检索结果-内蒙古大学图书馆

中华儿科杂志 2005年第2期43卷 85-88页

作者：庄太凤邱正庆魏珉黄尚志中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科 100730 中国医学科学院基础医学研究所医学遗传学系 100730

　目的　对糖原贮积症Ⅲ型(GSDⅢ)及其缺陷酶 (糖原脱支酶 )进行临床和基因突变分析。方法　对 6例临床疑诊为GSDⅢ患儿进行临床分析,并对患儿及其父母的外周血DNA,应用PCR扩增糖原脱支酶的 33个外显子,测序。结果　GSDⅢ的临床表现为... 详细信息

　目的　对糖原贮积症Ⅲ型(GSDⅢ)及其缺陷酶 (糖原脱支酶 )进行临床和基因突变分析。方法　对 6例临床疑诊为GSDⅢ患儿进行临床分析,并对患儿及其父母的外周血DNA,应用PCR扩增糖原脱支酶的 33个外显子,测序。结果　GSDⅢ的临床表现为肝脾肿大、低血糖、高血脂、生长迟缓、肝转氨酶升高和酸中毒,肾上腺素刺激试验符合GSDⅢ,生玉米淀粉治疗可以改善病情。对糖原脱支酶基因的外显子PCR产物直接测序:患儿 1未发现突变;患儿 2为外显子 8 (父源 1294C>T,L298L)和外显子 34(母源 4747G>T,E1450X)复合杂合突变;患儿 3为外显子 8(父源 1294C>T,L298L)和外显子 3(母源 10G>A)复合杂合突变;患儿 4为外显子 35纯合突变 (4664insCT);患儿 5为外显子 16(父源 2341delGCCATAGA,移码突变)和外显子 10(母源 1559G>A,R387Q)复合杂合突变;患儿 6为外显子 26(父源 3742G>A,G1115R)和外显子 12(母源 1686T>G,Y429X)复合杂合突变。结论　GSDⅢ临床表现多样,基因分析发现新的糖原脱支酶基因突变类型。

关键词：糖原贮积症Ⅲ型基因突变糖原脱支酶外显子儿童

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TNF-α或mmLDL对人脐静脉内皮细胞PAI-1的影响及其机制

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中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 156-159页

作者：李晓冬祖淑玉朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)或弱氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)PAI-1活性和mRNA表达的影响及其分子机制。方法用发色底物法测定HUVECs培养液中PAI-1的活性。用Northern印迹分析法检测PAI-1基因mRNA的表达... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)或弱氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)PAI-1活性和mRNA表达的影响及其分子机制。方法用发色底物法测定HUVECs培养液中PAI-1的活性。用Northern印迹分析法检测PAI-1基因mRNA的表达情况,并分别用蛋白激酶C穴PKC雪或促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)抑制剂干预上述诱导实验。结果TNF-α或mmLDL作用HUVEC后,PAI-1活性和mRNA基因表达均明显增加。促分裂原活化蛋白激酶-激酶穴MAPKK雪的抑制剂PD98059(60μmol/L)能明显阻断TNF-α穴100U/ml雪或mmLDL穴50μg/ml雪对PAI-1活性和mRNA的诱导,但PKC的抑制剂Staurosporine(10nmol/L)和H7(15μmol/L)无显著阻断作用。结论(1)TNF-α或mmLDL能增强血管内皮细胞PAI-1活性与mRNA表达;穴2雪PAI-1活性提高与其mRNA表达增加有关;(3)MAPK途径可能在TNF-α或mmLDL诱导血管内皮细胞PAI-1表达中起重要作用。

关键词：内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂蛋白激酶C 促分裂原活化蛋白激酶

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合并应用甾体激素与低剂量棉酚对雄性大鼠的抗生育效果及其作用机制

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 214-219页

作者：王岚叶惟三刘霄郭燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织胚胎教研室北京100005

目的　论证甾体激素与低剂量棉酚组合用药的雄性抗生育作用的可行性及其作用机制。方法　用低剂量棉酚 12 mg/ (kg· d) ,甲基睾丸素 2 0 mg/ (kg· d)、炔雌醇 10 0 μg/ (kg· d)喂服 Wistar大鼠 6周 ,部分取材 ,开始... 详细信息

目的　论证甾体激素与低剂量棉酚组合用药的雄性抗生育作用的可行性及其作用机制。方法　用低剂量棉酚 12 mg/ (kg· d) ,甲基睾丸素 2 0 mg/ (kg· d)、炔雌醇 10 0 μg/ (kg· d)喂服 Wistar大鼠 6周 ,部分取材 ,开始合笼 ;继续用棉酚 12 m g/ (kg· d)维持 12周 ,部分取材 ;余下大鼠停药 ,观察恢复情况。取材做大鼠睾丸精子计数、精子活动度 ,睾丸切片的形态学观察等。结果　用药 6周大鼠的生精过程受到不完全抑制 ,附睾精子全部失去活力。用药 6 + 12周大鼠的曲细精管 - 期数量比例为 (9.3± 3.4) % ,比对照组 (2 6 .8± 1.7) %显著下降 ; - 期数量比例为 (36 .7± 5 .0 ) % ,比对照组 (2 4.5± 2 .7) %显著上升 ; - 期数量比例为 (3.6± 0 .6 ) % ,比对照组 (6 .0±0 .4) %显著下降。附睾精子全部失去活力。结论　甾体激素与低剂量棉酚从不同的作用位点共同作用于生精过程 ,在短时间内完全可以达到抗生育效果 ;低剂量棉酚长时期作用 ,不仅在附睾行使其抗生育功能 ,还影响生精过程产生精子的质量。此雄性抗生育作用具有可逆性。

关键词：甾体激素低剂量棉酚避孕药男性

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急性肾小管损伤肾组织前列酸类的变化及意义

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中国医学科学院学报 1998年第1期20卷 38-43页

作者：于阳郑法雷薄玉红段金红黄华良毕增祺中国医学科学院中国协和医科大学协和医院中国协和医科大学基础医学研究所中国科学院遗传研究所殖间的关系进行了研究。

目的探讨前列酸类（ＰＧｓ）在表皮生长因子（ＥＧＦ）促进急性肾小管坏死（ＡＴＮ）肾小管修复过程中的作用，研究外源性ＥＧＦ对大鼠庆大霉素（ＧＭ）中毒性ＡＴＮ肾组织ＰＧｓ变化的作用及其与肾小管上皮细胞ＤＮＡ合成的关系。方法... 详细信息

目的探讨前列酸类（ＰＧｓ）在表皮生长因子（ＥＧＦ）促进急性肾小管坏死（ＡＴＮ）肾小管修复过程中的作用，研究外源性ＥＧＦ对大鼠庆大霉素（ＧＭ）中毒性ＡＴＮ肾组织ＰＧｓ变化的作用及其与肾小管上皮细胞ＤＮＡ合成的关系。方法Ｗｉｓ－＊ｔａｒ大鼠分为３组：正常对照组（ＮＬ组，ｎ＝７）；ＧＭ组（Ｇ组，ｎ＝２０）：予以ＧＭ２００ｍｇ／ｋｇｘ３ｄ；ＧＭ＋ＥＧＦ组（Ｇ＋Ｅ组，ｎ＝１９）：ＧＭ２００ｍｇ／ｋｇｘ３６＋ＥＧＦ２０ｕｇ、分别在注射后第１、４、８、１２、１５天测定肾小管上皮细胞的３氚－胸腺核苷掺入率（３ＨＴｄＲ）、血清肌酐（Ｓｃｒ）、肾组织前列腺素２（ＰＧＥ２）、前列腺素６酮（６－ｋｅｔｏＰＧＦ１ａ、前列环素（ＴＸＢ２）的含量。结果Ｇ＋Ｅ组动物的３ＨＴｄＲ掺入率均较Ｇ组动物明显增加，以在给药后第４天最为显著。Ｇ＋Ｅ组动物的肾脏病理损害较Ｇ组有所改善，但Ｓｃｒ水平较Ｇ组无差别。Ｇ＋Ｅ组动物肾组织６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ水平也比Ｇ组明显增高，ＴＸＢ２水平比Ｇ组动物降低。Ｇ＋Ｅ组动物肾组织ＰＧＥ２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ的水平与肾小管上皮细胞的３ＨＴｄＲ掺入率均呈显著正相关。结论（１）ＡＴＮ时肾组织ＰＧＥ２、６－ｋｅｔ?

关键词：肾小管损伤前列酸急性

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PAH基因内一个A／C多态性位点的分析

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Acta Genetica Sinica 1996年第3期23卷 169-173页

作者：黄尚志李辉苗世荣徐陆亭方炳良刘国仰罗会元中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京医学遗传研究室

在苯丙氨酸羟化酶基因ＩＶＳ３的３＇端－１１位有一个Ａ／Ｃ多态性位点，应用ＳＳＣＰ分析可进行简便检测。Ａ等位基因的频率为０．６５６，Ｃ等位基因的频率为０．３４４，此位点的多态性信息含量（ＰＩＣ）为０．３５１。Ａ／Ｃ位点... 详细信息

在苯丙氨酸羟化酶基因ＩＶＳ３的３＇端－１１位有一个Ａ／Ｃ多态性位点，应用ＳＳＣＰ分析可进行简便检测。Ａ等位基因的频率为０．６５６，Ｃ等位基因的频率为０．３４４，此位点的多态性信息含量（ＰＩＣ）为０．３５１。Ａ／Ｃ位点与同一内含子中的ＳＴＲ位点间没有连锁不平衡性，联合应用这两个多态性位点进行单体型连锁分析，对ＰＫＵ家系进行产前基因诊断的诊断率可达７５％。

关键词：苯丙酮尿症遗传病多态性位点苯丙氨酸羟化酶

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人白细胞介素-15 cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的高效稳定表达

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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 293-297页

作者：薛莉崔莲仙何维巴德年中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学室北京100005

目的　在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中表达人白细胞介素１５（ＩＬ１５），为ＩＬ１５的功能研究提供有利条件。方法　采用ＰＣＲ技术扩增人ＩＬ１５编码区ｃＤＮＡ片段，构建重组真核表达载体，再以脂质体法转染至ＣＨＯ ... 详细信息

目的　在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中表达人白细胞介素１５（ＩＬ１５），为ＩＬ１５的功能研究提供有利条件。方法　采用ＰＣＲ技术扩增人ＩＬ１５编码区ｃＤＮＡ片段，构建重组真核表达载体，再以脂质体法转染至ＣＨＯ细胞进行表达，鉴定表达产物的生物学活性。结果　共获得８株高效表达ＩＬ１５的阳性克隆，其平均活性为（３１８５４±３２７２）Ｕ／（１０６ｃｅｌｌｓ·ｄ），稳定传代６个月后仍保持其表达活性。结论　人ＩＬ１５

关键词：白细胞介素15 卵巢细胞真核基因表达 CHO

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山莨菪碱预防大鼠肺水肿时动脉血浆与支气管肺泡洗涤液中PGE_2和LTC_4含量的变化

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中国药理学通报 2000年第4期16卷 436-438页

作者：段金虹程锦轩戴顺龄王振纲中国医学科学院基础医学研究所.中国协和医科大学基础医学院同位素研究室北京100005

目的　通过研究山莨菪碱 (ADM ,6 5 4 2 )预防大鼠肺水肿时 ,对动脉血浆和支气管肺泡洗涤液 (BAL)中的PGE2和LTC4 含量的影响 ,探讨山莨菪碱防治肺水肿的部分机制。方法　先从股静脉注射山莨菪碱 (30mg·kg-1)作为预防 ,再注射肾上... 详细信息

目的　通过研究山莨菪碱 (ADM ,6 5 4 2 )预防大鼠肺水肿时 ,对动脉血浆和支气管肺泡洗涤液 (BAL)中的PGE2和LTC4 含量的影响 ,探讨山莨菪碱防治肺水肿的部分机制。方法　先从股静脉注射山莨菪碱 (30mg·kg-1)作为预防 ,再注射肾上腺素 (0 .3mg·kg-1) ,30min后收集动脉血浆和BAL ,用放射免疫法分别测定正常对照组、肺水肿组、山莨菪碱预防组的PGE2 和LTC4 的含量。结果　肺水肿组动脉血浆中的PGE2 和LTC4 的含量、LTC4 与PGE2 比值高于正常对照组 (P <0 0 1) ,BAL中的PGE2 含量低于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,LTC4 的含量、LTC4 与PGE2 比值高于正常对照组 (P <0 0 1) ;山莨菪碱预防组动脉血浆和BAL中PGE2和LTC4 含量、LTC4 与PGE2 比值均低于肺水肿组 (P <0 0 1)。结论　山莨菪碱能抑制肺水肿时PGE2 和LTC4 的释放 ,从而改善血管的通透性。

关键词：山莨菪碱肺水肿前列腺素动脉血浆 LTC4

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6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside

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中国医学科学院学报 2001年第5期23卷 423-427页

作者：王壮志李琳史耕先刘音赵方萄朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后... 详细信息

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8cDNA碱基顺序。转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3～4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制。Westernblot检测显示在相对分子质量(Mr)120000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞。结论6A8cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶。

关键词： 6A8 α-甘露糖苷酶 COS-7细胞瞬时表达

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约氏疟红内期细胞颗粒疫苗免疫保护性机制

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中国医学科学院学报 2004年第1期26卷 47-51页

作者：袁捷徐蓓刘宝丰中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原学室北京100005

目的探讨约氏疟红内期细胞疫苗保护性免疫作用的特点。方法分别用Saponin和双蒸水溶血后的约氏疟原虫感染的鬼形红细胞作疫苗、腹腔免疫接种BALB/c小鼠,并设正常小鼠为空白对照,分别以致死性同源虫株攻击后比较各组小鼠的感染率和存活... 详细信息

目的探讨约氏疟红内期细胞疫苗保护性免疫作用的特点。方法分别用Saponin和双蒸水溶血后的约氏疟原虫感染的鬼形红细胞作疫苗、腹腔免疫接种BALB/c小鼠,并设正常小鼠为空白对照,分别以致死性同源虫株攻击后比较各组小鼠的感染率和存活率。采用间接免疫荧光检测法,ELISA法测定血清特异性抗体及其亚类。RT-PCR法比较各组小鼠脾细胞白细胞介素-4(IL-4),γ-干扰素(IFN-γ)表达的差异,用SDS-PAGE及直接免疫荧光染色法分析感染红细胞膜蛋白。结果用Saponin皂化构建的疟疾红内期细胞颗粒疫苗(SPRBC)与水化的红内期细胞颗粒疫苗(DPRBC)及对照组相比,可使免疫鼠获得对致死性攻击的非常显著的免疫保护,表现为低原虫血症、短病程和高存活率(P<0.01),并呈现有高滴度抗体,其亚类有先以IgG1,后以IgG2a为主的趋势;同时经SPRBC免疫鼠的脾细胞其IL-4,IFN-γ均有高表达;感染红细胞表面呈现有相对分子质量为47000的小鼠MHC-Ⅰα链分子表达。结论皂化处理的约氏疟红内期细胞颗粒疫苗对同源致死性攻击有显著的免疫保护,其作用与疫苗诱导、对攻击产生的IgG1、IgG2a类抗体以及免疫细胞分泌的IL-4,IFN-γ类细胞因子相关,呈现细胞免疫和体液免疫的共同作用。正常与感染小鼠红细胞表面的MHCclassⅠ类分子可能有重要的免疫学意义。

关键词：疟疾细胞疫苗免疫保护

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一种简便的染色质免疫沉淀法的建立

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生物化学与生物物理进展 2003年第4期30卷 634-638页

作者：傅湘辉刘德培辛立郝德龙董文吉黄粤梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的... 详细信息

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的染色质免疫沉淀法 ,并通过对诱导前后的MEL细胞中 β 珠蛋白基因簇组蛋白H3乙酰化的研究 ,证实了其可操作性 .结果表明 :高敏位点HS2和活跃基因 βmaj的启动子区域存在较高的组蛋白乙酰化水平 ,且诱导前后变化显著 ,而不活跃基因Ey的启动子区域则几乎检测不到组蛋白的乙酰化 ,且诱导前后无明显变化 .

关键词：染色质免疫沉淀法染色质 MEL细胞组蛋白乙酰化基因表达调节

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