检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2010年第7期30卷 683-688页

作者：陈廓肖占森窦会东侯淑琴刘岳峰陶晓明李峰邱长春中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京房山区第一医院检验科北京102400

目的探讨ApoB基因多态性与北京房山地区汉族人群脑卒中的关系。方法采取横断面病例-对照相关分析方法。用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测ApoB基因第26外显子C7673T位点和第1外显子5′端信号肽区9 bp... 详细信息

目的探讨ApoB基因多态性与北京房山地区汉族人群脑卒中的关系。方法采取横断面病例-对照相关分析方法。用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测ApoB基因第26外显子C7673T位点和第1外显子5′端信号肽区9 bp插入/缺失的基因型。汉族脑卒中患者547例(脑栓塞446例,脑出血81例);正常对照者886例。结果 ApoB基因C7673T位点和5′端信号肽区插入/缺失位点基因型均符合Hardy-Weinberg平衡定律,P值分别为0.6293和0.5359。ApoB基因C7673T位点的CC基因型和C等位基因频率在女性中栓塞组较对照组明显降低(P<0.01),而与男性脑卒中无关。5′端信号肽区插入/缺失位点,Ⅱ基因型频率在男性中脑出血组较对照组明显降低(P<0.01)。Ⅱ基因型和Ⅰ等位基因频率在男性中栓塞组较对照组明显降低(P<0.01);Ⅱ基因型和Ⅰ等位基因频率在女性中也有同样的趋势(P<0.01,P<0.05)。结论 ApoB基因C7673T位点多态性与房山地区汉族人群女性脑卒中相关,5′端信号肽区9 bp插入/缺失多态性与房山地区汉族人群中脑卒中易感相关。

关键词： ApoB基因脑卒中脑出血脑栓塞多态性

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一种宏观基因调控分子SATB1

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中国细胞生物学学报 2010年第1期32卷 31-36页

作者：王娟薛征董文吉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞生物学系北京100005 山东大学威海分校海洋学院威海264209 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

自身多聚化的SATB1(special AT-rich sequences binding protein 1)围绕异染色质形成笼状结构分布在细胞核中,SATB1不仅结合染色质DNA的核基质结合区(matrix attachment regions,MARs),也结合核基质,能够使DNA锚定在核基质并形成袢环状... 详细信息

自身多聚化的SATB1(special AT-rich sequences binding protein 1)围绕异染色质形成笼状结构分布在细胞核中,SATB1不仅结合染色质DNA的核基质结合区(matrix attachment regions,MARs),也结合核基质,能够使DNA锚定在核基质并形成袢环状结构(loop)。SATB1的磷酸化、乙酰化和小泛素化样修饰可调节其DNA结合能力和细胞核内亚结构的定位;SATB1与多种蛋白质相互作用,能够募集染色质重塑复合物和组蛋白修饰酶,实现对其靶基因表达的时空特异性调控。SATB1在调节细胞分化、细胞凋亡、肿瘤生长与转移和X染色体失活等方面起到重要作用,并有可能成为肿瘤转移的治疗靶点。

关键词： SATB1 核基质结合区翻译后修饰肿瘤转移

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人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶

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基础医学与临床 2010年第7期30卷 721-725页

作者：黄硕余琳汪洋刘音陈忠周中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室北京100193

目的探讨人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶条件。方法用分子克隆的方法构建重组质粒PHF8/pet28b,测序鉴定正确后将其转入Rosetta 2(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白。对融合蛋白进行分离纯化结晶,衍射分析,并用计算机软件解析其晶体结构。... 详细信息

目的探讨人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶条件。方法用分子克隆的方法构建重组质粒PHF8/pet28b,测序鉴定正确后将其转入Rosetta 2(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白。对融合蛋白进行分离纯化结晶,衍射分析,并用计算机软件解析其晶体结构。结果经过诱导,含有PHF8/pet28b的Rosetta 2在原核表达系统中表达出了相对分子质量为40 ku的c-PHF8融合蛋白,c-PHF8在合适的悬滴条件下得到六方柱晶体。结论利用原核表达体系成功地表达了人PHF8催化活性中心结构域并获得结晶,为进一步的三维结构解析和PHF8功能研究奠定了基础。

关键词： PHF8 原核表达纯化结晶

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MicroRNA-205对人皮肤上皮细胞迁移能力的调控

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基础医学与临床 2010年第6期30卷 613-618页

作者：余佳付红艺汪晓艳刘倩王芳冯涛张俊武中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 重庆医科大学附属第一医院皮肤科重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学系重庆400016

目的观察microRNA-205(miR-205)在人皮肤上皮细胞中的表达抑制和过量表达对于该类细胞迁移能力的影响。方法使用体外合成的miR-205抑制剂(antagomir-205)处理人皮肤上皮细胞并检测抑制效果,观察其对皮肤上皮细胞迁移的影响。在293TN细... 详细信息

目的观察microRNA-205(miR-205)在人皮肤上皮细胞中的表达抑制和过量表达对于该类细胞迁移能力的影响。方法使用体外合成的miR-205抑制剂(antagomir-205)处理人皮肤上皮细胞并检测抑制效果,观察其对皮肤上皮细胞迁移的影响。在293TN细胞中包装并收获能过表达成熟miR-205的重组慢病毒颗粒,感染人皮肤上皮细胞并检测过表达效果,进一步观察其对皮肤细胞迁移的影响。结果成功使用miR-205抑制剂实现对人皮肤上皮细胞内源性miR-205的抑制,证实其抑制了皮肤上皮细胞的迁移。成功获得过表达miR-205的重组慢病毒颗粒,证明miR-205可促进皮肤上皮细胞的迁移。结论 miR-205可以促进皮肤细胞的迁移。

关键词： microRNA 上皮细胞细胞迁移

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人干细胞因子模拟肽与c-JUN亮氨酸拉链融合蛋白的原核表达和生物学功能鉴定

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中国生物工程杂志 2010年第12期30卷 5-9页

作者：苏林孔燕刘长征杨克恭陈松森中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所北京100036

将两种人干细胞因子(hSCF)模拟肽(CS2和LS2)分别与c-jun亮氨酸拉链在大肠杆菌中融合表达,比较模拟肽与融合蛋白的生物学活性。通过搭桥PCR的方法,构建分别含有CS2和LS2与c-jun亮氨酸拉链融合蛋白及单独c-jun亮氨酸拉链编码序列的三种原... 详细信息

将两种人干细胞因子(hSCF)模拟肽(CS2和LS2)分别与c-jun亮氨酸拉链在大肠杆菌中融合表达,比较模拟肽与融合蛋白的生物学活性。通过搭桥PCR的方法,构建分别含有CS2和LS2与c-jun亮氨酸拉链融合蛋白及单独c-jun亮氨酸拉链编码序列的三种原核表达质粒pET30a-CSJ,pET30a-LSJ和pET30a-Jun,在*** BL21中进行表达,经镍柱和Sephadex G-50柱纯化后,SDS-PAGE和质谱法检测重组融合蛋白(CSJ,LSJ)和c-Jun的理化性质,MTT法检测融合蛋白刺激UT-7细胞增殖的活性。结果显示CSJ,LSJ和c-jun在***中均呈20%左右表达,经纯化后其纯度达95%以上,分子量分别为7336.08,7991.54和6672.74。细胞学活性实验显示:与CS2和LS2相比,CSJ和LSJ促进UT-7细胞增殖的活性提高约1000倍。在大肠杆菌中成功表达了hSCF模拟肽与c-jun亮氨酸拉链融合蛋白,融合蛋白活性显著高于合成的hSCF模拟肽。

关键词：人干细胞因子模拟肽融合蛋白亮氨酸拉链

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microRNA-122可调节线粒体的生物发生

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中国微生态学杂志 2010年第10期22卷 897-899,902页

作者：习杨李振亚张媛杨瑞峰刘德培医学分子生物学国家重点实验室基础医学研究所中国医学科学院北京协和医学院北京100005

目的探讨microRNA-122在代谢中的作用机制。方法首先通过生物信息学预测和双荧光素酶报告基因实验去验证14个代谢相关的microRNA-122靶基因,接着分别利用瞬时转染microRNA-122前体的293A细胞、HeLa细胞和HepG2细胞去检测维持线粒体形态... 详细信息

目的探讨microRNA-122在代谢中的作用机制。方法首先通过生物信息学预测和双荧光素酶报告基因实验去验证14个代谢相关的microRNA-122靶基因,接着分别利用瞬时转染microRNA-122前体的293A细胞、HeLa细胞和HepG2细胞去检测维持线粒体形态功能的3种标志蛋白Immt、AIF、Cox IV的含量以及通过NRF-1/2及ERR-α途径直接调控线粒体生物生成的PGC-1α的表达,并同时采用线粒体DNA定量实验和活体细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定实验检测这些相应的细胞稳定克隆中线粒体的拷贝数。结果发现其中一些预测的线粒体生物发生相关的靶基因能被microRNA-122显著影响,并且在过表达了microRNA-122前体的不同种类的细胞中Immt、AIF和Cox IV的蛋白水平,PGC-1α的RNA水平和线粒体的拷贝数都呈现较为显著的下降。结论 mi-croRNA-122可通过调节线粒体的生物发生来影响代谢。

关键词： MicroRNA-122 线粒体生物发生

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颗粒酶B的靶向构建及其抗肿瘤活性初步研究

颗粒酶B的靶向构建及其抗肿瘤活性初步研究

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全国医药生物技术2010年学术研讨会暨全军第十届生物技术学术研讨会

作者：李一叶李涛路金芝陈伟京王欣肖卫纯卢圣栋医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院

颗粒酶B(Granzyme B,GrB)虽然是CTL和NK细胞等发挥清除感染病原体和恶性转化细胞等免疫功能的主要效应分子,且具有从多种途径来诱导细胞发生caspase依赖和非依赖凋亡的能力,但因缺乏受体,它通常须在穿孔素的协助下才能发挥作用. 促... 详细信息

颗粒酶B(Granzyme B,GrB)虽然是CTL和NK细胞等发挥清除感染病原体和恶性转化细胞等免疫功能的主要效应分子,且具有从多种途径来诱导细胞发生caspase依赖和非依赖凋亡的能力,但因缺乏受体,它通常须在穿孔素的协助下才能发挥作用. 促性腺激素释放激素(GnRH)的受体(GnRHR)在多数源于性激素应答器官的肿瘤和部分源于非性激素应答器官的肿瘤中都有高表达,而在正常情况下该受体则主要局限于受下丘脑一垂体一性腺轴调节的组织,因此,该受体是一种理想的靶向抗肿瘤药物的攻击靶点.

关键词：颗粒酶B 靶向构建抗肿瘤活性

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基因工程包涵体中活性蛋白质的非变性萃取

基因工程包涵体中活性蛋白质的非变性萃取

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全国医药生物技术2010年学术研讨会暨全军第十届生物技术学术研讨会

作者：王欣路金芝陈伟京李涛卢圣栋医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院

肿瘤坏死因子α(TNFα)是一种多效性细胞因子,具有多种生物学活性,包括细胞毒活性和促进T细胞生长活性.本研究中XE-TNFαm是一种TNFα突变衍生物,即XE27dN7TNFα.天然的TNFα是一种含有157个氨基酸的非糖基化蛋白,热稳定性好,是相对分... 详细信息

肿瘤坏死因子α(TNFα)是一种多效性细胞因子,具有多种生物学活性,包括细胞毒活性和促进T细胞生长活性.本研究中XE-TNFαm是一种TNFα突变衍生物,即XE27dN7TNFα.天然的TNFα是一种含有157个氨基酸的非糖基化蛋白,热稳定性好,是相对分子量为34~40 kDa的紧密三体,三体分子是其活性形式.

关键词：基因工程包涵体活性蛋白质非变性萃取

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异源毒素蛋白质治疗白血病的新策略

异源毒素蛋白质治疗白血病的新策略

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全国医药生物技术2010年学术研讨会暨全军第十届生物技术学术研讨会

作者：王湛李涛路金芝陈伟京王欣肖卫纯卢圣栋医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院

本研究旨在探索一条新的途径,以运用人体异源毒素蛋白质靶向杀灭白血病细胞,避免其免疫原性,且使毒副作用最小化. 虽然源于动物、植物和微生物的具有抗肿瘤活性的蛋白质或多肽毒素有千种之多,且人们一直在采用基因工程等方法来研制... 详细信息

本研究旨在探索一条新的途径,以运用人体异源毒素蛋白质靶向杀灭白血病细胞,避免其免疫原性,且使毒副作用最小化. 虽然源于动物、植物和微生物的具有抗肿瘤活性的蛋白质或多肽毒素有千种之多,且人们一直在采用基因工程等方法来研制以这类毒素作为效应域的靶向融合蛋白,如由绿脓杆菌毒素PE或商陆毒素PAP等作为效应域,以TGF、IL-2或GnRH等作为靶向域的TGF-PE40、IL-2-PE40和GnRH-PAP等,但这类靶向融合蛋白至今未能成功用于临床.究其原因,主要在于这些异源毒素对于人体来说都具有极强的免疫原性,所致高水平的中和抗体一会使药物在重复使用时失效,二会导致病人发生过敏反应、甚至休克与死亡,且对肝脏或其他器官有严重的毒副作用.

关键词：异源毒素蛋白质白血病

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胆固醇酯转运蛋白基因TaqⅠB多态性与蒙古族原发性高血压的相关性

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基础医学与临床 2010年第7期30卷 677-682页

作者：陶晓明李国江侯淑琴萧占森佟伟军刘永跃吴刚张永红邱长春中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京市房山区第一医院北京102400 通辽市卫生防疫站内蒙古通辽028000 哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的分析胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因TaqⅠB多态性与蒙古族人群原发性高血压(EH)的关系。方法从内蒙古自治区通辽市蒙古族健康体检人群随机抽取1 819例进行病例-对照研究,其中高血压组840例,正常血压组979例。用多聚酶链式反应/限制性... 详细信息

目的分析胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因TaqⅠB多态性与蒙古族人群原发性高血压(EH)的关系。方法从内蒙古自治区通辽市蒙古族健康体检人群随机抽取1 819例进行病例-对照研究,其中高血压组840例,正常血压组979例。用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序方法鉴定CETP基因的TaqⅠB多态性位点基因型。结果 TaqⅠB位点GG、GA、AA基因型和G/A等位基因频率分布在整个人群、男性组和女性组中均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。无论在整体人群还是按性别分组的亚群中,原发性高血压组CETP基因TaqⅠB位点GG、GA、AA基因型和G/A等位基因频率分布和对照组无差异。在男性组中,与携带CETP基因TaqⅠB位点GG基因型的个体相比,AA型个体的高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高,总胆固醇和三酰甘油水平显著降低(P<0.05)。结论 CETP基因TaqⅠB多态性不是原发性高血压的直接危险因素,但可影响血脂水平,可能间接参与原发性高血压的发生。

关键词：蒙古族原发性高血压胆固醇酯转运蛋白 TaqⅠB基因多态性

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