检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动脉硬化杂志 2005年第3期13卷 335-339页

作者：李国平陈保生薛红曾武威吴刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学系医学分子生物学国家重点实验室脂蛋白组北京市100005

目的研究载脂蛋白C3基因上游调控区内-482C>T多态性位点与血浆脂质以及载脂蛋白水平的关系。方法应用聚合酶链反应—限制片长多态性方法逐个鉴定每个个体的基因型,并测定其血浆脂质和载脂蛋白水平。结果-482T等位基因携带者具有较高... 详细信息

目的研究载脂蛋白C3基因上游调控区内-482C>T多态性位点与血浆脂质以及载脂蛋白水平的关系。方法应用聚合酶链反应—限制片长多态性方法逐个鉴定每个个体的基因型,并测定其血浆脂质和载脂蛋白水平。结果-482T等位基因携带者具有较高的甘油三酯水平(P=0.044);同时该等位基因的携带者也具有较高的载脂蛋白C2水平(P=0.017)。结论载脂蛋白C3基因-482C>T位点和血浆甘油三酯以及其它几种脂蛋白密切相关。

关键词：分子生物学载脂蛋白C3基因多态性研究聚合酶链反应-限制片长多态性载脂蛋白C3 基因多态性甘油三酯

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人ATP7B基因在转基因大鼠的铜代谢通路中的功能分析

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中国比较医学杂志 2004年第4期14卷 193-199页

作者：孟雁三好一郎平林真澄本谷安正寺田邦彦上田正次杉山俊博笠井憲雪中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 日本东北大学大学院医学部附属动物实验施设日本雪印株式会社YS新技术研究所日本秋田大学医学部生物化学系

目的　利用转基因大鼠模型 ,研究人Wilson病致病基因ATP7B在铜代谢通路中的功能。方法　将构建的 7 1kb含有鸡 β肌动蛋白启动子的人正常ATP7BcDNA ,经显微注射法导入Wilson病动物模型LEC(long_evanscinnamon)大鼠受精卵的雄性原核。以R... 详细信息

目的　利用转基因大鼠模型 ,研究人Wilson病致病基因ATP7B在铜代谢通路中的功能。方法　将构建的 7 1kb含有鸡 β肌动蛋白启动子的人正常ATP7BcDNA ,经显微注射法导入Wilson病动物模型LEC(long_evanscinnamon)大鼠受精卵的雄性原核。以RT_PCR和Westernblot分析其在转基因大鼠各组织内的表达谱 ;用抗大鼠铜蓝蛋白抗体检测肝细胞全铜蓝蛋白 (holoceruloplasmin)的合成 ;同时对 6～ 30周龄的转基因大鼠血清铜蓝蛋白亚铁氧化酶活性、血清铜浓度、胆汁的铜分泌量、以及肝、肾和脑组织中的铜含量进行分年龄段连续测定和统计学分析。结果　在转基因大鼠体内 ,ATP7B在各种组织中获得广泛表达 ,其中肝和肌肉中的表达水平较高 ,肝细胞恢复了全铜蓝蛋白的合成 ,血清中的铜含量及胆汁的铜排泄量增加 ,肝、肾组织中的铜蓄积减少。结论　完整表达人ATP7B基因产物的转基因大鼠的肝细胞 ,通过CPN介导的铜向血清的分泌和调节铜向胆汁的排泄 ,恢复了ATP7B参与铜转运功能 ,Wilson病的铜蓄积与ATP7B基因的突变直接相关。

关键词： ATP7B 转基因大鼠铜代谢血清全铜蓝蛋白医学实验

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体内筛选展示脑血管内皮选择性定位多肽的噬菌体

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解剖学杂志 2003年第4期26卷 307-311页

作者：王帅王欣陈红黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的:通过噬菌体展示技术寻找能够定位于脑部血管内皮的多肽。方法:通过鼠尾静脉注射展示文库,将脑组织中得到的噬菌体体外扩增,重新注人于Balb/c小鼠。如此3轮筛选,测定所获噬菌体的核苷酸顺序及导出展示多肽的氨基酸顺序,并进行免疫... 详细信息

目的:通过噬菌体展示技术寻找能够定位于脑部血管内皮的多肽。方法:通过鼠尾静脉注射展示文库,将脑组织中得到的噬菌体体外扩增,重新注人于Balb/c小鼠。如此3轮筛选,测定所获噬菌体的核苷酸顺序及导出展示多肽的氨基酸顺序,并进行免疫组化分析。结果:得到了展示6个多肽序列的噬菌体克隆。展示3个多肽顺序的噬菌体在脑组织中有明显分布,它们是CSKTAEHTC,QLADTTHHRPWP和SWASLPVGMNSW。免疫组化分析显示展示CSKTAEHTC和QLADTTHHRPWP序列的噬菌体在脑部有明显的阳性分布。结论:展示QLADT-THHRPWP的噬菌体可能对脑血管内皮有更好的结合能力。

关键词：体内筛选脑血管内皮选择性定位多肽噬菌体

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应用蛋白质组学方法研究食管癌组织中异常表达的蛋白

应用蛋白质组学方法研究食管癌组织中异常表达的蛋白

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第七届海内外生命科学论坛

作者：胡海吴旻王明荣夏书华应万涛胡莉萍徐昕蔡岩蔡有余钱小红沈岩中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 军事医学科学院放射医学研究所基因组学与蛋白质组学实验室 100850 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学及分子生物学国家重点实验室北京100007

蛋白质组学方法是直接观察组织细胞中所有蛋白表达状态的高通量研究方法.通过比较在不同病理、生理状态下、不同外因刺激下细胞、组织蛋白的表达图谱，可能发现与特定生命现象相关的蛋白质.本文中应用这一方法分析了食管癌组织与配对的... 详细信息

蛋白质组学方法是直接观察组织细胞中所有蛋白表达状态的高通量研究方法.通过比较在不同病理、生理状态下、不同外因刺激下细胞、组织蛋白的表达图谱，可能发现与特定生命现象相关的蛋白质.本文中应用这一方法分析了食管癌组织与配对的癌旁组织间差异表达的蛋白.肿瘤细胞或癌旁食管上皮细胞通过显微切割方式从组织冰冻切片中获得，提取其总蛋白进行二维电泳.电泳胶被银染显色，应用Imagemarster 2-D Elite软件对获得的蛋白图谱加以分析，寻找癌与癌旁组织差异表达的蛋白，最后用质谱技术测定目的蛋白的肽质指纹谱.本研究共分析了34例食管癌及其配对的癌旁组织，发现并鉴定了29个差异表达的蛋白.其中9个在食管癌组织表达上调，包括HSP27、MHCⅠ等;20个在癌旁组织中高表达，如膜联蛋白(annexin)Ⅰ、膜联蛋白Ⅴ等.根据已有的资料提示，这些蛋白分别与细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应、转录调控等相关.以上结果表明蛋白质组学方法将会在肿瘤发生、发展机理的研究方面发挥重要作用，通过这种方法鉴定的肿瘤异常表达蛋白可能成为肿瘤诊断及预后判断的标志物.

关键词：蛋白质组学食管癌二维电泳蛋白表达

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人突变载脂蛋白E(apoE4,apoE7)转基因小鼠模型

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中国科学（C辑） 2001年第1期31卷 1-6页

作者：孙明增琦祖和中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为揭示人突变apoE基因表达在整体引起的异常反应并得到人类相关疾病的小鼠模型，用显微注射法制备了人apoE4与apoE7转基因小鼠, 用Southern印迹杂交及ELISA证明人apoE基因在首建鼠及其子代体内整合与表达良好, 具有遗传稳定性. 血清脂... 详细信息

为揭示人突变apoE基因表达在整体引起的异常反应并得到人类相关疾病的小鼠模型，用显微注射法制备了人apoE4与apoE7转基因小鼠, 用Southern印迹杂交及ELISA证明人apoE基因在首建鼠及其子代体内整合与表达良好, 具有遗传稳定性. 血清脂质与行为测定表明, 人apoE表达使小鼠患高脂血症并出现大脑学习与记忆功能衰退和寿命缩短, 高脂食物对正常鼠与转基鼠均可诱发高血脂, 但机制不同. 同时还证明, 氨基端与羧基端突变的apoE具有相同的致病作用.

关键词：转基因鼠人APOE7/E4 高脂血症学习记忆寿命载脂蛋白E

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动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析

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Acta Genetica Sinica 2001年第4期28卷 327-344,T001,T002页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德胡春雷王黎军姜焕宏冯阿曼张广民安社刚任远强郭建民胡淑贤樊军喜牛永利宋占军李迎樊胜军北京大学医学部免疫学系北京100083 北京军区联勤部卫生防疫队西安710032 第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 第四军医大学基础部病理学教研室西京医院病理科中国癌症研究基金会肿瘤研究所北京100094 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室生物学院生物化学与分子生物学系农业生物技术国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院实验动物研究所

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、... 详细信息

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、结构畸变率分析，了解７种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况。以相应的细胞株皮下接种裸鼠形成肿瘤实验、软琼脂细胞克隆形成率与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照，筛选出无致癌／致瘤性、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２）或极低致癌性的ＭＤＣＫ细胞系用于制苗，发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功。细胞系染色体遗传特征决定致瘤性质并具有种属特异性，得到一些１００％成瘤和１００％不成瘤的细胞株并探讨了与染色体组型的关系。对于肿瘤的发病机理及实验治疗，都是非常好的模型。一些细胞系不仅成瘤而且还可转移（致恶性横纹肌样瘤的ＢＨＫ－２１和Ｖｅｒｏ细胞株），其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。

关键词：动物肾细胞系人类子宫颈癌细胞系猪肾原代细胞染色体核型 G带核型遗传变异率数目变异结构畸变

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Bcl-2抑制CD3ε分子介导的T淋巴细胞凋亡

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中国医学科学院学报 1999年第6期21卷 421-424页

作者：刘彦信郑德先杨学辉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 河北医科大学生物化学教研室石家庄050017

目的研究Bcl-2过量表达对人Jurkat T淋巴细胞凋亡的影响.方法采用电穿孔法将bcl-2基因表达载体转染CD8ε阳性的人Jurkat T淋巴细胞(TJK),获得稳定表达Bcl-2的细胞株(TJK/Bcl-2)后,用抗CD8单克隆抗体刺激和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果Bc... 详细信息

目的研究Bcl-2过量表达对人Jurkat T淋巴细胞凋亡的影响.方法采用电穿孔法将bcl-2基因表达载体转染CD8ε阳性的人Jurkat T淋巴细胞(TJK),获得稳定表达Bcl-2的细胞株(TJK/Bcl-2)后,用抗CD8单克隆抗体刺激和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果Bcl-2过量表达可显著抑制TJK细胞凋亡.结论Bcl-2参与CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡的调控.

关键词： Bcl-2基因过量表达 CD3εT淋巴细胞凋亡

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