检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2005年第6期16卷 649-650页

作者：董华王军军应天翼李霆王恒樑许彩民中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

应用TRIzol法分步提取总RNA和总蛋白,提取的总RNA亮度强、完整,提取的总蛋白与经常规RIPA裂解液提取的全蛋白的质量相当。验证了从同一批次处理的细胞中同时提取总RNA和总蛋白进行检测分析是可行的,而且确保了实验条件的一致性,缩短了... 详细信息

应用TRIzol法分步提取总RNA和总蛋白,提取的总RNA亮度强、完整,提取的总蛋白与经常规RIPA裂解液提取的全蛋白的质量相当。验证了从同一批次处理的细胞中同时提取总RNA和总蛋白进行检测分析是可行的,而且确保了实验条件的一致性,缩短了实验周期。

关键词： TRIzol法总RNA 总蛋白提取

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应用UCSC数据库预测基因表达调控序列

应用UCSC数据库预测基因表达调控序列

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第六次全国医学遗传学学术会议

作者：尚丹丹张学中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学系、医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学系、医学分子生物学国家重点实验室

随着人类基因组测序工作的完成及更深入的RNA和蛋白质水平的实验开展,整合了海量数据并按照其特点进行分类的生物信息数据库成为生命科学研究重要的资源和参考。在寻找疾病与基因相互关系及研究基因表达调控的过程中,编码区以外的基因... 详细信息

随着人类基因组测序工作的完成及更深入的RNA和蛋白质水平的实验开展,整合了海量数据并按照其特点进行分类的生物信息数据库成为生命科学研究重要的资源和参考。在寻找疾病与基因相互关系及研究基因表达调控的过程中,编码区以外的基因间区域及基因内的非编码区越来越多地受到重视。这些区域中可能含有许多在进化中面临阳性选择而在不同物种中高度保守的序列,其中可能含有影响基因表达的重要功能元件,利用系统整合的数据库对这些序列进行研究将有利于新基因表达调控机制的发现及疾病发生机制的研究。

关键词：基因表达调控比较基因组保守性数据库编码序列编码区

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一种改进的重复多色荧光原位杂交技术

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石河子大学学报（自然科学版） 2005年第5期23卷 561-565页

作者：杨壹羚徐昕陈虹李锋韩亚玲罗曼莉吴玉鹏蔡岩张钰詹启敏吴旻王明荣中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 石河子大学医学院新疆石河子832002

多色荧光原位杂交技术是在常规荧光原位杂交技术基础上建立的一种染色体分析手段,已广泛应用于肿瘤遗传学的研究,尤其是用于染色体隐匿性重排及复杂核型分析。本研究旨在利用现有实验条件,建立一种可靠的人类全染色体分析方法———重... 详细信息

多色荧光原位杂交技术是在常规荧光原位杂交技术基础上建立的一种染色体分析手段,已广泛应用于肿瘤遗传学的研究,尤其是用于染色体隐匿性重排及复杂核型分析。本研究旨在利用现有实验条件,建立一种可靠的人类全染色体分析方法———重复多色荧光原位杂交技术(repetitive multicolour fluorescence in situ hybridization,RM-FISH)。采用特异的全染色体涂染探针,分别用Cy3、Cy5、FITC3种荧光素直接标记,组合制备4组六色的探针池,对同一染色体片先后进行4次杂交,通过装备了4组滤镜的荧光显微镜捕获信号。RM-FISH技术结合反相DAPI显带对1例原发性食管鳞癌进行核型分析,获得了全部染色体的特异信号。本研究建立的RM-FISH简便、易行,是光谱核型分析的一种较理想的替代技术。

关键词：荧光原位杂交核型染色体

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载脂蛋白C3基因多态性-482C>T与血浆脂质的关系

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中国动脉硬化杂志 2005年第3期13卷 335-339页

作者：李国平陈保生薛红曾武威吴刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学系医学分子生物学国家重点实验室脂蛋白组北京市100005

目的研究载脂蛋白C3基因上游调控区内-482C>T多态性位点与血浆脂质以及载脂蛋白水平的关系。方法应用聚合酶链反应—限制片长多态性方法逐个鉴定每个个体的基因型,并测定其血浆脂质和载脂蛋白水平。结果-482T等位基因携带者具有较高... 详细信息

目的研究载脂蛋白C3基因上游调控区内-482C>T多态性位点与血浆脂质以及载脂蛋白水平的关系。方法应用聚合酶链反应—限制片长多态性方法逐个鉴定每个个体的基因型,并测定其血浆脂质和载脂蛋白水平。结果-482T等位基因携带者具有较高的甘油三酯水平(P=0.044);同时该等位基因的携带者也具有较高的载脂蛋白C2水平(P=0.017)。结论载脂蛋白C3基因-482C>T位点和血浆甘油三酯以及其它几种脂蛋白密切相关。

关键词：分子生物学载脂蛋白C3基因多态性研究聚合酶链反应-限制片长多态性载脂蛋白C3 基因多态性甘油三酯

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酪蛋白激酶1在Wnt通路和生物节律中的研究进展

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医学分子生物学杂志 2005年第4期2卷 274-277页

作者：青轶王欣中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京市100005 国家人类基因组北方研究中心

酪蛋白激酶1(casein kinase 1,CK1)属于丝／苏氨酸蛋白激酶,在物种间和组织中分布都很广泛。在Wnt信号通路中,CK1直接或间接参与对Dvl-1、APC、Axin和β-Catenin的磷酸化反应,CK1或其具体亚单位在Wnt通路中发挥的是正调节作用还是负调... 详细信息

酪蛋白激酶1(casein kinase 1,CK1)属于丝／苏氨酸蛋白激酶,在物种间和组织中分布都很广泛。在Wnt信号通路中,CK1直接或间接参与对Dvl-1、APC、Axin和β-Catenin的磷酸化反应,CK1或其具体亚单位在Wnt通路中发挥的是正调节作用还是负调节作用尚存在争议。在生物节律中CK1主要是直接磷酸化作用Per等主要的节律基因蛋白,调节后者的降解,影响其核定位和基因表达,影响生物节律。

关键词：酪蛋白激酶1 Wnt 生物节律

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亚硒酸钠诱导白血病NB4细胞凋亡的比较蛋白质组学研究

亚硒酸钠诱导白血病NB4细胞凋亡的比较蛋白质组学研究

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中国蛋白质组学第三届学术大会

作者：董华应天翼李霆曹廷明王恒樑许彩民中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所全军分子遗传学重点实验室中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所全军分子遗传学重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所全军分子遗传学重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

硒是人体所必需的微量元素。有研究表明硒可以作为某些癌症的化学预防剂,近年来报道硒还可以作为肿瘤细胞的诱导凋亡药物,为肿瘤的治疗开辟了新的思路。但是其作用机制仍不清楚。急性早幼粒白血病是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,其... 详细信息

硒是人体所必需的微量元素。有研究表明硒可以作为某些癌症的化学预防剂,近年来报道硒还可以作为肿瘤细胞的诱导凋亡药物,为肿瘤的治疗开辟了新的思路。但是其作用机制仍不清楚。急性早幼粒白血病是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,其发生是一个多步骤、多诱因的过程。目前还没有一种有效的治疗药物。本实验室前期工作已经发现亚硒酸钠在无毒的剂量范围内,能诱导急性早幼粒白血病细胞株NB4细胞发生凋亡,与凋亡有关的基因芯片分析发现有30多个基因参与了这

关键词：白血病亚硒酸钠细胞凋亡 NB4 比较蛋白质组学

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EGF作用下人脑胶质瘤细胞生长抑制的机理

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中国医学科学院学报 2004年第2期26卷 139-144页

作者：王欣周明锐黄秉仁蔡良琬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的克隆、测序胶质细胞瘤 BT325细胞在生长抑制量表皮生长因子 (epithelial growth factor EGF)作用下差异表达的基因,了解 BT325细胞生长抑制的分子机制。方法在生长抑制量 EGF 作用下,用差异显示反转录聚合酶链反应 (differential ... 详细信息

目的克隆、测序胶质细胞瘤 BT325细胞在生长抑制量表皮生长因子 (epithelial growth factor EGF)作用下差异表达的基因,了解 BT325细胞生长抑制的分子机制。方法在生长抑制量 EGF 作用下,用差异显示反转录聚合酶链反应 (differential display reversed transcription polym erase chain reaction DDRT-PCR ) 技术分析人胶质细胞瘤 BT325细胞表达水平明显差异的 cDNA , 对差异显示基因进行序列测定和同源比较 , 并用 Dot blot及 Northernblot等方法进行验证。结果在 EGF 作用下,生长抑制的胶质瘤细胞中出现一些上调和下调表达的 cDNA 片段。克隆、分离了 6个表达明显上调的 ESTs,1个序列为新的基因片段,另 5个与已知基因有不同程度的同源,其中 1个与转醛缩酶基因的编码区同源。新近的研究已发现,转醛缩酶与细胞凋亡有关。结论高剂量 EGF 可诱导 BT325中许多基因表达水平的改变,EGF 抑制 BT325细胞生长可能与促进转醛缩酶基因的表达而诱导细胞凋亡有关。

关键词：胶质细胞瘤BT325 差异显示反转录聚合酶链反应表皮生长因子基因表达

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中华医学杂志 2004年第19期84卷 1635-1641页

作者：马宏刘彦信刘士廉许瑞安郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 香港大学分子生物学研究所

目的　研究腺相关病毒 (AAV)介导的重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL114 2 81)在体内外的表达规律及其杀伤肿瘤细胞的生物学活性 ,探讨重组腺相关病毒用于肿瘤基因治疗的应用前景。方法　构建编码TRAIL胞外区 114 2 8... 详细信息

目的　研究腺相关病毒 (AAV)介导的重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL114 2 81)在体内外的表达规律及其杀伤肿瘤细胞的生物学活性 ,探讨重组腺相关病毒用于肿瘤基因治疗的应用前景。方法　构建编码TRAIL胞外区 114 2 81位氨基酸的多肽的重组腺相关病毒载体rAAV TRAIL114 2 81,转染HEK2 93人胚肾细胞 ,获得高滴度的重组病毒颗粒后 ,转导人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat、人肝癌细胞株HepG2和SMMC 772 1以及人宫颈癌细胞株HeLa等 ,并采用经C5 7BL/ 6小鼠门静脉输入、皮下注射、肌内注射、腹腔注射或口服等不同给药途径 ,研究重组腺相关病毒介导的TRAIL114 2 81蛋白在体内外的表达规律。采用实时PCR方法测定重组病毒滴度。采用酶联免疫吸附实验 (ELISA)、Western印迹法和免疫组化法测定蛋白表达。采用MTT法测定重组rAAV TRAIL114 2 81杀伤肿瘤细胞的生物学活性。结果　成功地获得了rAAV TRAIL114 2 81重组病毒 ,其滴度为每毫升 7 5× 10 12基因组颗粒数 (Gps/ml)。重组病毒转导使TRAIL114 2 81在宿主细胞中高效表达 ,并可显著诱导Jurkat、HeLa和SMMC 772 1等肿瘤细胞凋亡 ,但不能诱导HepG2细胞凋亡。体内实验中 ,经小鼠门静脉输入重组病毒 ,可使TRAIL114 2

关键词： TRAIL 介导重组腺相关病毒表达规律重组病毒滴度体外抗肿瘤活性外源诱导杀伤

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化疗药物增强重组可溶性TRAIL抗肿瘤作用

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中国医学科学院学报 2004年第5期26卷 524-528页

作者：王明婕刘彦信李晓玲史娟刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨化疗药物对重组可溶性TRAIL穴rsTRAIL雪抗肿瘤作用的影响及其分子机制。方法13株不同肿瘤细胞经rsTRAIL处理后,采用MTS-PMS染色法和流式细胞仪技术测定细胞凋亡率,观察肿瘤细胞对rsTRAIL的敏感性;化疗药物与rsTRAIL联合作用于... 详细信息

目的探讨化疗药物对重组可溶性TRAIL穴rsTRAIL雪抗肿瘤作用的影响及其分子机制。方法13株不同肿瘤细胞经rsTRAIL处理后,采用MTS-PMS染色法和流式细胞仪技术测定细胞凋亡率,观察肿瘤细胞对rsTRAIL的敏感性;化疗药物与rsTRAIL联合作用于敏感性不同的肿瘤细胞检测细胞敏感性的变化;免疫印迹技术分析TRAIL受体DR5蛋白表达。结果13株肿瘤细胞中约46.2%穴6/13雪的细胞株对rsTRAIL敏感;化疗药物CHX、CP和8-CA可显著提高肿瘤细胞株对rsTRAIL细胞毒作用的敏感性;8-CA和TRAIL联合作用可上调DR5的蛋白表达。结论化疗药物CHX、CP和8-CA可增强rsTRAIL的抗肿瘤作用。

关键词：化疗药物 rsTRAIL 协同作用细胞凋亡 DR5

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K562细胞向红系分化相关EST的鉴别与分析

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中国医学科学院学报 2004年第2期26卷 150-154页

作者：余佳张俊武彭瀚陈等中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的鉴别并获取与 K562细胞向红系分化相关的表达序列标签 (expressed sequence tags,EST)。方法利用改进的差异显示反转录聚合酶链反应 (differential display reverse transcription polym erase chain reaction DDRT-PCR )方法,分析诱导前及用氯高铁血红素 (hem in)诱导 36h 后 K 562细胞的差异表达 cDNA 片段,挑选其中差异明显的cDNA 片段,经克隆、测序和基因信息学分析,挑选代表新序列或有一定功能线索的差异表达 EST 进行 Northern 印迹分析。结果获得诱导前后 K 562细胞的差异表达 cDNA 片段 60条,其中 38条表达上调,22条表达下调。对 40个差异表达明显的 cDNA 片段的生物信息学分析说明,23个 EST 与 GenBank 中已知序列有 95%以上同源性,10个为只与 dbEST 有高度同源的序列,7个未发现同源序列;进行 Northern 印迹分析的 8个差异表达 EST 中,6个 EST 的杂交结果与 DDRT-PCR 显示的差异表达状况一致。结论改进的 DDRT-PCR 方法能够较好地克服假阳性问题,这些差异表达 EST 的获得为进一步研究红系分化的分子机制和控调网络提供了一定线索。

关键词：差异显示反转录聚合酶链反应 K562细胞细胞分化表达序列标签

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