检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2024年第6期44卷 763-771页

作者：李盈辉许依张建民陈慧何维中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础医学院免疫学系T细胞与免疫治疗重点实验室重大疾病共性机制研究全国重点实验室北京100005 常州西太湖细胞治疗前沿技术研究院江苏常州213000

目的构建靶向B细胞成熟抗原(BCMA)的嵌合抗原受体γδT细胞(BCMA CAR-γδT),在体外初步评价其抗多发性骨髓瘤的疗效。方法构建包含BCMA单链抗体序列的三代CAR分子的慢病毒载体,瞬时转染293T细胞,荧光显微镜和Western blot验证外源基因... 详细信息

目的构建靶向B细胞成熟抗原(BCMA)的嵌合抗原受体γδT细胞(BCMA CAR-γδT),在体外初步评价其抗多发性骨髓瘤的疗效。方法构建包含BCMA单链抗体序列的三代CAR分子的慢病毒载体,瞬时转染293T细胞,荧光显微镜和Western blot验证外源基因的表达情况;包装慢病毒,用流式细胞术测定病毒滴度;分别感染人外周血αβT细胞和γδT细胞,检测感染效率;LDH法检测BCMA CAR-γδT细胞对人多发性骨髓瘤细胞系的体外细胞毒活性,并用Incucyte实时细胞分析系统比较BCMA CAR-γδT细胞与BCMA CAR-T细胞的细胞毒活性差异。结果将BCMA-CAR慢病毒载体转入293T细胞24 h后,荧光显微镜观察到外源ZsGreen的表达;Western blot检测CD3ζ证明BCMA-CAR能顺利表达。慢病毒包装后,收集感染上清浓缩,测得病毒滴度为2.23×10^(8)Tu/mL。用MOI=5感染人外周血αβT细胞与γδT细胞,流式检测结果显示αβT细胞感染效率为59.18%±2.56%,γδT细胞感染效率为48.15%±9.86%。LDH杀伤实验结果显示,CAR-γδT细胞对BCMA高表达的人骨髓瘤细胞系MM1.S、H929和过表达BCMA的K562细胞的细胞毒活性较空载体对照γδT细胞显著增强(P<0.001),而对BCMA表达阴性的细胞系无差异;活细胞时程分析系统结果显示,BCMA CAR-γδT细胞与BCMA CAR-αβT细胞在体外对H929的细胞毒活性均显著优于其空载体对照细胞,且均对BCMA表达阴性的细胞系的细胞毒活性无差异。结论BCMA CAR-γδT细胞在体外显示出明显增强的靶向BCMA的细胞毒活性,有望作为新型同种异体γδT细胞产品,用于多发性骨髓瘤的细胞过继免疫治疗。

关键词： B细胞成熟抗原多发性骨髓瘤嵌合抗原受体 γδT细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Nutlin-3a通过抑制CIDEC的表达调控小鼠脂肪功能

引用

基础医学与临床 2024年第2期44卷 154-158页

作者：陈恩惠杨佳卉赵微解相宏郭艳芳刘晓军闫莉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院重大疾病共性机制研究全国重点实验室北京100005 山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室山西太原030001

目的探讨小鼠双微体同源基因2(MDM2)抑制剂Nutlin-3a对小鼠脂肪脂代谢功能的影响。方法建立C57BL/6J小鼠高脂饮食诱导肥胖(DIO)模型,随机分为对照组:腹腔注射DMSO,实验组:腹腔注射顺式咪唑啉类似物3a(Nutlin-3a)。实验期间进行葡萄糖耐... 详细信息

目的探讨小鼠双微体同源基因2(MDM2)抑制剂Nutlin-3a对小鼠脂肪脂代谢功能的影响。方法建立C57BL/6J小鼠高脂饮食诱导肥胖(DIO)模型,随机分为对照组:腹腔注射DMSO,实验组:腹腔注射顺式咪唑啉类似物3a(Nutlin-3a)。实验期间进行葡萄糖耐量(GTT)以及胰岛素耐量(ITT)实验。实验结束后,分离小鼠附睾脂肪组织(eWAT)、皮下脂肪组织(iWAT)与棕色脂肪组织(BAT),对白色脂肪组织进行苏木精-伊红(HE)染色,观察脂肪细胞形态变化;RT-qPCR和Western blot检测eWAT中脂代谢相关基因表达。结果与对照组相比,给予小鼠Nutlin-3a处理,增加DIO小鼠的体质量(P<0.001);对葡萄糖耐量和胰岛素敏感性没有影响;脂肪细胞体积减小;下调白色脂肪中脂滴结合蛋白诱导细胞凋亡DFF45样效应因子C(CIDEC)的表达。结论Nutlin-3a通过下调白色脂肪组织中CIDEC的表达抑制脂滴的形成。

关键词： Nutlin-3a 脂肪代谢脂肪组织诱导细胞凋亡DFF45样效应因子C(CIDEC)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

^(13)C-葡萄糖钳夹实验评估小鼠胰岛素敏感性

引用

基础医学与临床 2025年第4期45卷 442-449页

作者：曹可欣刘卓航姜懿珅孙旭陈洁中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院重大疾病共性机制研究全国重点实验室免疫学系北京100005

目的建立^(13)C同位素标记的高胰岛素正血糖钳夹模型用以评估小鼠胰岛素敏感性。方法高脂喂养建立小鼠胰岛素抵抗模型,检测胰岛素下游信号蛋白激酶,即Akt的磷酸化水平;使用葡萄糖耐量试验,胰岛素耐量试验和丙酮酸耐量试验检测小鼠血糖... 详细信息

目的建立^(13)C同位素标记的高胰岛素正血糖钳夹模型用以评估小鼠胰岛素敏感性。方法高脂喂养建立小鼠胰岛素抵抗模型,检测胰岛素下游信号蛋白激酶,即Akt的磷酸化水平;使用葡萄糖耐量试验,胰岛素耐量试验和丙酮酸耐量试验检测小鼠血糖的变化,计算三者曲线下面积以量化血糖水平在2 h内的总体变化;通过小鼠颈静脉插管手术和^(13)C同位素标记的高胰岛素正血糖钳夹实验,监测小鼠血糖并计算葡萄糖灌注速率;收集小鼠尾静脉血清进行液相色谱串联质谱分析,计算葡萄糖清除速率和肝脏糖异生速率;抑制小鼠糖原分解后,检测Akt的磷酸化水平以评估胰岛素信号传导;进行钳夹实验并计算葡萄糖灌注速率,收集小鼠尾静脉血清进行液相色谱串联质谱分析,计算葡萄糖清除速率和肝脏糖异生速率。结果高脂喂养小鼠血糖水平升高(P<0.001),并伴随肝脏,肌肉中的p-Akt水平减少。葡萄糖耐量试验、胰岛素耐量试验和丙酮酸耐量试验显示,高脂喂养的小鼠血糖明显增高(P<0.05),曲线下面积升高(P<0.001)。高脂喂养的小鼠在^(13)C标记的钳夹实验后血糖趋于稳定,与对照组相比,其葡萄糖灌注速率下降(P<0.001),葡萄糖清除速率下降(P<0.0001),肝脏糖异生速率上升(P<0.01)。用药物抑制糖原分解后,与对照组相比,小鼠血糖水平升高(P<0.001),并伴随肝脏、肌肉中的p-Akt水平减少,胰岛素信号通路受损。^(13)C标记的钳夹实验表明,处理组小鼠葡萄糖灌注速率下降(P<0.01),葡萄糖清除速率下降(P<0.0001),肝脏糖异生速率上升(P<0.01)。结论建立了一种改良的高胰岛素正血糖钳夹实验模型,可以评估小鼠体内胰岛素的敏感性。

关键词：胰岛素抵抗葡萄糖钳夹实验颈静脉插管手术 D-葡萄糖-^(13)C6

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用人多能干细胞衍生的肝细胞样类器官构建肝脏再生的研究模型

引用

基础医学与临床 2025年第5期45卷 589-598页

作者：王晨曦杨淑春贾玉艳黄粤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系重大疾病共性机制研究全国重点实验室北京100005

目的基于人多能干细胞(hPSCs)衍生的肝细胞样类器官(HLO)构建良好的人类肝脏再生的体外研究模型。方法逐级诱导分化得到hPSCs衍生的HLO,通过定点在HLO培养条件中添加或撤离对乙酰氨基酚(APAP)模拟急性肝损伤,构建基于HLO的肝损伤后再生... 详细信息

目的基于人多能干细胞(hPSCs)衍生的肝细胞样类器官(HLO)构建良好的人类肝脏再生的体外研究模型。方法逐级诱导分化得到hPSCs衍生的HLO,通过定点在HLO培养条件中添加或撤离对乙酰氨基酚(APAP)模拟急性肝损伤,构建基于HLO的肝损伤后再生模型。随后,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建调控肝再生的关键基因连环蛋白/钙粘蛋白相关蛋白β1基因CTNNB1敲除的HLO,并进行APAP损伤再生实验。通过形态学观察、RT-qPCR、Western blot以及病理学分析进一步评估HLO作为肝再生研究模型的可用性。结果通过形态学观察以及标记基因的表达量检测,结果显示hPSCs衍生的HLO在APAP药物处理后能启动其损伤后的再生反应,并且,CTNNB1缺失的HLO相比对照组HLO,在损伤后再生过程中其尺寸恢复延迟、相关基因表达量下调或延后表达。结论本研究构建了一种基于hPSCs衍生的HLO人类肝脏再生模型,该模型可能成为开展肝再生过程中基因功能研究的工具。

关键词：肝脏再生肝细胞样类器官 CRISPR/Cas9 人多能干细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

麦角硫因对中老年小鼠组织代谢的影响

引用

基础医学与临床 2025年第06期 709-713页

作者：陈浩然王芳马艳妮余佳王琳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系重大疾病共性机制研究全国重点实验室

目的探究麦角硫因(EGT)对中老年小鼠组织代谢的影响。方法选取9个月龄的中老年C57BL/6J小鼠，实验组按照35 mg EGT/kg体质量的剂量进行EGT水溶液灌胃，对照组进行等量的水灌胃，每两天干预1次，两组小鼠均用不含EGT的饲料喂养。持续灌... 详细信息

目的探究麦角硫因(EGT)对中老年小鼠组织代谢的影响。方法选取9个月龄的中老年C57BL/6J小鼠，实验组按照35 mg EGT/kg体质量的剂量进行EGT水溶液灌胃，对照组进行等量的水灌胃，每两天干预1次，两组小鼠均用不含EGT的饲料喂养。持续灌胃7周后收集小鼠的肝脏、肾、小肠组织，借助超高效液相色谱-质谱(UHPLC-MS)技术进行非靶向代谢组学检测。挖掘差异代谢物并进行KEGG代谢通路富集分析。结果与对照组相比，经EGT灌胃处理后的中老年小鼠的肝脏、肾、小肠组织中氧化还原平衡相关的代谢物丰度未发生明显改变，但肝脏中(次)牛磺酸代谢(P<0.01)、肾中嘌呤代谢(P<0.01)、小肠中半胱氨酸和甲硫氨酸代谢(P<0.001)等受到了显著影响。结论麦角硫因作用下中老年小鼠肝脏、肾、小肠组织中发生了非氧化还原相关的代谢变化。

关键词：麦角硫因中老年小鼠代谢组代谢通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HAP1细胞有丝分裂过程中的动态转录物组研究

引用

基础医学与临床 2025年第06期 786-792页

作者：吴雪丽杨玉容保永莉吴汝成王莉莎陈阳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系重大疾病共性机制研究全国重点实验室

目的研究HAP1细胞在有丝分裂同步化后释放过程中分子水平上的动态变化，旨在全面了解有丝分裂期间的转录物图谱及其调控机制。方法使用诺考达唑对HAP1细胞进行有丝分裂同步化阻滞后释放，分别在释放后0 min、20 min、80 min收集细胞... 详细信息

目的研究HAP1细胞在有丝分裂同步化后释放过程中分子水平上的动态变化，旨在全面了解有丝分裂期间的转录物图谱及其调控机制。方法使用诺考达唑对HAP1细胞进行有丝分裂同步化阻滞后释放，分别在释放后0 min、20 min、80 min收集细胞样本并进行转录物组测序(RNA-seq)。对转录物组数据进行清洗后分析差异表达基因、表达趋势聚类和功能富集，结合蛋白质相互作用网络，探讨HAP1细胞在有丝分裂过程中信号通路的变化。结果 HAP1细胞在有丝分裂同步释放后的转录组在时间序列上经历了显著变化，差异基因聚类分析揭示了四个基因簇，富集于p53信号传导、细胞质翻译等重要生物学过程。结论 HAP1细胞有丝分裂过程中转录组呈现时间依赖性动态变化，细胞应激响应、翻译调控和染色质重塑关键信号通路协同作用，确保细胞在退出有丝分裂中平衡生长与应激反应。

关键词：有丝分裂转录物组细胞周期同步化信号通路调控

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因工程化iNK^(NKG2A KO)细胞具有HLA-E特异的抗肿瘤活性

引用

基础医学与临床 2025年第5期45卷 599-607页

作者：乔雯华许依董鹏何维陈慧张建民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院免疫学系T细胞与免疫治疗重点实验室重大疾病共性机制研究全国重点实验室北京100005 常州西太湖细胞治疗前沿技术研究院江苏常州213000

目的针对NKG2A-HLA-E负调控通路,构建诱导多能干细胞(iPSC)来源的基因工程NKG2A敲除的NK细胞(NKG2A KO-iNK),在体外初步评价其肿瘤杀伤功能。方法利用基因编辑技术在iPSC中敲除NKG2A,将其在体外诱导分化为NKG2A KO-iNK细胞,并在不同分... 详细信息

目的针对NKG2A-HLA-E负调控通路,构建诱导多能干细胞(iPSC)来源的基因工程NKG2A敲除的NK细胞(NKG2A KO-iNK),在体外初步评价其肿瘤杀伤功能。方法利用基因编辑技术在iPSC中敲除NKG2A,将其在体外诱导分化为NKG2A KO-iNK细胞,并在不同分化阶段利用流式细胞测量术检测特异性的表面标志物;利用Western blot验证NKG2A KO-iNK细胞NKG2A的敲除情况,并用流式细胞测量术检测NKG2A KO-iNK细胞常见的NK细胞活化性受体及天然细胞毒性受体的表达水平;乳酸脱氢酶检测法(LDH)检测NKG2A KO-iNK细胞对不同人白细胞抗原E(HLA-E)表达水平肿瘤细胞的体外细胞毒活性。结果将Cas9蛋白和靶向编码NKG2A的KLRC1基因第1、2外显子的3条向导RNA(sgRNA)共转染iPSC对其进行基因敲除,测序结果显示成功获得在第1外显子插入1个T碱基的单克隆NKG2A敲除的iPSC(NKG2A KO-iPSC)。iPSC向NK细胞诱导分化的过程中,第8天类胚体(EBs)阶段检测CD34表达水平在30%~50%;第28天NK诱导分化阶段CD56和CD16的表达均达80%以上。Western blot结果显示,NKG2A KO-iNK细胞NKG2A被成功敲除;流式结果显示NKG2A KO-iNK细胞活化性受体NKG2D及细胞毒性受体NKp30、NKp44、NKp46的表达水平和野生型iNK(WT-iNK)细胞基本一致。LDH实验结果显示,NKG2A KO-iNK细胞对HLA-E高表达的B细胞前体白血病细胞系Nalm6的细胞毒活性显著高于WT-iNK细胞,而对HLA-E低表达的人骨髓瘤细胞系H929和HLA-E几乎不表达的人肝癌细胞系HepG2,NKH2A KO-iNK细胞和WT-iNK细胞两者之间的细胞毒活性差异无统计学意义;γ干扰素(IFN-γ)处理能显著上调Nalm6细胞的HLA-E表达水平,进而进一步增强NKG2A KO-iNK细胞对Nalm6细胞的细胞毒活性。结论由于阻断了NKG2A-HLA-E负调控通路,基因工程NKG2A KO-iNK细胞对HLA-E高表达的肿瘤细胞系在体外显示出明显增强的细胞毒活性,提示其作为一种新型细胞治疗的可能性,为肿瘤的细胞过继免疫治疗提供一种新的思路。

关键词：诱导多能干细胞(iPSCs) NKG2A 自然杀伤(NK)细胞免疫治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：