检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2003年第5期25卷 504-507页

作者：谈昕煜樊峥王华瑾石磊阴彬倪安平秦川邹柯沈岩袁建刚强伯勤彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 Department of Clinical Laboratory PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Institute of Experimental Animal CAMS and PUMCBeijing

目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化***21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及... 详细信息

目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化***21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及纯化。结论用基因重组方法表达的SARS冠状病毒N蛋白可为其进一步功能研究提供条件。

关键词： SARS冠状病毒 N蛋白

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家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因复合纯合突变一例

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中华心血管病杂志 2003年第9期31卷 653-656页

作者：王绿娅曹守春蔺洁吴邦俊刘舒潘晓冬杜兰平秦彦文陈保生北京市心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室 100029 南华大学基础医学院生物化学分子生物学教研室中国医学科学院基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室

目的　检测家族性高胆固醇血症 (FH)患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变 ,分析基因型与临床表型间的关系 ,探讨其分子病理机制。方法　以 1例临床诊断为FH纯合子患儿及其父母的基因组DNA为模板 ,用降落PCR方法 ,在同一程序中分别对... 详细信息

目的　检测家族性高胆固醇血症 (FH)患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变 ,分析基因型与临床表型间的关系 ,探讨其分子病理机制。方法　以 1例临床诊断为FH纯合子患儿及其父母的基因组DNA为模板 ,用降落PCR方法 ,在同一程序中分别对LDL R基因的启动子和全部 18个外显子片段进行扩增 ,琼脂糖凝胶电泳检测 ,扩增产物直接进行核苷酸序列分析 ,并检索FH突变数据库 (www ucl ac uk/fh)。此外采用PCR 限制性内切酶技术 ,检测载脂蛋白 (Apo)B10 0 基因Q35 0 0R突变 ,以排除家族性ApoB10 0 缺陷症。结果　该患儿及其父亲第 4外显子发生Cys12 2 →Tyr(C12 2Y)杂合错义突变 ,同时患儿及其母第 9外显子发生Thr3 83 →Ile(T383I)杂合错义突变 ,因此该患儿LDL R基因第 4、9外显子各存在一个杂合突变 ,上述突变尚未在FH突变数据库见到。未检测出患儿及其父母ApoB10 0 Q35 0 0R突变。结论　此患儿为LDL R基因存在C12 2Y、T383I复合纯合突变并分别来自其父母 ;以上两位点突变可引起FH ;是FH患者LDL R基因的一种新突变类型。

关键词：家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变聚合酶链反应临床表型

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大鼠神经元凋亡相关碱性蛋白ARBP cDNA的克隆和功能

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第1期19卷 36-40页

作者：白氡明洪周新富陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 南澳洲Flinders大学医学院生理系

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广... 详细信息

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广泛的分布 .在R2L1细胞中转染ARBP反义cDNA表达载体后 ,既可以促进细胞增殖 ,又可以抑制去血清诱导的细胞凋亡 .因而 ,ARBP蛋白对神经元细胞的凋亡具有重要的调节作用 .

关键词：神经营养因子低亲和力受体 p75NTR cDNA末端快速扩增凋亡相关碱性蛋白大鼠神经元

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小鼠RTN3基因mRNA和蛋白在小鼠中枢神经系统的分布模式

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科学通报 2003年第17期48卷 1851-1856页

作者：刘瑾黄晓玮彭小忠阳洪波阴彬谈昕煜范明范文红刘炳岩强伯勤袁建刚中国医学科学院协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室人类基因组北方研究中心北京100005 军事医学科学院神经生物学实验室北京100850 北京协和医院北京100005

根据与人RTN3基因同源的小鼠EST AA237377设计筛库引物,克隆得到小鼠RTN3 cDNA,该cDNA长2814 bp,含1个714 bp的可读框,编码1个具237个氨基酸的蛋白.Northern杂交检测该基因在小鼠不同组织中的表达谱,发现它有3个转录本,分别为1.8,2.8和4... 详细信息

根据与人RTN3基因同源的小鼠EST AA237377设计筛库引物,克隆得到小鼠RTN3 cDNA,该cDNA长2814 bp,含1个714 bp的可读框,编码1个具237个氨基酸的蛋白.Northern杂交检测该基因在小鼠不同组织中的表达谱,发现它有3个转录本,分别为1.8,2.8和4.2 kb,其中1.8和 2.8 kb的转录本存在于多种组织中,2.8 kb的转录本在脑中的表达量最高,4.2 kb的转录本仅在脑中存在.用成年小鼠脑和脊髓切片进行原位杂交和免疫组织化学反应,发现该基因在中枢神经系统的非胶质细胞中广泛表达,且在某些区域表达较高,如海马、大脑皮层、下丘脑及一些神经核团.

关键词： RTN3基因蛋白中枢神经系统分布克隆氨基酸内质网膜 RTN 细胞

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肿瘤坏死因子α/淋巴毒素α基因多态性与支气管哮喘的关系

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基础医学与临床 2003年第5期23卷 512-516页

作者：高金明林耀广邱长春刘怡雯马毅刘英朱元珏中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)在哮喘炎症过程中起重要作用 ,本文探讨了TNFα LTα基因多态性和哮喘遗传易感性及相关表型的关系。采用聚合酶链反应 (PCR) 限制性长度多态性 (RFLP)检测TNFα LTα基因多态性在 12 5名哮喘个... 详细信息

肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)在哮喘炎症过程中起重要作用 ,本文探讨了TNFα LTα基因多态性和哮喘遗传易感性及相关表型的关系。采用聚合酶链反应 (PCR) 限制性长度多态性 (RFLP)检测TNFα LTα基因多态性在 12 5名哮喘个体 ,12个哮喘家系成员和 96名无血缘关系的健康对照者间的分布 ;并测定了哮喘患者血清的TIgE ;肺通气功能 ,支气管舒张试验 ,乙酰甲胆碱 (Mch)气道激发试验。TNFα 2 2基因型的频率在哮喘组较健康对照组明显增高 (2 0 8%vs 11 4 % ,P <0 0 5 ) ,优势比 (OR)为 2 2 5 9(95 %CI1 30 1～ 4 94 9) ;等位基因频率TNF2在哮喘组较健康对照组明显增高 (0 4 2vs 0 33,P <0 0 1)。LTα基因的频率在两组间分布无差异。Logistic回归分析显示 :TNFα 2 2基因是哮喘的独立危险因素 (P <0 0 5 ) ,OR值为 0 2 2 6 (95 %CI 0 0 5 5 - 0 92 5 1)。携带TNFα 2 2基因型的患者在吸入 β2激动剂 2 0分钟后 ,FEV1的改善较携带其它基因型的患者差 (2 4 0 9± 19 5 ) %vs [2 9 4 6±2 2 6 0 ) %vs (38 81± 31 5 3) % ,P <0 0 5 ]。家系分析显示 :TNFα基因 LTα基因与哮喘连锁关系不肯定 ,LOD值 <1。TNFα 2 2基因型与哮喘的易感性相关。

关键词：肿瘤坏死因子α 淋巴毒素α 基因多态性支气管哮喘聚合酶链反应血清

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以ErbB受体为靶向的融合蛋白抗肿瘤治疗研究进展

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中国生物工程杂志 2003年第9期23卷 1-5页

作者：王东梅陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

ErbB受体介导的信号转导途径对外胚层来源的肿瘤的增殖、浸润、转移、及血管新生起促进作用。因此 ,出现了针对ErbB受体信号转导途径各环节的不同的抗肿瘤治疗策略 ,包括抗ErbB受体的单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂等 ,而ErbB受体介导的... 详细信息

ErbB受体介导的信号转导途径对外胚层来源的肿瘤的增殖、浸润、转移、及血管新生起促进作用。因此 ,出现了针对ErbB受体信号转导途径各环节的不同的抗肿瘤治疗策略 ,包括抗ErbB受体的单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂等 ,而ErbB受体介导的融合蛋白因其高选择性引起人们的重视。主要探讨了具有抗肿瘤作用的以ErbB受体介导的融合蛋白在组成和细胞毒性方面的研究进展。

关键词：融合蛋白肿瘤 ErbB受体治疗

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载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨海默病

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Acta Genetica Sinica 2003年第12期30卷 1167-1170页

作者：陈等张俊武张振馨赵华路李晓青吴亚宁屈秋明中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科北京100005 西安医科大学第一附属医院神经内科西安710061

利用PCR RFLP方法分析了中国汉族人群中 16 0例散发性阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)患者和 195例正常对照老年人中载脂蛋白E(APOE)基因多态性分布的差异。结果表明 ,APOE 3种等位基因ε2、ε3和ε4的频率在AD组和对照组分别为 0 ... 详细信息

利用PCR RFLP方法分析了中国汉族人群中 16 0例散发性阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)患者和 195例正常对照老年人中载脂蛋白E(APOE)基因多态性分布的差异。结果表明 ,APOE 3种等位基因ε2、ε3和ε4的频率在AD组和对照组分别为 0 0 5 6、0 713、0 2 31和 0 0 82、0 84 4、0 0 74。APOEε4等位基因携带个体患AD的危险为非携带个体的 3 82倍 (χ2 =2 8 7,P <0 0 0 1)。 6 5岁以上APOEε4携带个体患AD的危险为非携带个体的 5 38倍(χ2 =2 9 8,P <0 0 0 1) ,说明年龄因素可能影响ε4与AD间的相互作用。APOE等位基因和基因型频率在轻、中和重度痴呆病人间的分布无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示APOE基因多态性可能与AD患者的痴呆程度无关联。APOEε4基因型频率在女性AD病人中的分布略高于男性AD病人 (4 3 0 %对 36 5 % ) ,女性ε4携带个体患AD的危险也高于男性ε4携带个体 (4 3倍对 3 3倍 ) ,但统计学分析未检测到这些差异的显著性 (P >0 0 5 )。ε2等位基因频率在AD患者男性亚组明显低于女性亚组 ,也低于对照人群的男性亚组 (P <0 0 5 ) 。

关键词：阿尔茨海默病载脂蛋白E PCR-RFLP

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SARS冠状病毒PUMC_2株全基因组cDNA分段克隆

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中国医学科学院学报 2003年第5期25卷 499-503页

作者：樊峥谈昕煜阴彬邹柯王婷沈岩倪安平秦川袁建刚强伯勤彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 Chinese National Human Genome Center Beijing Department of Clinical Laboratory PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Institute of Experimental Animal CAMS and PUMCBeijing

目的分段克隆SARS冠状病毒PUMC2株的全基因组cDNA。方法以SARS冠状病毒PUMC2株基因组RNA为模板,用RT-PCR扩增cDNA片段,PCR产物经纯化后,连接入pGEM-T载体中,进行序列测定。结果获得了SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA的分段克隆。结论... 详细信息

目的分段克隆SARS冠状病毒PUMC2株的全基因组cDNA。方法以SARS冠状病毒PUMC2株基因组RNA为模板,用RT-PCR扩增cDNA片段,PCR产物经纯化后,连接入pGEM-T载体中,进行序列测定。结果获得了SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA的分段克隆。结论SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA分段克隆的获得,为SARS冠状病毒基因功能的研究和全长有感染性cDNA的克隆奠定了基础。

关键词： SARS冠状病毒PUMC2株分段克隆

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降落聚合酶链反应技术在低密度脂蛋白受体基因点突变研究中的应用

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中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 403-406页

作者：王绿娅曹守春蔺洁潘晓冬杜兰平刘舒秦彦文陈保生北京市心肺血管疾病研究所首都医科大学附属北京安贞医院动脉粥样硬化研究室 100029 南华大学基础医学院生物化学分子生物学教研室中国医学科学院基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室

目的　建立降落 (TOUCHDOWN)聚合酶链反应 (PCR)方法 ,快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变。方法　设计LDL R基因 2 1对引物 ,根据TOUCHDOWN原理设计包括启动子和 18个外显子特异性片段在内的PCR程序 ,... 详细信息

目的　建立降落 (TOUCHDOWN)聚合酶链反应 (PCR)方法 ,快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变。方法　设计LDL R基因 2 1对引物 ,根据TOUCHDOWN原理设计包括启动子和 18个外显子特异性片段在内的PCR程序 ,通过试验选择PCR最佳反应条件 ,在同一程序中分别对 2 1个片段进行扩增 ,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物 ,纯化后DNA产物测序分析该方法的特异性。结果　编设退火温度范围从 6 8℃降至 5 4℃的PCR程序 ,优化PCR扩增条件 ,电泳检测采用同一程序同时分别扩增的LDL R基因 2 1个片段条带清晰 ,测序证实了此组片段的特异性。结论　成功建立降落PCR方法 ,提示此法为LDL R基因突变筛查提供了快速可靠的手段。

关键词：家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变聚合酶链反应

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自体成纤维细胞注射移植的存活性初探

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基础医学与临床 2003年第3期23卷 314-317页

作者：赵玉明赵作均林惶左瑾方福德王佳琦中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院面颈整形美容中心北京100041 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E... 详细信息

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E染色 ,天狼猩红染色观察 ,发现3H TdR掺入标记的细胞依然存活 ;注射部位出现大量的幼稚型成纤维细胞 ;真皮厚度增加 ,实验组为 14 0 2 6± 6 31(× 5 μm) ,对照组为 12 7 6 6± 4 78(× 5 μm) (P <0 0 1) ;Ⅲ型胶原含量增加 ,实验组为 2 6 3± 1 4 1(cm2 ) ,对照组为 1 0 5± 0 90 (cm2 ) (P <0 0 5 )。表明自体成纤维细胞注射移植后 ,能够在体内长期存活并分泌新生Ⅲ型胶原 ,为临床应用提供了初步、可靠的理论依据。

关键词：成纤维细胞细胞移植放射自显影 ^3H-TdR

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