检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2008年第3期30卷 280-283,I0002页

作者：高静陈涛阴彬龚燕华强伯勤袁建刚彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究神经胶质瘤中表达缺失基因NECL1对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及Westernblot方法检测NECL1在1例人正常脑组织和6株人神经胶质瘤细胞系中的表达谱。选取NECL1缺失表达、转染效率相对... 详细信息

目的研究神经胶质瘤中表达缺失基因NECL1对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及Westernblot方法检测NECL1在1例人正常脑组织和6株人神经胶质瘤细胞系中的表达谱。选取NECL1缺失表达、转染效率相对较高的T98G细胞作为研究对象,采用细胞生长曲线、流式细胞仪、Hoechst染色等方法观察过表达NECL1对T98G细胞体外增殖能力的影响。结果NECL1在6株人神经胶质瘤细胞系中的表达明显下降或缺失。在T98G细胞中过表达NECL1,细胞生长速度较对照组明显变慢,凋亡细胞数较对照组明显增多。结论NECL1可能通过促进神经胶质瘤细胞系的凋亡而抑制其增殖。

关键词： NECL1 T98G细胞神经胶质瘤增殖凋亡

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过氧化物酶体增殖物激活受体γPro12Ala:老问题,新问题

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 591-592页

作者：方福德中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

本文就不同人群过氧化物酶体增殖物激活受体γPro12A la多态性与2型糖尿病发病风险和易感性的相关性的Meta分析结果进行了评述,并就中国疾病遗传分析研究工作中所存在的相关问题作了点评,提出了相关的建议。

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体糖尿病

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AD5-10与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关节炎

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中国医学科学院学报 2011年第4期33卷 367-370页

作者：周剑锁史娟朱洁卿袁海芹刘彦信尤欣郑德先中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究抗死亡受体抗体(AD5-10)与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关节炎的机制。方法采用MTT法检测成纤维样滑膜细胞(FLS)存活率,用蛋白免疫印迹研究细胞凋亡信号通路蛋白和p53、p21的变化。结果不同剂量的表阿霉素可增强FLS对AD5-10的... 详细信息

目的研究抗死亡受体抗体(AD5-10)与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关节炎的机制。方法采用MTT法检测成纤维样滑膜细胞(FLS)存活率,用蛋白免疫印迹研究细胞凋亡信号通路蛋白和p53、p21的变化。结果不同剂量的表阿霉素可增强FLS对AD5-10的敏感性,促进FLS凋亡。表阿霉素处理可使FLS细胞中caspase-3、-8、-9,c-FLIP,Bcl-2,p53和p21表达水平发生变化。结论表阿霉素可能通过改变p53、p21、c-FLIP和Bcl-2协同AD5-10诱导FLS凋亡。

关键词：类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞 AD5-10 表阿霉素

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载脂蛋白的结构和功能与病毒病的预防和治疗

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 448-451页

作者：陈保生中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

载脂蛋白(apo)是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alph... 详细信息

载脂蛋白(apo)是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alpha螺旋结构是其结合及转运脂质的结构基础。在HIV外壳结构中的一种糖蛋白(gp)也具有这种alpha螺旋结构。近年研究表明,载脂蛋白和由载脂蛋白组成的脂质体还具有抗肝炎病毒、抗HIV病毒、抗单纯疱疹和中和细菌内毒素的功能。以脂蛋白和载脂蛋白为主要成分构成的脂质体已成为运载抗病毒和抗肿瘤药物受体的靶向性载体。

关键词：载脂蛋白A1 双性alpha螺旋冠状病毒抗病毒

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小鼠大脑皮层层次特异表达基因天然反义转录物的筛选与鉴定

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 620-623页

作者：李萍张靖李爱花王珊谈小超阴彬彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的筛选并鉴定小鼠大脑皮层发育过程中皮层层次特异表达的基因是否存在天然反义转录物(NAT)。方法对63个小鼠大脑皮层层次特异表达的基因进行生物信息学预测,筛选出31个可能存在NAT的基因,从小鼠脑组织及神经系统来源的细胞系提取总RNA... 详细信息

目的筛选并鉴定小鼠大脑皮层发育过程中皮层层次特异表达的基因是否存在天然反义转录物(NAT)。方法对63个小鼠大脑皮层层次特异表达的基因进行生物信息学预测,筛选出31个可能存在NAT的基因,从小鼠脑组织及神经系统来源的细胞系提取总RNA,采用RT-PCR方法对筛选阳性基因进行鉴定并克隆到pGEM-T载体中进行测序。结果 31个经生物信息学预测的基因中,8个为NAT阳性。结论小鼠大脑皮层发育过程中皮层层次特异表达的基因存在NAT,NAT可能通过调控编码基因影响小鼠皮层发育。

关键词：天然反义转录物小鼠大脑皮层筛选鉴定

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HZF1在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备

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中国医学科学院学报 2007年第6期29卷 772-776页

作者：彭瀚张昕杜占文张俊武中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体。方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化。以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰大... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体。方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化。以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰大白兔实施多次免疫(间隔时间分别为3、2和2周)。用ELISA和Westernblot检测抗体效价和特异性。结果获得兔抗HZF1抗体,经过ELISA检测,效价在1:100000以上。Westernblot显示兔抗HZF1抗体能够特异性检测氯高铁血红素诱导的K562细胞中的HZF1蛋白。结论得到高特异性的兔抗HZF1抗体,为HZF1的功能研究以及组织和细胞中HZF1的检测奠定了一定基础。

关键词： HZF1基因原核表达亲和纯化抗体

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GAGA元件相关蛋白在人类细胞中对含有果蝇GAGA元件启动子的调控

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 765-769页

作者：赵吉成陈永军张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨在人类细胞中GAGA元件相关蛋白(GRP)是否对含有果蝇GAGA元件(dGAGA)的启动子具有调控作用及其机制。方法共转染果蝇GAGA因子(dGAF)、GRP与含有野生型或突变型dGAGA的ftz启动子氯霉素乙酰转移酶CAT报告基因质粒,利用实时RT-PCR... 详细信息

目的探讨在人类细胞中GAGA元件相关蛋白(GRP)是否对含有果蝇GAGA元件(dGAGA)的启动子具有调控作用及其机制。方法共转染果蝇GAGA因子(dGAF)、GRP与含有野生型或突变型dGAGA的ftz启动子氯霉素乙酰转移酶CAT报告基因质粒,利用实时RT-PCR检测启动子活性;电泳迁移率变更分析检测Jurkat细胞核抽提物与dGAGA探针的结合。结果Jurkat细胞内,GRP既可单独、也可协同dGAF激活含野生型GAGA元件的ftz启动子活性,使该活性在一定范围内以剂量依赖关系升高,过量时,则引起阻遏作用;而GRP与dGAF均不能激活含突变型GAGA元件的ftz启动子。电泳迁移率变更分析初步显示Jurkat细胞内有与GAGA元件结合的蛋白存在。结论Jurkat细胞中有人类GAGA元件结合蛋白存在,它既可与GAGA元件结合直接参与人类基因的调控,又可介导依赖于GRP剂量对相关基因的双向调节。

关键词： GAGA元件相关蛋白 GAGA元件果蝇GAGA因子启动子活性

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串联亲和纯化技术筛选Bat3的相互作用蛋白质

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中国医学科学院学报 2014年第1期36卷 1-4页

作者：吴为李琴山宋伟缪时英王琳芳中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的寻找与Bat3结合的蛋白质。方法采用串联亲和纯化技术,在Bat3编码序列羧基端融合Strep2和FLAG 2个分子标签,以此为诱饵筛选与其特异结合的蛋白质,最后进行质谱鉴定。结果筛选到1种蛋白质分子,命名为Ubl4A,免疫共沉淀结果显示Ubl4A可... 详细信息

目的寻找与Bat3结合的蛋白质。方法采用串联亲和纯化技术,在Bat3编码序列羧基端融合Strep2和FLAG 2个分子标签,以此为诱饵筛选与其特异结合的蛋白质,最后进行质谱鉴定。结果筛选到1种蛋白质分子,命名为Ubl4A,免疫共沉淀结果显示Ubl4A可与Bat3相互结合。结论成功建立了串联亲和纯化技术平台,分离出可与Bat3相互作用的蛋白质Ubl4A。

关键词： Bat3 凋亡串联亲和纯化

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间充质干细胞介导的TRAIL可控性表达及其杀伤人肝癌细胞的活性研究

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中华医学杂志 2011年第8期91卷 544-548页

作者：刘铮马宏史娟张亚玺刘彦信郑德先中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）在间充质干细胞中可控性表达及其对肿瘤细胞的杀伤活性，探索问充质干细胞用于肿瘤治疗的前景。方法构建TRAIL可控性表达的腺病毒载体Ad—Tet—TRE-TRAIL，包装获得重组腺病毒后，感染小... 详细信息

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）在间充质干细胞中可控性表达及其对肿瘤细胞的杀伤活性，探索问充质干细胞用于肿瘤治疗的前景。方法构建TRAIL可控性表达的腺病毒载体Ad—Tet—TRE-TRAIL，包装获得重组腺病毒后，感染小鼠间充质干细胞，免疫印迹法和酶联免疫吸附法测定间充质干细胞TRAIL可控性表达和分泌。四甲基偶氮唑盐（MrTT）法测定TRAIL抑制肝癌细胞生长的能力。膜联蛋白（Annexin）-V／碘化丙啶（PI）染色和流式细胞术测定TRAIL对肝癌细胞的杀伤活性。结果重组腺病毒Ad—Tet-TRE—TRAIL感染的小鼠间充质干细胞能够在强力霉素的控制下表达和分泌TRAIL，并显著抑制SMMC-7402人肝癌细胞生长，其机制是诱导肝癌细胞凋亡，结果显示SMMC-7402细胞在杀伤24、48h后的存活率分别为66．5％±4．8％和42．9％±6．5％，而对照组（未加强力霉素）的细胞存活率分别为97．3％±2．2％和99．4％±4．7％。结论间充质干细胞介导TRAIL可控性表达进而有效诱导肝癌细胞凋亡并抑制肝癌细胞生长，为肿瘤的细胞治疗提供了新的策略。

关键词：干细胞基因表达调控癌肝细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞治疗

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稳定表达SirT7对其转染的P19细胞的增殖抑制作用

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 724-727页

作者：吕建祎张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对... 详细信息

目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对P19细胞生长和细胞周期的影响。结果稳定表达Sirt7 P19细胞系细胞生长速度减慢,流式细胞仪荧光分析呈现明显的G1/S期阻滞。结论SirT7可导致P19细胞的周期阻滞,并抑制细胞的增殖。

关键词： SirT7 细胞增殖细胞周期

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