检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 707-711页

作者：葛翠婷张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨组蛋白甲基转移酶Ezh2在P19神经细胞分化中的作用。方法通过Western印迹检测全反式维甲酸(RA)诱导TuJ1蛋白的表达;通过染色质免疫沉淀技术检测Ngn1基因启动子区Ezh2的结合与H3K27三甲基化的变化;通过实时定量RT-PCR检测RA诱导P1... 详细信息

目的探讨组蛋白甲基转移酶Ezh2在P19神经细胞分化中的作用。方法通过Western印迹检测全反式维甲酸(RA)诱导TuJ1蛋白的表达;通过染色质免疫沉淀技术检测Ngn1基因启动子区Ezh2的结合与H3K27三甲基化的变化;通过实时定量RT-PCR检测RA诱导P19细胞分化后Ezh2mRNA表达。结果在RA诱导P19细胞中,Ezh2与H3K27me3在Ngn1启动子区的结合逐渐升高,并在诱导后第2天达到高峰,然后迅速降低,随后出现神经分化特异标志。结论Ezh2在RA诱导的P19细胞早期产生一种抑制性的组蛋白修饰标志H3K27me3,通过避免Ngn1的过早表达,确保P19细胞的正常分化。

关键词：全反式维甲酸染色质免疫沉淀 Ezh2

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Sirt1基因的研究进展

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 782-785页

作者：乔爱君左瑾刘晓军邵迪朱鏐娈崔安芳孔星星方福德常永生中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Sirt1是在哺乳动物细胞中发现的与酵母沉默信息调节因子Sir2同源性最高的同系物,在成熟组织中广泛表达,在胚胎早期和生殖细胞中含量丰富,且与众多基因的转录调控、能量代谢及细胞衰老过程的调节有关。Sirt1可促进脂质动员和肝脏糖异生,... 详细信息

Sirt1是在哺乳动物细胞中发现的与酵母沉默信息调节因子Sir2同源性最高的同系物,在成熟组织中广泛表达,在胚胎早期和生殖细胞中含量丰富,且与众多基因的转录调控、能量代谢及细胞衰老过程的调节有关。Sirt1可促进脂质动员和肝脏糖异生,能调控胰岛β细胞的胰岛素分泌。另外,Sirt1还是内源性的凋亡抑制因子。随着对其研究的深入,Sirt1将有望在新药作用靶点及疾病治疗方面发挥作用。

关键词： Sirt1 能量代谢胰岛β细胞细胞生存

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活性氧激活线粒体凋亡通路是亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的重要机制

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 324-328页

作者：卫玮韩兵社关丽英黄方冯磊杨洋许彩民中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,活性氧引起的线粒体膜电位丧失及凋亡作用的相关机制。方法用活性氧荧光探针DCFH-DA探测经亚硒酸钠诱导的NB4细胞内活性氧的含量。流式细胞术检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化。Western blot检... 详细信息

目的探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,活性氧引起的线粒体膜电位丧失及凋亡作用的相关机制。方法用活性氧荧光探针DCFH-DA探测经亚硒酸钠诱导的NB4细胞内活性氧的含量。流式细胞术检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化。Western blot检测胞浆中细胞色素C含量的变化及细胞总蛋白中Bcl-xl、Bax和Bid的含量变化及切割行为。同时应用活性氧清除剂MnTmPy及活性氧激活剂BSO预处理细胞,观察Bid及凋亡的变化。结果活性氧清除剂MnTmPy可有效抑制亚硒酸钠诱导的NB4细胞凋亡、线粒体膜电位丧失及Bid的切割;而BSO可促进线粒体膜电位丧失。结论亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的可能机制是通过刺激细胞产生活性氧,一方面下调抗凋亡蛋白Bcl-xl,另一方面激活线粒体打孔蛋白Bax和Bid,损伤线粒体使膜电位降低,促使线粒体释放细胞色素C。

关键词：活性氧细胞凋亡线粒体膜电位

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ShcD通过PTB和SH2结构域和TrkC受体相互作用

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 720-723,801页

作者：尤元刚李玮琦阴彬彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨ShcD与TrkC的相互作用,以深入认识TrkC下游信号转导的分子机制。方法利用酵母双杂交技术,将TrkC及TrkC各种突变体的胞内区分别克隆到酵母质粒pAS2-1中,将ShcD及ShcD的4个结构域(CH2、PTB、CH1和SH2结构域)分别克隆到酵母质粒pA... 详细信息

目的探讨ShcD与TrkC的相互作用,以深入认识TrkC下游信号转导的分子机制。方法利用酵母双杂交技术,将TrkC及TrkC各种突变体的胞内区分别克隆到酵母质粒pAS2-1中,将ShcD及ShcD的4个结构域(CH2、PTB、CH1和SH2结构域)分别克隆到酵母质粒pACT2中,将它们分别共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测它们之间的相互作用。将TrkC克隆进pmRFP载体(带红色荧光蛋白),ShcD克隆进pEGFP载体(带绿色荧光蛋白),并将pmRFP-TrkC和pEGFP-ShcD共转染至293T细胞中,采用荧光共聚焦显微镜观察其定位情况。结果ShcD可以和TrkC但不能和激酶失活突变体TrkCM1(K572A)结合;PTB和SH2结构域均可以与TrkC受体结合并且PTB结构域结合于TrkC的NPQY模体;ShcD和TrkC在293T细胞中共同定位于胞膜和胞浆中。结论ShcD通过PTB和SH2结构域以依赖于受体激酶活性的方式结合TrkC。

关键词： ShcD TrkC PTB SH2 共定位

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神经系统特异性转录因子Nhlh2的研究进展

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 436-440页

作者：胡娟彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Nhlh2(nescient helix-loop-helix2)基因,又名HEN2(HUA ENHANCER2)和NSCL2(neuronal stem cell leukemia2)(或NSCL-2),其编码蛋白是碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子家族的新成员,在神经系统中尤其是神经内分泌组织中特异性表达。目前已在鸡、小鼠、大鼠、牛和人类等多种真核生物中发现其同源基因,该基因的功能研究主要集中在神经内分泌系统、视网膜发育和肿瘤等相关领域,对其分子调控机制的探询已经取得一些初步成果。本文将从Nhlh2的基因和编码蛋白的特性、表达时空、功能研究以及调控与被调控机制等方面对其研究进展进行综述,并对今后的研究提出了展望和思考。

关键词：神经系统特异性转录因子 Nhlh2

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microRNAs在血液细胞分化及相关肿瘤中的作用

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 425-429页

作者：杨桂花王芳张俊武中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

microRNAs（miRNAs）是一类普遍存在的长度约为21-25个核苷酸的小分子RNA，通过与靶mRNA3^＋端非编码区互补结合在转录后水平抑制靶基因的表达。血细胞形成是一个包括多个基因有序的开启和关闭，复杂而又精密的调控过程，调控异常会导... 详细信息

microRNAs（miRNAs）是一类普遍存在的长度约为21-25个核苷酸的小分子RNA，通过与靶mRNA3^＋端非编码区互补结合在转录后水平抑制靶基因的表达。血细胞形成是一个包括多个基因有序的开启和关闭，复杂而又精密的调控过程，调控异常会导致各种血液病的发生。miRNA参与了造血调控并与某些血液系统肿瘤的发生相关。

关键词： miRNAs 血细胞分化血液系统肿瘤

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热激诱导Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子基因和人白细胞抗原的表达

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 746-750页

作者：晏丽程谟斌张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的检测热激对Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子(CⅡTA)的表达,及其对下游人类白细胞抗原(HLA-DR)表达的影响。方法采用实时RT-PCR检测42℃热激和干扰素-γ(IFN-γ)作用前后Jurkat细胞中CⅡTA mRNA的变化。采用Wester... 详细信息

目的检测热激对Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子(CⅡTA)的表达,及其对下游人类白细胞抗原(HLA-DR)表达的影响。方法采用实时RT-PCR检测42℃热激和干扰素-γ(IFN-γ)作用前后Jurkat细胞中CⅡTA mRNA的变化。采用Western blot检测热激和IFN-γ作用前后Jurkat细胞中CⅡTA蛋白的表达变化。采用流式细胞仪荧光分析热激前后Jurkat细胞表面HLA-DR的表达。结果在Jurkat细胞中,热激可诱导CⅡTAmRNA和蛋白的表达,而IFN-γ处理后无明显变化。与正常Jurkat细胞相比,热激后HLA-DR在Jurkat细胞表面的抗原浓度明显增加(P<0.01)。结论热诱导Jurkat细胞中CⅡTA和HLA-DR先后表达增高。提示热激可能在免疫基因表达缺陷的细胞中,重建相关基因的功能,为肿瘤热疗提供新的依据。

关键词：热激 Jurkat细胞主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子人白细胞抗原

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亚硒酸钠对结直肠癌HCT 116和SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 654-658页

作者：罗慧杨洋许彩民中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究亚硒酸钠对结直肠癌HCT116和SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响。方法采用10μmol/L亚硒酸钠处理HCT116和SW480细胞,Western blot及RT-PCR检测亚硒酸钠处理后不同时间HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达情况,并观察蛋白酶体抑制剂MG132预处理后对HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1表达的影响。采用免疫共沉淀方法检测亚硒酸钠对HCT116和SW480细胞中β-catenin与T细胞因子4(TCF4)相互作用的影响。结果亚硒酸钠可降低HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达水平,用蛋白酶体抑制剂MG132预处理可增加亚硒酸钠处理后HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达水平。免疫共沉淀实验结果显示,亚硒酸钠能破坏β-catenin与TCF4间的相互作用。结论亚硒酸钠可降低结直肠癌HCT116和SW480细胞中β-catenin及cyclin D1的表达水平,蛋白酶体介导的降解途径可能在这一过程中发挥了重要作用。亚硒酸钠引起的β-catenin与TCF4相互作用减少可能对β-catenin靶基因的转录也起到了一定的调控作用。

关键词：亚硒酸钠结直肠癌 β-catenin cyclin D1

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甲基化作用与肿瘤

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 786-790页

作者：邵迪崔安芳朱鏐娈乔爱君孔星星刘晓军常永生方福德中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对表观遗传学进行的研究表明,表观事件中甲基化的发生与肿瘤的发生发展密切相关。表观遗传调控主要通过DNA甲基化和组蛋白甲基化修饰控制细胞的增殖和分化、维持机体的稳定,但甲基化的异常改变常导致肿瘤的发生、发展。本文主要综述有... 详细信息

对表观遗传学进行的研究表明,表观事件中甲基化的发生与肿瘤的发生发展密切相关。表观遗传调控主要通过DNA甲基化和组蛋白甲基化修饰控制细胞的增殖和分化、维持机体的稳定,但甲基化的异常改变常导致肿瘤的发生、发展。本文主要综述有关肿瘤基因组和组蛋白甲基化的理论研究、检测方法及甲基化在临床上作为生物学标记和药物靶点的应用。

关键词：甲基化肿瘤

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过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1,能量代谢的共激活因子

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 773-777页

作者：王瑞常永生方福德中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

转录共激活因子过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1(PGC1)家族是一类特异性存在于高能量代谢组织器官的因子,它们通过对转录因子的辅助作用促进下游基因的表达,从而调节糖异生、脂肪酸氧化、脂蛋白的合成与分泌、线粒体生物合成... 详细信息

转录共激活因子过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1(PGC1)家族是一类特异性存在于高能量代谢组织器官的因子,它们通过对转录因子的辅助作用促进下游基因的表达,从而调节糖异生、脂肪酸氧化、脂蛋白的合成与分泌、线粒体生物合成及氧化磷酸化解耦联等。PGC1蛋白序列无DNA结合结构域,通过与转录因子的相互作用完成对基因的表达调控。机体对PGC1的活性调节可以通过转录水平或蛋白磷酸化、乙酰化/去乙酰化、甲基化、泛素化等多种共价化学修饰完成。PGC1的表达失调与糖尿病、肥胖、高血脂症、动脉硬化、脑神经元坏死性疾病等有密切关系。

关键词：过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1 能量代谢活性调控

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