检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学杂志 1996年第1期12卷 22-26页

作者：曾明黄秉仁蔡良琬潘国宗中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

以ＨＢＶ－ＮＣｌＤＮＡ为材料研究了其中的Ｘ基因，首先确定了此Ｘ基因的顺序，即用ＡＢＩ自动萤光测序议测序证明了此Ｘ基因的３８５位核苷酸后缺失１９个核苷酸，从而引起移码突变，使此Ｘ基因共有５１９个核苷酸，编码１７２个氨基... 详细信息

以ＨＢＶ－ＮＣｌＤＮＡ为材料研究了其中的Ｘ基因，首先确定了此Ｘ基因的顺序，即用ＡＢＩ自动萤光测序议测序证明了此Ｘ基因的３８５位核苷酸后缺失１９个核苷酸，从而引起移码突变，使此Ｘ基因共有５１９个核苷酸，编码１７２个氨基酸，比另一种ａｄｒ型Ｘ蛋白多１８个氨基酸。在其第五位氨基酸上有一ＡＴＧ起始密码，也与另一Ｘ基因不同。经重组后获得在大肠杆菌中的热诱导表达，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法证明确为Ｘ蛋白，并有多态性。

关键词：乙型肝炎病毒 X基因序列分析体外表达

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HBV－NC1株X基因在真核细胞中表达，基因调控与致癌作用的初探

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生物化学杂志 1996年第1期12卷 27-30页

作者：曾明黄秉仁蔡良琬潘国宗中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

报道了ＨＢＶ－ＮＣ１株的Ｘ基因进入真核细胞表达载体ｐＸＴ１质粒的ＴＫ启动子之后，转染细胞及表达Ｘ基因成功。即发现包装病毒感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞后有Ｘ基因表达，用斑点杂交又证明此Ｘ基因已整合到细胞的基因组中，当与有ｐＭ... 详细信息

报道了ＨＢＶ－ＮＣ１株的Ｘ基因进入真核细胞表达载体ｐＸＴ１质粒的ＴＫ启动子之后，转染细胞及表达Ｘ基因成功。即发现包装病毒感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞后有Ｘ基因表达，用斑点杂交又证明此Ｘ基因已整合到细胞的基因组中，当与有ｐＭＳＨ报告基因的质粒共同感染真核细胞后确有激活转录调控现象出现。应用反义的ＸＲＮＡ表达载体感染肝癌细胞发现有接触抑制作用出现。

关键词：肿瘤乙型肝炎病毒 X基因基因调控病理

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基因治疗与伦理学

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中国优生与遗传杂志 1996年第S1期4卷 4-6页

作者：刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

基因治疗与伦理学中国医学科学院基础医学研究所（北京，１００００５）中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室刘德培，梁植权一、基因治疗与伦理学讨论的必要性与超前性在医学发展史中，每一项医学生物学新技术的产... 详细信息

基因治疗与伦理学中国医学科学院基础医学研究所（北京，１００００５）中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室刘德培，梁植权一、基因治疗与伦理学讨论的必要性与超前性在医学发展史中，每一项医学生物学新技术的产生和即将应用于临床，都要经过伦理学...

关键词：基因治疗生殖细胞基因转移技术伦理学问题受体细胞医学生物学基因操作早期胚胎转移基因染色体基因

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人免疫缺陷病毒Tat基因及LTR调控元件对基因表达的影响

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1996年第2期6卷 229-235页

作者：于小兵袁建刚陈菊凤强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

构建了不同长度人免疫缺陷病毒LTR启动子的荧光酶报告基因(Luc)表达质粒;瞬时转染Jurkat细胞;同时与含tat基因的表达质粒pCVI共转染;通过荧光酶活性的测定,分析Tat与LTR对基因表达的作用机制。实验结果表明LTR—158上游区有负调控元件... 详细信息

构建了不同长度人免疫缺陷病毒LTR启动子的荧光酶报告基因(Luc)表达质粒;瞬时转染Jurkat细胞;同时与含tat基因的表达质粒pCVI共转染;通过荧光酶活性的测定,分析Tat与LTR对基因表达的作用机制。实验结果表明LTR—158上游区有负调控元件的存在;证实了Tat的反式激活作用可以大大提高LTR指导的基因表达水平;研究结果揭示LTR中的增强子序列及其结合蛋白NF—kB在高水平的LTR转录以及Tat的反式激活作用中可能起重要作用。

关键词：人免疫缺陷病毒 LTR 基因表达 Tat基因调控元件

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β-珠蛋白基因簇表达调控的反式作用因子

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国外医学（分子生物学分册） 1996年第6期18卷 264-267页

作者：纪新军刘德培中国医学科学院基础医学研究所生化室中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

β-珠蛋白基因簇是研究真核基因表达调控的良好模型,其基因表达具有红系组织特异性和不同发育阶段特异性。这些特异性的产生依赖于组织特异性表达的和发育阶段特异性表达的反式作用因子与顺式作用元件间的相互作用。

关键词： β-珠蛋白基因反式作用因子基因调控

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一种检测细胞程序化死亡梯型DNA带的快速简便方法（论著摘要）

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中国医学科学院学报 1996年第2期 152-152页

作者：顾继杰黄秉仁蔡良琬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

一种检测细胞程序化死亡梯型ＤＮＡ带的快速简便方法（论著摘要）顾继杰，黄秉仁，蔡良琬（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）程序化死亡的细胞在显微镜下观察可见形态上... 详细信息

一种检测细胞程序化死亡梯型ＤＮＡ带的快速简便方法（论著摘要）顾继杰，黄秉仁，蔡良琬（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）程序化死亡的细胞在显微镜下观察可见形态上呈细胞核破碎、染色质凝缩等特征，其...

关键词：细胞程序化死亡中国医学科学院简便方法蔡良琬 DNA 医学分子生物学国家重点实验室摘要秉仁染色质国家自然科学基金酚抽提溶剂精制

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人分泌型白细胞介素2受体α链基因的克隆及其在真核细胞中的表达

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中国医学科学院学报 1995年第5期17卷 326-332页

作者：程小款杜恺衡凤燕吴宁华沈珝琲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室

删除人白细胞介素－２受体α链ｃＤＮＡ中编码胞质内１３个氨基酸及跨膜区１９个氨基酸残基的ＤＮＡ片段后，接上人工合成的终止寡核苷酸片段，改建后的ｃＤＮＡ与真核表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ重组成质粒ｐＣＭＶ／ｒｓＩＬ２Ｒ。用电打... 详细信息

删除人白细胞介素－２受体α链ｃＤＮＡ中编码胞质内１３个氨基酸及跨膜区１９个氨基酸残基的ＤＮＡ片段后，接上人工合成的终止寡核苷酸片段，改建后的ｃＤＮＡ与真核表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ重组成质粒ｐＣＭＶ／ｒｓＩＬ２Ｒ。用电打孔及磷酸钙法将此质粒转染ＣＨＯ细胞，经Ｇ４１８筛出表达Ｎｅｏ基因的克隆２０株，通过ｍＲＮＡ狭缝杂交及ＥＬＩＳＡ检测，有５株能稳定表达分泌型α链ｍＲＮＡ及蛋白，其中４株细胞培养上清中的ＩＬ２Ｒα链的含量达１４００Ｕ／ｍｌ以上。

关键词：白细胞介素2 受体重组克隆真核基因表达

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基因敲除

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生理科学进展 1995年第1期26卷 88-92页

作者：刘德培方福德梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室

基因敲除刘德培，方福德，梁植权（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）目录一、基因敲除（ｇｅｎｅｋｎｏｃｋｏｕｔ）方法二、胚胎干细胞中同源重组的筛选（一）正负筛... 详细信息

基因敲除刘德培，方福德，梁植权（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）目录一、基因敲除（ｇｅｎｅｋｎｏｃｋｏｕｔ）方法二、胚胎干细胞中同源重组的筛选（一）正负筛选法（二）标记基因的特异位点表达法...

关键词：基因基因敲除胚胎干细胞重组

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淋巴细胞中热休克蛋白90基因表达双重调控机制的研究

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基础医学与临床 1995年第6期15卷 23-27页

作者：王艳林沈玙琲吴宁华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国协和医科大学

体外正常生长的Ｊｕｒｋａｔ细胞中有高ｈｓｐ９０α，ｈｓｐ９０β和低ｈｓｐ７０基础性表达。ＰＨＡ和ＴＰＡ刺激对ｈｓｐ９０α和ｈｓｐ９０β呈迟缓型表达诱导，对ｈｓｐ７０无此种影响。４２℃热休克４０ｍｉｎ对三种ｈｓｐ表现为... 详细信息

体外正常生长的Ｊｕｒｋａｔ细胞中有高ｈｓｐ９０α，ｈｓｐ９０β和低ｈｓｐ７０基础性表达。ＰＨＡ和ＴＰＡ刺激对ｈｓｐ９０α和ｈｓｐ９０β呈迟缓型表达诱导，对ｈｓｐ７０无此种影响。４２℃热休克４０ｍｉｎ对三种ｈｓｐ表现为快速转录活化，但ｈｓｐ７０表达水平的增加明显高于两种ｈｓｐ９０。以富含ＨＳＥ核心序列的ＤＮＡ为探针研究细胞内ＨＳＦ与顺式作用元件的结合活性，发现正常培养或ＰＨＡ、ＴＰＡ刺激的Ｊｕｒｋａｔ细胞中的ＨＳＦ无ＨＳＥ结合活性，与之相反，热休克时ＨＳＦ与ＨＳＥ结合活性明显增加。以上研究结果提示，Ｔ淋巴细胞内ｈｓｐ９０表达存在双重调控机制。

关键词：淋巴细胞热休克蛋白基因表达应激

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外源性野生型p53基因对人喉癌等肿瘤细胞生长抑制的实验研究

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高技术通讯 1995年第10期5卷 51-54页

作者：陈晓巍刘德培王直中刘庆辉梁植权中国医学科学院北京协和医院耳鼻咽喉科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

以反转录病毒Ｎ２Ａ为载体，使携带自身正调控序列的野生型ｐ５３基因反向插入Ｎ２Ａ两端ＬＴＲ间的ＸｈｏＩ位点，获得了野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体，建立了产病毒的ＰＡ３１７细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有ｐ５... 详细信息

以反转录病毒Ｎ２Ａ为载体，使携带自身正调控序列的野生型ｐ５３基因反向插入Ｎ２Ａ两端ＬＴＲ间的ＸｈｏＩ位点，获得了野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体，建立了产病毒的ＰＡ３１７细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有ｐ５３基因异常的人喉癌细胞系（Ｈｅｐ２）和纤维肉瘤细胞系（ＭＤＡＨ０４１），Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析证实野生型ｐ５３基因反转录病毒前病毒能稳定整合在受体细胞染色体基因组上并有表达。感染病毒后的肿瘤细胞恶性表型发生了逆转，在裸鼠体内形成生长缓慢的移植瘤或不形成移植瘤。

关键词： p53基因喉癌肿瘤细胞生长抑制

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