16S rDNA V4区测序,分析动脉硬化合并类风湿关节炎小鼠肠道微生物的变化。结果 ApoE^(-/-)小鼠饲喂高脂食物后,其血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度和血清总胆固醇(TC)浓度均显著升高,主动脉内膜斑块面积比喂普通食物的ApoE^(-/-)小鼠显著增加,表明ApoE^(-/-)小鼠饲喂高脂食物后引起更显著的动脉硬化症状。再通过腹腔注射抗GPI抗体呈阳性的K/BxN血清,各组ApoE^(-/-)小鼠均出现关节肿胀,饲喂高脂食物的ApoE^(-/-)小鼠其踝关节宽度和临床评分(clinical score)低于饲喂普通食物组小鼠。OTU数、Shannon指数和Simpson指数显示高脂食物和K/BxN血清处理组ApoE^(-/-)小鼠肠道菌群多样性降低,Firmicutes/Bacteroidetes值升高,t-test分析显示在属水平上,Prevotellaceae_UCG-001显著降低,Ruminiclostridium_6显著升高。t-test分析和Firmicutes/Bacteroidetes比值显示ApoE^(-/-)小鼠肠道菌群结构紊乱。结论高脂食物使ApoE^(-/-)小鼠的肠道菌群组成和结构发生改变,导致ApoE^(-/-)小鼠的动脉硬化症状加重,类风湿关节炎症状减轻。提示肠道微生物组成和结构的改变,可能与动脉硬化合并类风湿关节炎发病机制相关。

关键词：动脉硬化类风湿关节炎高脂食物肠道微生物

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天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨

天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨

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2017第十九届中国科协年会

作者：熊圣文王卫丛喆薛婧陈霆魏强秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

背景在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的疾病进程.95％以上的感染者出现典型性疾病进程,还有约5％HIV-1 感染者出现非典型疾病进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下...

背景在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的疾病进程.95％以上的感染者出现典型性疾病进程,还有约5％HIV-1 感染者出现非典型疾病进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下降不明显,疾病进程呈现不典型性.在小剂量多次粘膜感染艾滋病猴模型研究中,研究人员也发现类似情况.部分恒河猴被猴免疫缺陷病毒(SIV)/猴-人免疫缺陷病毒(SHIV)感染后,血浆病毒载量出现明显的延迟和(或)峰值下降现象.目前研究发现细胞免疫、中和抗体等特异性免疫在非典型性SIV 感染中的作用十分有限,而天然免疫一直被认为是病毒感染早期的一种重要防御机制,包括巨噬细胞的吞噬作用、NK 细胞的ADCC 作用以及树突细胞的抗原提呈作用等;但在非典型艾滋病毒感染过程中,天然免疫发挥作用及作用机制目尚不清楚.

关键词：

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HIV-1与pDCs的相互作用

HIV-1与pDCs的相互作用

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：彭卓颖薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的浆细胞样树突状细胞(Plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(Interferon α,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制... 详细信息

目的浆细胞样树突状细胞(Plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(Interferon α,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活适应性免疫应答。在HIV慢性感染期,pDCs通过调节免疫细胞发挥免疫抑制的作用,不断破坏淋巴细胞,从而造成免疫系统崩溃,促进疾病进程。本文将就HIV-1与pDCs之间的相互作用做一综述。

关键词：浆细胞样树突状细胞人类免疫缺陷病毒 Ⅰ型干扰素

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CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响

CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响

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2017第十九届中国科协年会

作者：李克雷薛婧丛喆陈霆魏强秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成部分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细...

HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成部分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细胞内上调Fas、FasL、TNF-α、TRAIL受体DR4和DR5的表达诱导细胞凋亡,还可以使细胞滞留在G2期导致胞内ROS升高促进凋亡.研究显示,CD45分子在HIV-1gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡中发挥调节作用,在gp120蛋白的作用下,CD45分子通过调节FasL的表达参与细胞凋亡.作为Ⅰ型跨膜糖蛋白,CD45分子主要以CD45RABC、CD45RO、CD45RA、CD45RB和CD45RC等异构体形式表达于淋巴细胞,其胞外结构域糖基化形式的差异对CD45异构体活性和功能具有重要影响.目前,CD45异构体在HIV感染引起的细胞凋亡方面研究甚少,为加深对CD45异构体在细胞凋亡过程中作用的理解,本研究通过构建稳定表达CD45异构体的细胞系,比较了CD45异构体在调节gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡过程中的差异,并进一步分析了其下游分子Lck的活性变化.在本研究中,我们首先比较了CD45+的Jurkat细胞和CD45－的J45.01细胞受到gp120诱导时凋亡率的变化.结果显示,Jurkat细胞可发生明显凋亡现象,J45.01细胞不发生凋亡,说明CD45分子在gp120介导的凋亡过程发挥了调节作用;随后,我们构建了5种稳定表达CD45异构体的细胞系,并比较了这5种异构体在gp120介导T细胞凋亡过程中的作用.结果发现,CD45RO可以明显调节细胞凋亡,其他异构体对细胞凋亡无调节作用;接下来,我们分析了CD45的糖基化形式对细胞凋亡的影响.O-聚糖存在于除CD45RO以外的异构体上,我们通过O-糖基化抑制剂去除这几种异构体细胞表面的O-糖基化.gp120蛋白诱导凋亡处理后,去除O-糖基化后的CD45RA-J45.01细胞表现出凋亡特性,其它异构体细胞未发生明显凋亡.说明O-聚糖对HIV-1gp120蛋白介导的细胞凋亡有一定的抑制作用,但在各异构体中发挥的作用大小并不一致,这可能与CD45异构体的空间结构有关.为了进一步说明CD45异构体在调节细胞凋亡中的功能差异,在HIV-1gp120蛋白诱导各个细胞系后,我们分析了CD45异构体酪氨酸磷酸酶的活性变化.通过比较CD45对其底物Lck的活性抑制位点Tyr505的去磷酸化程度,发现CD45RO可使Lck Tyr505发生明显的去磷酸化,说明HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后,CD45RO 的活性增强;Lck Tyr394 是Lck 的活化位点,该位点磷酸化程度增强代表Lck 活性增强.通过比较该位点磷酸化程度变化,发现在CD45RO-J45.01 细胞中Lck Tyr394 磷酸化程度增强,说明在HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后CD45RO 促进了Lck 的活化;Lck 的活化在胞内信号转导中具有重要作用,于是我们利用Lck的特异性抑制剂PP2 处理CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞,再经HIV-1 gp120 蛋白诱导凋亡处理,发现PP2可抑制CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞凋亡,说明Lck 的活化参与HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡.综上所述,本研究明确了CD45 异构体在调节HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡中存在的差异,揭示了这一凋亡过程主要是CD45RO 通过活化Lck 促使凋亡信号向胞内传导,进而对细胞凋亡起调节作用.本研究结果为HIV-1 感染引起的旁观者细胞凋亡奠定了理论基础.

关键词：

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SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化

SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化

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2017第十九届中国科协年会

作者：李想丛喆薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

背景唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有研究发现,HIV 感染机体后,组织巨...

背景唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有研究发现,HIV 感染机体后,组织巨噬细胞和外周血单核细胞高表达CD169,并且随着外周血血浆载量的升高而升高,CD169 在外周血单核细胞中表达量的变化,可以作为研究HIV/SIV 感染的一个早期的表面标记.而在VSV 等病毒的研究中发现,病毒感染单核巨噬细胞后可以诱导细胞释放IFN-α,从而诱导细胞表达CD169.本文拟观察恒河猴感染SIVmac239 前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169 分子表达量的变化,分析SIV 感染与CD169 表达的关系;并分析其变化与SIV 感染及细胞因子IFN-α作用的关系.方法本研究中,我们用SIVmac239 静脉途径感染正常中国恒河猴,运用流式细胞术检测不同感染时间外周血CD14+单核细胞及其表面分子CD169 的变化.同时采集正常恒河猴外周血,分离PBMC,流式细胞术分选CD14+单核细胞,分别使用SIVmac239 直接感染、和细胞因子IFN-α刺激CD14+单核细胞,流式细胞术检测细胞表面分子CD169 表达量的变化.结果正常恒河猴外周血CD14+单核细胞表面低表达CD169,经SIVmac239 病毒感染后,CD14+单核细胞的比例出现下降(P＜0.01),CD14+单核细胞表面CD169 表达量升高(P＜0.01),并且在感染的急性期,CD169 的表达量迅速增加.不同外周血单核细胞亚型CD14low/-CD16+,CD14++CD16- 和CD14+CD16+感染后CD169 的表达量均明显增高(P＜0.01),而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高相比其他两种亚群更为明显.本研究中,我们在体外用SIV 直接感染恒河猴外周血CD14+单核细胞,不能诱导单核细胞表达CD169,而细胞因子IFN-Α可以刺激CD14+单核细胞高表达CD169 分子.结论正常恒河猴经SIVmac239 病毒感染后,外周血单核细胞高表达CD169,不同亚群单核细胞表面CD169 分子均出现明显增加,而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高更为明显,提示CD14+CD16+单核细胞在感染中可能发挥重要的作用.病毒直接感染不能导致单核细胞高表达CD169,SIV 感染猴外周血单核细胞表面CD169 的升高是体内细胞因子,尤其是IFN-α作用的结果.

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HIV-1与pDCs的相互作用

HIV-1与pDCs的相互作用

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：彭卓颖薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室

目的浆细胞样树突状细胞(Plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(Interferonα,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活适应性免疫应答。在HIV慢性感染期,pDCs通过调节免疫细胞发挥免疫抑制的作用,不断破坏淋巴细胞,从而造成免疫系统崩溃,促进疾病进程。本文将就HIV-1与pDCs之间的相互作用做一综述。

关键词：浆细胞样树突状细胞人类免疫缺陷病毒 I型干扰素

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实时荧光定量Alu-PCR检测整合型SIV/SHIV DNA方法的建立

实时荧光定量Alu-PCR检测整合型SIV/SHIV DNA方法的建立

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第十四届中国实验动物科学年会

作者：童玲陈霆李想丛喆薛婧北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生和计划生育委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室

目的建立实时荧光定量Alu-PCR方法,检测SIV/SHIV感染恒河猴体内整合的前病毒DNA。方法提取SIV/SHIV感染猴PBMCs中的DNA,Alu-PCR扩增DNA上病毒LTR U3区域内长度为188bp的片段,将该片段与pGEM T载体连接,构建p GEM-SIV LTR188质粒。扩增... 详细信息

目的建立实时荧光定量Alu-PCR方法,检测SIV/SHIV感染恒河猴体内整合的前病毒DNA。方法提取SIV/SHIV感染猴PBMCs中的DNA,Alu-PCR扩增DNA上病毒LTR U3区域内长度为188bp的片段,将该片段与pGEM T载体连接,构建p GEM-SIV LTR188质粒。扩增纯化质粒并进行定量,10倍系列稀释后,做出标准曲线,作为TaqMan-MGB探针实时荧光定量Alu-PCR的标准品。结果建立的质粒标准品可精确定量到10copies/μL,利用该方法对4只SIV/SHIV感染猴PBMCs中整合型前病毒DNA进行检测,阳性率为100%,高于Alu-PCR 62.5%的阳性率。结论 TaqMan-MGB探针实时荧光定量Alu-PCR方法能够定量检测整合入宿主基因组中的前病毒DNA,灵敏度高,可以用于评价SIV/SHIV潜伏库的大小。

关键词： Alu-PCR 整合型SIV/SHIV 潜伏库

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