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第十届中国实验动物科学年会

作者：高锡强傅春燕薛婧王卫陈霆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的研究SIVmac239病毒分别通过直肠（Rectal infection:IR）及静脉（Intravenous infection:IV）感染恒河猴,在感染急性期外周血CD4T细胞数量与其细胞表面的死亡受体（CD95）表达量之间的变化关系。方法:将SIVmac239经直肠及静脉途径... 详细信息

目的研究SIVmac239病毒分别通过直肠（Rectal infection:IR）及静脉（Intravenous infection:IV）感染恒河猴,在感染急性期外周血CD4T细胞数量与其细胞表面的死亡受体（CD95）表达量之间的变化关系。方法:将SIVmac239经直肠及静脉途径各感染14只恒河猴。监测病毒载量、CD4T淋巴细胞数量及CD4/CD8比值的变化,从而明确感染。同时,在感染急性期内九个时间点采集静脉血,并利用流式细胞术分析CD4T细胞表面CD95的表达量。结果:静脉组恒河猴CD95表达量于第二天开始升高,第七天达到最高,同时CD4T淋巴细胞数降到最低。直肠组恒河猴也于感染后第二天开始升高,但第10天才达到最高值,CD4T淋巴细胞数于第17天降到最低。同静脉组相比,直肠组CD95表达量增高及CD4T细胞数降低均较晚出现,且其CD4T细胞数量降至最低晚于CD95表达量达到峰值一周后出现。结论:SIVmac239经直肠及静脉感染恒河猴后,伴随CD4T细胞表面CD95表达的升高,CD4T细胞数量逐渐下降。但不同感染途径对CD4T细胞表面CD95的表达量与CD4T淋巴细胞数的变化不尽相同,这可能由于不同感染途径造成CD95在感染急性期CD4T细胞数量降低中发挥的作用不同。

关键词： SIV CD4+T细胞病毒载量 CD95

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SHIVKU-1感染猴感染晚期血浆病毒分离结果分析

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医学动物防制 2014年第12期30卷 1361-1364,1367页

作者：丛喆徐珮董志会陈霆蒋虹魏强北京协和医学院比较医学中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的分离SHIVKU-1感染猴G1302V血浆中的病毒,以期得到一株具有较强感染力的X4嗜性病毒中国恒河猴适应株。方法用G1302V猴安乐死当天血浆与CEMx174细胞共培养,8周后收集培养上清及细胞,分别做p27蛋白水平及gag、gp120核酸序列测定。同时... 详细信息

目的分离SHIVKU-1感染猴G1302V血浆中的病毒,以期得到一株具有较强感染力的X4嗜性病毒中国恒河猴适应株。方法用G1302V猴安乐死当天血浆与CEMx174细胞共培养,8周后收集培养上清及细胞,分别做p27蛋白水平及gag、gp120核酸序列测定。同时测定感染猴安乐死时血液样本中p27蛋白水平,并进行核酸序列分析及病毒毒力滴定。结果 G1302V猴血浆病毒分离阴性。血浆p27蛋白水平阴性,TZM-bl细胞测定病毒毒力阴性。血浆病毒及血细胞前病毒DNA核酸序列检测阳性,病毒嗜性未发生改变。结论 SHIVKU-1感染猴G1302V安乐死当天血浆中的病毒嗜性未发生变化,病毒的完整性较差及病毒的毒力较低是病毒分离阴性的主要原因。

关键词： SHIVKU-1 CXCR4 病毒分离

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MK-801对小鼠学习记忆能力的影响

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阿尔茨海默病及相关病杂志 2018年第1期1卷 53-59页

作者：李祥磊张玲秦川孙秀萍北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室

目的:研究地卓西平(dizocilpine,MK-801)对小鼠学习记忆能力的影响。方法:将20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为MK-801组(n=10)和对照组(n=10),两组分别注射MK-801(0.1mg/kg)和等容量生理盐水30 min后,进行Morris水迷宫、Barnes迷宫和条件恐惧行为学实验,检测MK-801对小鼠学习记忆的影响。结果:Morris水迷宫实验定位航行期,MK-801组潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。MK-801组第二天至第四天游行距离长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);探索期MK-801组穿台次数和在平台象限停留时间少于对照组,潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。Barnes迷宫实验学习阶段MK-801组小鼠寻找目标洞的潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。测试阶段MK-801组进入目标区频次和停留时间少于对照组,潜伏期长于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.05);条件恐惧实验训练期MK-801组小鼠僵直时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);线索性条件恐惧实验中MK-801组僵直时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:MK-801可损伤小鼠空间参考记忆和条件性恐惧记忆。

关键词： MK-801 空间参考记忆条件性恐惧记忆小鼠行为学实验

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抗人B淋巴细胞单克隆抗体清除中国恒河猴体内B淋巴细胞效果观察

抗人B淋巴细胞单克隆抗体清除中国恒河猴体内B淋巴细胞效果观察

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第十届中国实验动物科学年会

作者：苏爱华丛喆王卫陈霆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的用抗人B淋巴细胞单克隆抗体（利妥昔单抗注射液,Rituximab）通过静脉滴注的方法敲除中国恒河猴体内B淋巴细胞,并观察其敲除效果,为建立B淋巴细胞缺失的恒河猴动物模型提供基础的实验数据。方法选取健康的中国恒河猴两只,静脉滴注抗... 详细信息

目的用抗人B淋巴细胞单克隆抗体（利妥昔单抗注射液,Rituximab）通过静脉滴注的方法敲除中国恒河猴体内B淋巴细胞,并观察其敲除效果,为建立B淋巴细胞缺失的恒河猴动物模型提供基础的实验数据。方法选取健康的中国恒河猴两只,静脉滴注抗人B淋巴细胞单克隆抗体,定期采集外周血、腹股沟淋巴结和十二指肠黏膜组织,制备淋巴细胞悬液,应用流式细胞术的方法系统性测定B淋巴细胞及T淋巴细胞亚群的变化。结果静脉滴注利妥昔单抗注射液（Rituximab）24小时后,中国恒河猴外周血中B淋巴细胞的缺失即能达到100%,持续约14天;腹股沟淋巴结中B淋巴细胞在静注7天时100%缺失;十二指肠黏膜组织中B淋巴细胞在静脉滴注7天后缺失达到90%,维持28天。并且在成功敲除B淋巴细胞的情况下,CD4T及CD8T淋巴细胞无明显波动,维持在一个稳定的水平。结论利妥昔单抗注射液（Rituximab）能有效去除中国恒河猴体内B淋巴细胞,为建立B淋巴细胞缺失动物模型奠定基础。

关键词：中国恒河猴 B淋巴细胞利妥昔单抗

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Exonuclease-1缺失延缓端粒酶缺失小鼠造血微环境的衰老

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中国比较医学杂志 2012年第5期22卷 37-43页

作者：石桂英林培容白琳鞠振宇中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 北京华信医院北京100016

目的研究Exo-1对端粒酶缺失小鼠造血微环境衰老的影响。方法以端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-)和Exo-1基因敲除小鼠(Exo-1-/-)杂交,并进一步互交产生第三代端粒酶基因敲除小鼠(G3Terc-/-)以及第三代Terc和Exo-1双基因敲除小鼠(G3Terc-/-Exo... 详细信息

目的研究Exo-1对端粒酶缺失小鼠造血微环境衰老的影响。方法以端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-)和Exo-1基因敲除小鼠(Exo-1-/-)杂交,并进一步互交产生第三代端粒酶基因敲除小鼠(G3Terc-/-)以及第三代Terc和Exo-1双基因敲除小鼠(G3Terc-/-Exo-1-/-)。以CD45.1野生型小鼠的骨髓细胞为供体,以2月龄G3Terc-/-或G3Terc-/-Exo-1-/-小鼠为受体,进行骨髓移植。在受体小鼠9月龄时,取骨髓、脾脏、胸腺、外周血等组织器官的细胞进行流式分析,研究G3Terc-/-和G3Terc-/-Exo-1-/-受体小鼠中的野生型供体来源的造血干细胞的发育分化。结果同G3Terc-/-小鼠相比,G3Terc-/-Exo-1-/-双基因敲除受体小鼠骨髓中野生型供体来源的B220+细胞比例升高,前体B细胞的比例也明显升高;脾脏B220+细胞的比例明显升高;胸腺发育正常;外周血中B220+细胞比例升高。结论 Exo-1缺失延缓了端粒酶基因敲除小鼠造血系统微环境的衰老,从而逆转了端粒功能障碍引起的骨髓造血干细胞发育分化异常。

关键词：端粒功能障碍 Exo-1 造血干细胞造血微环境

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RT-SHIV rt基因单拷贝PCR扩增方法的建立及初步应用

RT-SHIV rt基因单拷贝PCR扩增方法的建立及初步应用

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第十届中国实验动物科学年会

作者：鞠斌王卫丛喆姚南陈霆杜文达苏爱华高锡强魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究。方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循环数等条件,建立rt基因... 详细信息

目的建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究。方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循环数等条件,建立rt基因PCR扩增方法;在此基础上将模板进行有限稀释,摸索rt基因单拷贝PCR扩增条件;使用该方法扩增感染猴体内PT-SHIV病毒rt基因,BioEdit软件进行基因序列分析。结果筛选得到一组巢式PCR引物,成功建立了RT-SHIV rt基因PCR扩增方法;当模板浓度为100 copies/μL时,扩增产物为单拷贝序列;测序结果显示RT-SHIV感染猴d266和d294血浆样本分别存在1处和6处氨基酸突变。结论本研究建立的全长rt基因单拷贝PCR扩增方法特异性好、灵敏度高、重复性强,可以应用于各类RT-SHIV病毒的全长rt基因分析。

关键词： RT-SHIV 单拷贝PCR rt基因

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MicroRNA在乳腺癌转移中的作用

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现代肿瘤医学 2011年第10期19卷 2080-2084页

作者：刘学丽张连峰卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所和北京协和医学院比较医学中心北京100021

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性小分子RNA,在转录后水平抑制基因的表达。研究表明多种miRNAs在包括乳腺癌在内的多种肿瘤中扮演着癌基因或者抑癌基因的角色,并且在肿瘤发生发展的各个阶段都有特定的miRNAs参与。本文综述了乳腺癌侵袭和... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性小分子RNA,在转录后水平抑制基因的表达。研究表明多种miRNAs在包括乳腺癌在内的多种肿瘤中扮演着癌基因或者抑癌基因的角色,并且在肿瘤发生发展的各个阶段都有特定的miRNAs参与。本文综述了乳腺癌侵袭和转移过程中相关的miRNAs的作用。

关键词： MicroRNA 乳腺癌转移

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柚皮苷及其与吴茱萸碱联合用药对APPswe/PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆力的影响

柚皮苷及其与吴茱萸碱联合用药对APPswe/PS△E9转基因痴呆模型小...

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世界中联中药专业委员会第四届学术年会暨中药新药研发与中药资源可持续利用国际研讨会

作者：王冬梅马元武袁树民张旭马春梅张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京 100021 国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室，北京 100021 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京 100021 国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室，北京 100021国家中医药管理局人类疾病动物模型三级

目的：探讨柚皮苷及柚皮苷与吴茱萸碱联合用药对Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响，研究柚皮苷与吴茱萸碱联合使用是否具有协同或叠加作用。方法：Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠随机分组，每组12只，雌雄各半，... 详细信息

目的：探讨柚皮苷及柚皮苷与吴茱萸碱联合用药对Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响，研究柚皮苷与吴茱萸碱联合使用是否具有协同或叠加作用。方法：Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠随机分组，每组12只，雌雄各半，分别选择在3月龄和5月龄两个时间段开始进行治疗，各给药组按设定剂量分别单独或联合加入鼠粮中。3月龄给药16周，5月龄给药4周后进行水迷宫实验，以安理申作为阳性药对照，并与安慰剂组小鼠进行比较。Thioflavin-S染色检测单独使用柚皮苷治疗转基因小鼠脑组织老年斑的形成。结果：单独使用柚皮苷4周和16周，缩短寻找平台的潜伏期分别为22％，32％;单独使用吴茱萸碱4周和16周吴茱萸碱，缩短寻找平台的潜伏期分别为33％，10％。柚皮苷治疗16周减少海马老年斑26％。柚皮苷与吴茱萸碱联合应用能够显著缩短寻找平台的潜伏期47％。结论：单独使用柚皮苷或吴茱萸碱均能改善痴呆模型小鼠的学习记忆能力，柚皮苷长期的使用优于短期的治疗效果，但是吴茱萸碱短期有效，长期作用反而下降;柚皮苷与吴茱萸碱联合应用能够显著改善Appswe／PS△E9痴呆模型小鼠的学习记忆能力，但联合用药组并未表现出强于单独给药组的协同保护效应。

关键词：中药药理实验阿尔茨海默病病理机制学习记忆动物模型

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恒河猴艾滋病模型中枢神经系统及淋巴结病变的电镜观察

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中国比较医学杂志 2012年第6期22卷 5-8,83,84页

作者：徐艳峰孙丽华潘菊华卢耀增中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国中医科学院广安门医院北京100053

目的观察恒河猴艾滋病模型不同感染阶段中枢神经系统及淋巴结的超微结构改变,探讨艾滋病的发病机制和病理改变的发展过程。方法 15只恒河猴,1只为正常对照,其余14只静脉注射感染SIVmac239猴艾滋病病毒,分别于感染后1周,2周,1个月,2个月... 详细信息

目的观察恒河猴艾滋病模型不同感染阶段中枢神经系统及淋巴结的超微结构改变,探讨艾滋病的发病机制和病理改变的发展过程。方法 15只恒河猴,1只为正常对照,其余14只静脉注射感染SIVmac239猴艾滋病病毒,分别于感染后1周,2周,1个月,2个月,12个月,18个月取腹股沟淋巴结及下丘脑组织进行透射电镜检查。结果感染后1周即可出现淋巴结内淋巴细胞病变,表现为线粒体肿胀,嵴溶解,出现自噬体等。感染后2周及1个月时淋巴细胞病变主要表现为线粒体肿胀,嵴溶解;感染2个月时淋巴细胞细胞核形态出现明显改变。感染后12个月淋巴结内多数淋巴细胞出现病变,细胞肿胀,细胞器正常形态大部分消失;部分细胞出现溶解性坏死的特征。至感染后期(18个月时),淋巴结内局部淋巴细胞稀疏,细胞核肿胀或形态不规则。中枢神经系统的病变在感染后1周出现,表现为神经纤维肿胀,感染后2周出现神经元的病变,表现为神经元线粒体肿胀,粗面内质网脱颗粒,尼氏体消失;神经纤维内出现空泡。感染后12个月及18个月时,神经元和神经纤维的病变加重。结论在SIV感染早期,淋巴结内淋巴细胞及中枢神经系统即可出现病变,维持一段相对稳定的时间后,至疾病后期,病变加重。中枢神经系统与淋巴结的超微结构病变发展规律有一定的相似性。

关键词： SIV 艾滋病动物模型电镜恒河猴中枢神经系统淋巴结

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H7N9禽流感小鼠和雪貂模型的建立

H7N9禽流感小鼠和雪貂模型的建立

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第166场中国工程科技论坛——人兽共患病防控

作者：许黎黎鲍琳琳邓巍朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳丰于品雍伟东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京

建立H7N9禽流感的小鼠和雪貂模型,以及标准化的模型评价技术,是对相关药物或疫苗进行效用评价,以及对病毒的致病机制展开研究的前提保证.鼻腔接种A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒后,动物均表现出典型的临床症状,包括体重下降(小鼠、雪貂)、体... 详细信息

建立H7N9禽流感的小鼠和雪貂模型,以及标准化的模型评价技术,是对相关药物或疫苗进行效用评价,以及对病毒的致病机制展开研究的前提保证.鼻腔接种A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒后,动物均表现出典型的临床症状,包括体重下降(小鼠、雪貂)、体温升高(雪貂)、竖毛(小鼠)、流涕或打喷嚏(雪貂)、死亡(小鼠).小鼠和雪貂的呼吸道排毒高峰分别出现在感染后第2天和第3～5天.除呼吸道外,H7N9病毒还可从感染小鼠的脑、肝、脾、肾、小肠,以及雪貂的心脏、肝、嗅球中分离得到.小鼠和雪貂模型的病理表现为中度至重度肺炎.感染14天时,小鼠和雪貂对H7N9病毒特异性的抗血清滴度分别可达160和1280.动物模型同时还表现出显著的白细胞减少、淋巴细胞减少,中性粒细胞增多.综合以上比较医学、病原学、分子生物学、病理学方面的评价指标,证实H7N9禽流感的小鼠和雪貂模型构建成功,可为进一步的基础或应用研究奠定坚实的动物实验基础.

关键词：实验动物模型 H7N9禽流感致病机制临床病理

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