检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2002年第1期22卷 32-35页

作者：孙义民许彩民朱圣韬张晓玲王健杨洋潘华珍中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

本文以人急性髓系白血病M3 型耐药细胞株 (抗全反式维甲酸ATRA)MR2 为研究对象 ,通过细胞生长增殖分析 ,细胞凋亡相关指标的检测 ,细胞内活性氧自由基含量的测定等 ,探讨亚硒酸钠对MR2 细胞的凋亡诱导作用及其作用机制。结果发现 :(1 )... 详细信息

本文以人急性髓系白血病M3 型耐药细胞株 (抗全反式维甲酸ATRA)MR2 为研究对象 ,通过细胞生长增殖分析 ,细胞凋亡相关指标的检测 ,细胞内活性氧自由基含量的测定等 ,探讨亚硒酸钠对MR2 细胞的凋亡诱导作用及其作用机制。结果发现 :(1 )亚硒酸钠浓度大于 1 0 μmol L时对细胞株有明显的生长抑制作用 ,大于 2 0 μmol L时有明显的凋亡作用 ,并呈剂量时间依赖性增加。 40 μmol L的亚硒酸钠作用细胞 60h后 ,可使凋亡百分率超过 80 % ;(2 )亚硒酸钠作用细胞一定时间后可使胞内自由基水平增加 ,并在 2 4h时出现最大值。以上结果表明亚硒酸钠对MR2

关键词：亚硒酸钠凋亡自由基 MR2细胞株白血病

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皮下移植心钠素基因表达细胞胶囊对高血压大鼠的降血压效应

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中华医学杂志 2002年第16期82卷 1086-1089页

作者：李涛梁红雁卢果史瑞文卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所中国医学科学院中国协和医科大学

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分... 详细信息

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分别导入SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中 ,制备可从孔中排出心钠素多肽的微孔胶囊 ,并将表达和不表达人心钠素的新生鼠皮肤成纤维细胞分别装入不同的胶囊中 ,封闭后分别植于实验组和对照组幼龄SHR(各 1 0只 )的皮下。移植后每周测定大鼠血浆心钠素水平、血压、尿量、尿液钾、钠浓度和体重 ,连续 7周。结果　在逆转录病毒载体的介导下 ,人心钠素基因既可在逆转录病毒载体的包装细胞系中表达 [(5 84± 0 0 7)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ] ,也可在SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中表达 [(1 3 37± 2 36)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ]。皮下移植胶囊后第 1周 ,实验组大鼠血浆中的心钠素浓度 (1 31pg/ml± 8pg/ml)明显高于对照组 (1 0 4pg/ml± 7pg/ml,t=8 62 ,P <0 0 1 )。 7周观察期间 ,两组大鼠的血压均随个体发育而逐渐升高 ,但实验组血压[(1 2 9± 9)～ (1 69± 9)mmHg]却始终明显低于对照组 [(1 4 5± 1 0 )～ (1 81± 9)mmHg ,P <0 0 5～0 0 1 ) ] ,其中第

关键词：皮下移植心钠素基因表达细胞降血压效应高血压心钠素基因治疗微孔胶囊

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基因治疗与影像学

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中华放射学杂志 2002年第12期36卷 1151-1153页

作者：陆菁菁金征宇卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院放射科 100730 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

在临床医学研究领域，基因治疗代表了令人振奋的前沿，基因治疗的研究正在飞速地发展。到目前，外源基因的表达多是通过体外的实验来检测，比如聚合酶链反应、原位杂交和免疫组织化学染色等。但随着基因治疗从基础走向临床，这些体外方... 详细信息

在临床医学研究领域，基因治疗代表了令人振奋的前沿，基因治疗的研究正在飞速地发展。到目前，外源基因的表达多是通过体外的实验来检测，比如聚合酶链反应、原位杂交和免疫组织化学染色等。但随着基因治疗从基础走向临床，这些体外方法显示了较大的缺陷，即在临床试验中，不能无创、动态地获知转基因表达的部位、幅度和时间。因此，如何用体外的成像方法来监测转入基因的表达，这是基因治疗大规模进入试验前必须解决的问题。新近在影像技术方面的发展和突破，有望解决如上问题。放射学家只有熟悉基因治疗的原因、策略和新进展，才能跟进并从事这方面的前沿研究工作。笔者拟对基因治疗的原理和方法作简单介绍，并对影像学技术在基因治疗中的应用和进展作一综述。

关键词：基因治疗影像学免疫组织化学

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细胞膜蛋白与细胞骨架蛋白相互作用研究进展

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生物工程进展 2002年第1期22卷 33-38,18页

作者：周严胡晓燕王华瑾彭小忠袁建刚中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

细胞膜蛋白与胞浆骨架蛋白的相互作用对于维持细胞正常形态 ,细胞粘附与信号传导有重要作用。含有 4 .1 JEF结构域的蛋白 4 .1超家族与含有PDZ结构域的MAGUK蛋白家族能结合多种膜蛋白胞内区与胞浆蛋白 ,在膜蛋白与胞浆蛋白之间建立联系 ... 详细信息

细胞膜蛋白与胞浆骨架蛋白的相互作用对于维持细胞正常形态 ,细胞粘附与信号传导有重要作用。含有 4 .1 JEF结构域的蛋白 4 .1超家族与含有PDZ结构域的MAGUK蛋白家族能结合多种膜蛋白胞内区与胞浆蛋白 ,在膜蛋白与胞浆蛋白之间建立联系 ,对于细胞、细胞

关键词：蛋白4.1超家族 MAGUK蛋白家族细胞膜蛋白细胞骨架蛋白相互作用

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人和鼠脑cDNA文库的建立以及全长cDNA的批量分离

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自然科学进展 2002年第4期12卷 377-380页

作者：周严胡松年黄晓玮周海军谈昕煜刘瑾强华彭小忠强伯勤袁建刚中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

应用λZAP Express cDNA文库构建试剂盒构建了人3个月和8个月胎儿脑及大小鼠脑cD-NA文库.第2链cDNA经Sepharose CL-4B凝胶过滤层析后去除了较小的片段,使大片段cDNA具有较高的克隆效率.所建立的文库具有较长的插入片段.合并不同长度范... 详细信息

应用λZAP Express cDNA文库构建试剂盒构建了人3个月和8个月胎儿脑及大小鼠脑cD-NA文库.第2链cDNA经Sepharose CL-4B凝胶过滤层析后去除了较小的片段,使大片段cDNA具有较高的克隆效率.所建立的文库具有较长的插入片段.合并不同长度范围的人3个月胎儿脑cDNA片段,分别克隆入文库载体,获得了长片段、中片段、短片段及合并cDNA文库.从分级文库中各随机挑取300个克隆,经载体引物PCR扩增后,测定5’末端序列,一共获得894个表达序列标签(EST)序列.根据同源性比较结果将感兴趣的克隆环化后测定全长cDNA序列,得到了12条新的全长cDNA.这些文库的建立以及新EST,cDNA的分离为文库筛选和获得脑表达的新基因奠定了基础.

关键词：人鼠脑 cDNA文库批量分离 EST 人类基因组计划

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表皮生长因子介导的基因转移载体蛋白的制备

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中国医学科学院学报 2002年第4期24卷 381-384页

作者：方华圣张琳卢圣栋张树政 Department of Biology Zhengzhou Universityzhengzhou450052 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室北京100005 Institute of Microbiology Chinese Academy of Sciences

目的制备一种表皮生长因子(EGF)受体介导的、完全非病毒基因转移载体。方法通过PCR分别扩增出人类组蛋白第一功能域(H1)基因的编码序列和EGF的受体结合结构域(C环)基因的编码序列:将它们以EcoRⅠ位点连接后作为模板,PCR扩增出融合蛋白H1... 详细信息

目的制备一种表皮生长因子(EGF)受体介导的、完全非病毒基因转移载体。方法通过PCR分别扩增出人类组蛋白第一功能域(H1)基因的编码序列和EGF的受体结合结构域(C环)基因的编码序列:将它们以EcoRⅠ位点连接后作为模板,PCR扩增出融合蛋白H1EGFc的基因。在对此融合基因进行克隆、测序之后,构建原核表达载体PLYI-H1EGFc,并转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达。将表达出的融合蛋白利用SDS-PAGE电泳凝胶切割法进行纯化。结果表达出的目的蛋白与设计的融合蛋白分子量相符;经SDS-PAGE扫描,纯化后的目的蛋白纯度达94.02%。结论表达并纯化了融合蛋白H1EGFc。

关键词：表皮生长因子受体靶向基因载体恶性肿瘤基因治疗 PCR

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嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中国实验血液学杂志 2002年第6期10卷 577-579页

作者：杨洋许彩民王健陈岚潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院血液科北京100730

本研究建立嗜水气单胞菌 (HEC)毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)。方法为取正常人、贫血病人和PNH病人 (各 1 0例 )外周血标本 ,用HEC毒素处理外周血红细胞并于 630nm测定吸光度 ,以定量溶血程度。所测结果与流式... 详细信息

本研究建立嗜水气单胞菌 (HEC)毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)。方法为取正常人、贫血病人和PNH病人 (各 1 0例 )外周血标本 ,用HEC毒素处理外周血红细胞并于 630nm测定吸光度 ,以定量溶血程度。所测结果与流式细胞术检测CD59- 细胞进行验证。结果表明 ,PNH病人的红细胞对HEC毒素溶血试验有抗性 ,而正常人和非PNH病人的红细胞几乎全部溶解。结论 :HEC毒素溶血试验比色法对PNH是一种简便、快速。

关键词：嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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树载脂蛋白CⅡ的cDNA和蛋白质结构分析

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基础医学与临床 2002年第2期22卷 134-137页

作者：曾武威张坚陈保生吴钢张文成薛红中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所北京100050

以从树肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了树apoCⅡ的cDNA序列 ,并推导出其蛋白质氨基酸序列 ,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果显示 ,树apoCⅡcDNA序列 (在GenBan... 详细信息

以从树肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了树apoCⅡ的cDNA序列 ,并推导出其蛋白质氨基酸序列 ,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果显示 ,树apoCⅡcDNA序列 (在GenBank中的注册号为AF335 5 85 )长 483bp ,其中开放阅读框架 30 6bp ,编码 10 1个氨基酸的前原蛋白 ,其蛋白原由 79个氨基酸组成。树apoCⅡ的氨基酸顺序与人、猴、狗的同源性分别为 86 %、87%和 81%。与人及其它种属动物的相同序列比较显示 ,树apoCⅡ分子C 端激活LPL功能区比N 端脂质结合区更具保守性。

关键词：结构分析树Qu 载脂蛋白CⅡ cDNA 蛋白质 SMART-RACE技术

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汉族人群血管紧张素原基因的新单核苷酸多态性位点

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基础医学与临床 2002年第3期22卷 219-222,228页

作者：刘天承侯淑琴张琳杜志荣余跃邱长春中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京市房山区第一医院北京102400

应用改进的PCR SSCP技术、多种聚丙烯酰胺凝胶电泳和PCR产物直接测序等方法 ,分析人的血管紧张素原(AGT)基因启动子区 5 '远侧端的单核苷酸多态性 (SNP)。在非变性胶上 ,发现不同样品的PCR产物 (双链DNA分子 )电泳迁移率不同 ;而在... 详细信息

应用改进的PCR SSCP技术、多种聚丙烯酰胺凝胶电泳和PCR产物直接测序等方法 ,分析人的血管紧张素原(AGT)基因启动子区 5 '远侧端的单核苷酸多态性 (SNP)。在非变性胶上 ,发现不同样品的PCR产物 (双链DNA分子 )电泳迁移率不同 ;而在变性胶上 ,对应的单链DNA分子电泳迁移率相同 ;PCR产物直接测序的结果表明 ,在同一PCR扩增片段中同时存在两个SNPs位点 (G 10 74T ,A 1179G) ;通过 4 76个不同样品的实验结果 ,进一步证实两个SNPs位点处于完全的连锁不平衡关系。GenBank同源性比较结果显示 :A

关键词：汉族人群血管紧张素原基因单核苷酸多态性位点高血压诊断治疗

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藏族原发性高血压的遗传学研究

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中华医学杂志 2002年第15期82卷 1009-1012页

作者：卓玛次仁庄兰平崔超英仁丹边巴格桑罗布平措扎西次旦罗布陈勇岑维浚才旦邱长春许群刘英刘怡雯朱席琳方鸣武邬正赉西藏自治区人民医院心血管病研究所拉萨850000 西藏医学专科学校生理及生化教研室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的　探讨遗传因素在藏族原发性高血压 (EH)发病中的作用 ,以及血管紧张素Ⅱ的惟一前体物血管紧张素原 (AGT)基因变异是否参与EH发病。方法　以藏族 35 3例EH患者和 317名正常血压对照者为对象进行病例对照相关研究。根据相似家系结... 详细信息

目的　探讨遗传因素在藏族原发性高血压 (EH)发病中的作用 ,以及血管紧张素Ⅱ的惟一前体物血管紧张素原 (AGT)基因变异是否参与EH发病。方法　以藏族 35 3例EH患者和 317名正常血压对照者为对象进行病例对照相关研究。根据相似家系结构的指示对照和指示病例 1∶1配比分析 ,按Falconer公式计算藏族EH的遗传度。以聚合酶链反应 (PCR)和PCR产物的限制性片段长度多态性分析方法 ,分析AGT基因M2 35T多态性和 5′调控区 6A→G变异与藏族EH遗传易感的相关性。结果　 (1)藏族EH先证者 (指示病例 )一级亲属受累率为 43.3% ,EH遗传度为 77.2 %± 13 3%。(2 )EH患者血浆肾素活性 (μg·L-1·h-1)为 1.95± 0 .11,血管紧张素Ⅱ水平 (ng/L)为 72 .6± 4.6 ,均明显高于对照组 (分别为 1.5 9± 0 .11和 5 1.7± 4.6 ,P <0 .0 5 )。 (3)EH组AGT基因 5′调控区 6G等位基因频率 (0 .36 )明显高于对照组 (0 .2 7) (χ2 =9.35 ,P <0 .0 1) ,并与血管紧张素Ⅱ水平呈弱相关 ,而M2 35T多态性与EH易感无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　遗传因素在藏族EH发病中起重要作用。

关键词：藏族原发性高血压遗传学病例对照研究血管紧张素原多态性限制性片段长度

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