检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2014年第6期34卷 782-786页

作者：胡愉赵慧王准何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国食品药品检定研究院病毒三室北京100050

目的建立信使RNA(mRNA)电转抗CD3抗体刺激的外周血单个核细胞(PBMC)的方法,为制备基因修饰CDR3δ移植型γδT淋巴细胞,为肿瘤细胞过继治疗提供新的技术方法。方法以SpeⅠ内切酶消化重组p GEM4Z/EGFP/A64质粒,回收纯化线性化的重组质粒p ... 详细信息

目的建立信使RNA(mRNA)电转抗CD3抗体刺激的外周血单个核细胞(PBMC)的方法,为制备基因修饰CDR3δ移植型γδT淋巴细胞,为肿瘤细胞过继治疗提供新的技术方法。方法以SpeⅠ内切酶消化重组p GEM4Z/EGFP/A64质粒,回收纯化线性化的重组质粒p GEM4Z/EGFP/A64,体外转录成mRNA;在电转参数为500 V500μs、400 V 500μs或300 V 500μs等不同条件下,转染抗CD3抗体刺激的人PBMC;用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪观察和分析绿色荧光蛋白的表达;台盼蓝染色计算不同电转条件下细胞的存活率,以确定mRNA电转最佳条件。结果 p GEM4Z/EGFP/A64质粒经过SpeⅠ内切酶酶切,获得了线性化的质粒;体外转录得到了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA;与其他转染条件相比,在500 V 500μs电转参数下转染EGFP mRNA的PBMC细胞,电转后48 h绿色荧光蛋白表达量较高;与其他转染条件相比,在500 V 500μs电转参数下转染EGFP mRNA的PBMC细胞,电转48 h后绿色荧光蛋白表达的阳性细胞高达77%;台盼蓝染色分析不同电转条件下细胞的存活率,在细胞电转48 h后,500 V 500μs参数电转条件下细胞存活率可以达到85%以上。结论电转参数为500 V 500μs的条件可用于电转mRNA于抗CD3抗体扩增的人PBMC,以制备基因修饰T淋巴细胞。

关键词：信使RNA 电转外周血单个核细胞加强型绿色荧光蛋白

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多聚丙氨酸延展突变与人类遗传病

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基础医学与临床 2005年第11期25卷 986-991页

作者：赵秀丽张学中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

三核苷酸重复的延展突变是导致遗传病的重要机制之一。根据产生机制和遗传特点的不同,可将其分为2类:一类是引起多种神经系统遗传病的动态突变;另一类就是本文重点介绍的多聚丙氨酸延展(polyalanine expan-sion,PAE)突变。PAE是指编码... 详细信息

三核苷酸重复的延展突变是导致遗传病的重要机制之一。根据产生机制和遗传特点的不同,可将其分为2类:一类是引起多种神经系统遗传病的动态突变;另一类就是本文重点介绍的多聚丙氨酸延展(polyalanine expan-sion,PAE)突变。PAE是指编码多聚丙氨酸的不完全GCN(N为A、C、G或T中任意一种)三核苷酸重复的延展,其结果是蛋白中多聚丙氨酸链的氨基酸数增多。PAE突变能在世代间稳定传递,其产生机制可能为等位基因间的不等交换。迄今为止,已在9种遗传病中发现PAE突变。本文将对PAE突变及所致遗传病作一介绍。

关键词：遗传病突变多聚丙氨酸延展三核苷酸重复

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敬爱的梁植权院士,协和生化系永远怀念您!

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生命的化学 2006年第4期26卷 376-379页

作者：中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所

中科院院士梁植权教授与世长辞了.我们失去了一位可亲可敬的师长,我国失去了一位杰出的生物化学与分子生物学家、医学教育家.梁先生毕生的科学业绩和崇高品德将永远铭刻在我们心中.

关键词：中科院院士梁生化协和生物学家生物化学教育家

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BALB/c小鼠衰老过程中大脑皮质组织基因表达的改变

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中华老年医学杂志 2005年第3期24卷 205-208页

作者：陈等张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

　目的　鉴别和克隆小鼠衰老相关基因,为揭示人体衰老机制提供线索。　方法　利用改进逆转录多聚酶链反应 (DDRT PCR) 技术分析了 4 月龄和 24 月龄 BALB/c小鼠大脑皮质组织中mRNA的差异表达。　结果　确定了42个差异表达 cDNA片段,在... 详细信息

　目的　鉴别和克隆小鼠衰老相关基因,为揭示人体衰老机制提供线索。　方法　利用改进逆转录多聚酶链反应 (DDRT PCR) 技术分析了 4 月龄和 24 月龄 BALB/c小鼠大脑皮质组织中mRNA的差异表达。　结果　确定了42个差异表达 cDNA片段,在衰老小鼠中表达上调和下调者各21个。其中17个为已知编码蛋白功能的基因片段,12个为已知基因序列但未知功能的基因片段,13个可能为新基因片段。在已知蛋白功能的基因中,与氧化应激、能量产生和蛋白质代谢等相关的基因分别为2个、3个和4个,此外还有参与细胞凋亡、神经退行性变和生长发育调节等基因表达的改变。　结论　小鼠衰老可能与机体氧化应激状态、能量产生和蛋白质代谢等的改变有关。

关键词：改变大脑皮质 BALB/c小鼠基因表达氧化应激差异表达基因片段衰老相关基因新基因克隆

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血管紧张肽转化酶2与肾素-血管紧张肽系统的研究进展

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生命的化学 2008年第5期28卷 625-628页

作者：魏斌张艳丽武警北京市总队第三医院北京100039 医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院北京100005

肾素-血管紧张肽系统(RAS)在维持血压稳态、水盐平衡,及局部组织器官的正常功能等方面具有重要的作用。局部RAS的失衡将导致这些器官的疾病。血管紧张肽转化酶2(ACE2)是ACE的同源物,作为RAS的重要负调节因子,平衡血管紧张肽Ⅱ的产生,维... 详细信息

肾素-血管紧张肽系统(RAS)在维持血压稳态、水盐平衡,及局部组织器官的正常功能等方面具有重要的作用。局部RAS的失衡将导致这些器官的疾病。血管紧张肽转化酶2(ACE2)是ACE的同源物,作为RAS的重要负调节因子,平衡血管紧张肽Ⅱ的产生,维持循环系统和局部组织中RAS的稳态。本文综述了在心血管、肺、肾、肝等器官的多种急、慢性疾病患者或动物模型中,RAS与ACE2所发挥的重要作用。

关键词：血管紧张肽转化酶2 血管紧张肽Ⅱ 肾素-血管紧张肽系统局部组织RAS

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一种宏观基因调控分子SATB1

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中国细胞生物学学报 2010年第1期32卷 31-36页

作者：王娟薛征董文吉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞生物学系北京100005 山东大学威海分校海洋学院威海264209 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

自身多聚化的SATB1(special AT-rich sequences binding protein 1)围绕异染色质形成笼状结构分布在细胞核中,SATB1不仅结合染色质DNA的核基质结合区(matrix attachment regions,MARs),也结合核基质,能够使DNA锚定在核基质并形成袢环状... 详细信息

自身多聚化的SATB1(special AT-rich sequences binding protein 1)围绕异染色质形成笼状结构分布在细胞核中,SATB1不仅结合染色质DNA的核基质结合区(matrix attachment regions,MARs),也结合核基质,能够使DNA锚定在核基质并形成袢环状结构(loop)。SATB1的磷酸化、乙酰化和小泛素化样修饰可调节其DNA结合能力和细胞核内亚结构的定位;SATB1与多种蛋白质相互作用,能够募集染色质重塑复合物和组蛋白修饰酶,实现对其靶基因表达的时空特异性调控。SATB1在调节细胞分化、细胞凋亡、肿瘤生长与转移和X染色体失活等方面起到重要作用,并有可能成为肿瘤转移的治疗靶点。

关键词： SATB1 核基质结合区翻译后修饰肿瘤转移

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衰老相关的T细胞生物学研究进展

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中华老年医学杂志 2003年第5期22卷 319-320页

作者：罗元明刘彦信郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

T细胞衰老是导致机体衰老、衰老相关疾病以及和寿命直接相关的重要因素.T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以,研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容... 详细信息

T细胞衰老是导致机体衰老、衰老相关疾病以及和寿命直接相关的重要因素.T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以,研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容.目前,人们在进行衰老生物学研究时,常用T细胞作为模型研究基因表达、细胞间通讯及体内平衡调节等,其他多细胞生物很少具有T细胞的优点.我们在此主要讨论引起T 细胞衰老的因素(机制)、由衰老而引起的T细胞功能的相关变化及检测衰老T细胞的常用方法.

关键词：衰老 T细胞生物学研究免疫系统

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皮下移植心钠素基因表达细胞胶囊对高血压大鼠的降血压效应

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中华医学杂志 2002年第16期82卷 1086-1089页

作者：李涛梁红雁卢果史瑞文卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所中国医学科学院中国协和医科大学

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分... 详细信息

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分别导入SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中 ,制备可从孔中排出心钠素多肽的微孔胶囊 ,并将表达和不表达人心钠素的新生鼠皮肤成纤维细胞分别装入不同的胶囊中 ,封闭后分别植于实验组和对照组幼龄SHR(各 1 0只 )的皮下。移植后每周测定大鼠血浆心钠素水平、血压、尿量、尿液钾、钠浓度和体重 ,连续 7周。结果　在逆转录病毒载体的介导下 ,人心钠素基因既可在逆转录病毒载体的包装细胞系中表达 [(5 84± 0 0 7)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ] ,也可在SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中表达 [(1 3 37± 2 36)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ]。皮下移植胶囊后第 1周 ,实验组大鼠血浆中的心钠素浓度 (1 31pg/ml± 8pg/ml)明显高于对照组 (1 0 4pg/ml± 7pg/ml,t=8 62 ,P <0 0 1 )。 7周观察期间 ,两组大鼠的血压均随个体发育而逐渐升高 ,但实验组血压[(1 2 9± 9)～ (1 69± 9)mmHg]却始终明显低于对照组 [(1 4 5± 1 0 )～ (1 81± 9)mmHg ,P <0 0 5～0 0 1 ) ] ,其中第

关键词：皮下移植心钠素基因表达细胞降血压效应高血压心钠素基因治疗微孔胶囊

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集成干扰素突变体IIFN/165S的构建及其生物学评价

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中国生物工程杂志 2013年第7期33卷 8-12页

作者：田硕姚文兵徐晨中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国药科大学 210009 北京三元基因工程有限公司北京102600

目的:通过定点突变,构建集成干扰素(IIFN/165S),以期获得高效的新型药物分子。方法:采用PCR体外定点突变技术,使集成干扰素IIFN基因的第165位密码子由CGT突变为AGT。扩增片段克隆入pET-23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。在L... 详细信息

目的:通过定点突变,构建集成干扰素(IIFN/165S),以期获得高效的新型药物分子。方法:采用PCR体外定点突变技术,使集成干扰素IIFN基因的第165位密码子由CGT突变为AGT。扩增片段克隆入pET-23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。在LB培养基中培养,经IPTG诱导表达的IIFN/165S经包涵体变性、复性以及层析纯化后,经SDS-PAGE、Western blot和MALDI-TOF-MS分析,用WISH-VSV系统进行抗病毒活性测定同时应用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:IIFN/165S以包涵体形式表达。纯化后,IIFN/165S的纯度大于95%,分子量为18172,比活性(7.63±0.22)×108IU/mg,诱导细胞凋亡率呈剂量依赖。结论:构建了IIFN/165S的表达载体,并成功地在大肠杆菌中表达,获得了高纯度高活性突变分子IIFN/165S。

关键词：集成干扰素定点突变高效抗肿瘤

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载脂蛋白A-I结构及其功能

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生命的化学 2008年第3期28卷 279-282页

作者：王云龙卢恕来陈保生中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院国家医学分子生物学重点实验室北京100005 青岛市市立医院口腔科青岛266011

载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-1,ApoA-I)是高密度脂蛋白的重要组成成分,高密度脂蛋白对于冠心病有重要的保护作用。盘状高密度脂蛋白或者ApoA-I是体内胆固醇逆向转运过程的关键因子,而游离的ApoA-I是胆固醇和磷脂的受体,因此,了解其结... 详细信息

载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-1,ApoA-I)是高密度脂蛋白的重要组成成分,高密度脂蛋白对于冠心病有重要的保护作用。盘状高密度脂蛋白或者ApoA-I是体内胆固醇逆向转运过程的关键因子,而游离的ApoA-I是胆固醇和磷脂的受体,因此,了解其结构对于研究其功能显得尤其重要。本文对ApoA-I单体的结构、未结合脂质,以及结合磷脂后的构象及其相关功能作了综述。

关键词：载脂蛋白A-I 结合磷脂盘状高密度脂蛋白

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