检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2010年第5期45卷 597-600页

作者：郑伟梁姝颋陈厚早鲁云彪刘德培中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶SIRT1对二甲亚砜(DMSO)诱导的P19CL6细胞向心肌细胞分化的作用。方法以稳定表达SIRT1及负显性突变体SIRT1H363Y的P19CL6细胞为实验组,稳定表达pcDNA3.1载体及空白P19CL6细胞为对照组。1%DMSO诱导细胞分化,... 详细信息

目的探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶SIRT1对二甲亚砜(DMSO)诱导的P19CL6细胞向心肌细胞分化的作用。方法以稳定表达SIRT1及负显性突变体SIRT1H363Y的P19CL6细胞为实验组,稳定表达pcDNA3.1载体及空白P19CL6细胞为对照组。1%DMSO诱导细胞分化,在诱导后0、4、8、12d,分别收取细胞,以RealtimePCR检测心脏特异性转录因子NKX2.5、GATA4和心脏功能蛋白a-MHC、ANP的表达。结果 SIRT1过表达使P19CL6细胞在分化过程中心脏特异性转录因子及功能蛋白的表达与对照相比均提前及升高,而负显性突变体SIRT1H363Y过表达使P19CL6细胞在分化过程中标志蛋白的表达与对照相比出现明显滞后和降低。结论 SIRT1促进DMSO诱导的P19CL6细胞向心肌细胞分化。

关键词： Sirtuin1 心肌细胞细胞分化

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PNH患者红细胞膜乙酰胆碱酯酶缺失的研究

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中华血液学杂志 1995年第8期16卷 396-398页

作者：许彩民卢红吕照江潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

用间接免疫荧光流式细胞术测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者和正常人红细胞乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）表达量，发现ＰＮＨ的ＡｃｈＥ表达远远低于正常，而且蛇毒溶血试验与ＡｃｈＥ的缺失呈正相关。由于ＰＮＨ正常和异常血细... 详细信息

用间接免疫荧光流式细胞术测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者和正常人红细胞乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）表达量，发现ＰＮＨ的ＡｃｈＥ表达远远低于正常，而且蛇毒溶血试验与ＡｃｈＥ的缺失呈正相关。由于ＰＮＨ正常和异常血细胞同时并存，为进一步研究ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞，采用ＰｒｏｔｅｉｎＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ６ＭＢ结合ＡｃｈＥ单抗亲和层析法分离出ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞。用￣３Ｈ－肌醇标记实验证明，正常红细胞膜在区带４．１有较高放射活性，而ＰＮＨ红细胞膜放射活性极低，ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞膜完全无放射活性；用免疫印渍实验证明区带４．１是ＡｃｈＥ存在部位。用酶联免疫方法直接检测ＰＮＨ患者和正常人血浆中ＡｃｈＥ含量，结果发现ＰＮＨ患者血浆中有ＡｃｈＥ存在，而正常人未能检出。

关键词：阵发性白红蛋白尿症红细胞膜乙酰胆碱酯酶

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小鼠髓母细胞瘤细胞系的建立与鉴定

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基础医学与临床 2009年第7期29卷 737-741页

作者：王月圆高云周汪兆琦沈岩佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室德国耶纳07745 Leibniz衰老研究所德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院实验动物中心北京100005

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用... 详细信息

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用Western blot法检测PARP-1蛋白的表达,用含有PARP-1蛋白功能区域的重组质粒pEGFP-C1-Hparp-1和绿色荧光蛋白空质粒pEGFP-C1转染细胞进行检测。结果新建立的小鼠髓母细胞瘤细胞系呈多角形、短梭形,免疫荧光分析可见未成熟神经元标志性蛋白Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin等表达阳性,Western blot检测PARP-1蛋白阴性,导入外源PAPR-1基因后呈阳性。结论成功建立了DNA损伤修复蛋白功能缺陷的小脑神经源性髓母细胞瘤细胞系,有助于深入研究髓母细胞瘤的病因及发病机制。

关键词：基因敲除 PARP—I 髓母细胞瘤细胞神经标记物

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电压门控钠离子通道与恶性肿瘤的转移

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生理科学进展 2011年第3期42卷 217-220页

作者：潘惠艳黄秉仁首都医科大学附属北京妇产医院中心实验室北京100006 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学和分子生物学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005

电压门控钠离子通道(VGSC)是可兴奋组织中动作电位的关键离子通道,具有重要的生理功能。近年来国内外研究发现,VGSC在转移的前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等细胞中表达,其增加了癌细胞的运动和侵袭,促使了癌症的转移,其还将被作为... 详细信息

电压门控钠离子通道(VGSC)是可兴奋组织中动作电位的关键离子通道,具有重要的生理功能。近年来国内外研究发现,VGSC在转移的前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等细胞中表达,其增加了癌细胞的运动和侵袭,促使了癌症的转移,其还将被作为治疗靶点而进行药物开发和临床应用。

关键词：电压门控钠离子通道癌症转移侵袭

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成骨不全症家系C0L1A1／2基因的大片段缺失突变分析

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中华医学遗传学杂志 2016年第4期33卷 431-434页

作者：汪涵赵秀丽任秀智肖继芳张学中国医学科学院基础医学研究所一北京协和医学院基础学院医学遗传学系、医学分子生物学国家重点实验室北京100005 天津市武清区人民医院 301700

目的在成骨不全症（osteogenesisimperfecta，OI）家系中进行COLlAl／e基因内大片段缺失突变的鉴定。方法应用多重连接探针扩增（multiplexligation-dependentprobeamplification，MLPA）方法对46例PCR-测序未见COLIAl／e基因突变的0I患者进行COL1A1／2基因大片段缺失突变检测，进一步应用荧光定量PCR或Gap—PCR-测序法对MLPA方法检测到的缺失突变进行验证。结果通过MLPA分析，在46例0I患者中检测到2例杂合性大片段缺失突变，先证者A为整个COL1A1基因的杂合缺失，先证者B为COL1A2基因第20外显子的杂合缺失；荧光定量PCR结果证实先证者A携带整个COLIAl基因的杂合缺失突变；Gap—PCR、DNA测序和凝胶电泳分析结果证实先证者B存在COLl4e基因内第17～23外显子的杂合缺失，断裂点区域有一个来自于5号染色体、长度637bp的DNA插入片段；先证者B家系成员突变验证显示其母亲为同一突变的杂合子。结论在中国人0I患者中发现了COL1A1和COL1A2基因的大片段缺失突变。本研究结果丰富了中国人群I型胶原相关OI致病基因突变谱，也为患病家系的产前基因诊断奠定了基础。

关键词：成骨不全症 COL1A1基因 COL1A2基因多重连接探针扩增大片段缺失

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人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆

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科学通报 1999年第19期44卷 2088-2094页

作者：杜光伟潘美辉周严陈建和姚辉袁建刚强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmot... 详细信息

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmotifs,RRMs)和一个富含甘氨酸 (G)、精氨酸 (R)、酪氨酸 (Y)的羧基端 .经数据库比较发现该蛋白与许多RRMRNA结合蛋白有较高的相似性 .还以鼠脑cDNA文库为模板 ,利用PCR扩增了鼠GRY RBPcDNA的全编码区和部分非编码区 .Northern杂交发现人GRY RBP在所检测的 8种成人组织中都有表达 ,在心脏。

关键词： cDNA RNA结合蛋白 GRY-RBP 克隆

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带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达

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中华医学杂志 1998年第1期78卷 66-67页

作者：李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权β４１／４２是印度次大陆、东南亚及我国南方常见的一种血红蛋白病，纯合子呈严重的β－地中海贫血。本实验旨在建立带红系，增强子... 详细信息

带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权β４１／４２是印度次大陆、东南亚及我国南方常见的一种血红蛋白病，纯合子呈严重的β－地中海贫血。本实验旨在建立带红系，增强子５′ＨＳ２的人β４１／４２珠蛋白基...

关键词：地中海贫血 β珠蛋白期转基因小鼠病理学

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主动免疫肌动蛋白样蛋白7a蛋白引起小鼠睾丸曲细精管的损伤

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中国医学科学院学报 2013年第6期35卷 595-600页

作者：付俊宗书东缪时英宋伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家人口和计划生育委员会科学技术研究所生殖生理学实验室北京100081

目的原核表达并纯化全长的人精子肌动蛋白样蛋白7a(ACTL7a)蛋白,检测主动免疫ACTL7a产生抗精子抗体后小鼠睾丸的损伤情况。方法构建重组表达质粒pET30a-ACTL7a,以重组质粒转化*** Rosseta(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表... 详细信息

目的原核表达并纯化全长的人精子肌动蛋白样蛋白7a(ACTL7a)蛋白,检测主动免疫ACTL7a产生抗精子抗体后小鼠睾丸的损伤情况。方法构建重组表达质粒pET30a-ACTL7a,以重组质粒转化*** Rosseta(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过镍离子金属螯合树脂纯化和SDS-PAGE切胶分离目的蛋白,溶胶后以表达的ACTL7a蛋白免疫ICR小鼠。ELISA检测抗体效价,PAS染色检测主动免疫后曲细精管的发育。结果经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达出目的蛋白ACTL7a,纯化后免疫ICR小鼠,经PAS染色发现主动免疫ACTL7a的小鼠其睾丸曲细精管出现生精细胞脱落、核凝聚、生精细胞缺如、生精细胞退化等异常的管腔。结论成功构建了ACTL7a基因全长的原核表达载体,经诱导表达和纯化获得高纯度的目的蛋白。发现ACTL7a蛋白主动免疫ICR小鼠产生抗精子抗体后,小鼠睾丸的曲细精管发生严重损伤。

关键词：肌动蛋白样蛋白7a 表达纯化主动免疫抗精子抗体

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应用荧光原位杂交技术检测人β~E珠蛋白基因在转基因小鼠染色体上的整合状态

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遗传 2001年第5期23卷 397-400页

作者：夏薇刘德培董文吉李斌郭志晨王晶李铁昌梁植权中国医学科学院基础医学研究医学所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为将荧光原位杂交技术应用于基因定位研究中 ,探讨一种能有效地检测转基因动物染色体上外源基因整合状态的实验方法 ,对小鼠腹腔注射秋水仙素后 ,取转基因小鼠骨髓制备中期染色体 ,将传统的FISH方法加以改进 ,检测外源基因在转基因小鼠... 详细信息

为将荧光原位杂交技术应用于基因定位研究中 ,探讨一种能有效地检测转基因动物染色体上外源基因整合状态的实验方法 ,对小鼠腹腔注射秋水仙素后 ,取转基因小鼠骨髓制备中期染色体 ,将传统的FISH方法加以改进 ,检测外源基因在转基因小鼠染色体上的整合状态。检测结果表明 ,外源人 βE 珠蛋白基因已稳定地整合于小鼠染色体上。FISH能直观地反映外源基因在转基因动物染色体上的整合状态 ,该方法可对转基因动物及基因转移研究中的外源基因整合后进行染色体定位检测。

关键词：荧光原位杂交技术人β^E珠蛋白基因转基因小鼠整合位点染色体

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PDZ结构域中间序列结合特性及其临床应用

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基础医学与临床 2012年第10期32卷 1230-1234页

作者：牟一蔡鹏飞高友鹤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005 中国医学科学院病原生物学研究所北京协和医学院寄生虫学实验室北京100730

PDZ结构域在生物体中广泛存在,介导着大量的蛋白质相互作用,参与和执行多种生物过程和生理功能。PDZ结构域常规地结合配体蛋白C末端4～5个氨基酸残基。然而,蛋白质的相互作用可能比想象中复杂得多。研究发现PDZ结构域还存在着非常规的... 详细信息

PDZ结构域在生物体中广泛存在,介导着大量的蛋白质相互作用,参与和执行多种生物过程和生理功能。PDZ结构域常规地结合配体蛋白C末端4～5个氨基酸残基。然而,蛋白质的相互作用可能比想象中复杂得多。研究发现PDZ结构域还存在着非常规的结合特性,PDZ结构域非常规结合的特性研究有助于丰富蛋白质相互作用网络,发现蛋白质新功能,并能以结合特性为基础研发安全有效的药物应用于相关疾病的治疗。

关键词： PDZ结构域非常规结合特性中间序列临床应用

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