检索结果-内蒙古大学图书馆

中华病理学杂志 1992年第2期21卷 73-76,T014页

作者：段宏伟王宗立 100005，北京，中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学部病理研究室 00005，北京，中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学部病理研究室

通过透射电镜和普通光镜观察到高脂血家兔腹腔巨噬细胞中含有大量脂质,其中90%以上形态上与斑块中泡沫细胞相似,以这种体内自然形成的泡沫细胞为模型,我们观察了高密度脂蛋白(HDL)对细胞内沉积脂质的转运作用以及Ca拮抗剂,硝苯吡啶(Ni)... 详细信息

通过透射电镜和普通光镜观察到高脂血家兔腹腔巨噬细胞中含有大量脂质,其中90%以上形态上与斑块中泡沫细胞相似,以这种体内自然形成的泡沫细胞为模型,我们观察了高密度脂蛋白(HDL)对细胞内沉积脂质的转运作用以及Ca拮抗剂,硝苯吡啶(Ni)对HDL转运作用的协同效应。结果表明HDL具有明显的转运细胞内脂质作用,该作用与作用时间有关。HDL作用下,在第96小时可转运出沉积脂质的30%左右。我们还观察到Ni具有以不同于HDL的作用途径转运胆固醇的能力,并且能够促进细胞内胆固醇酯水解作用。HDL条件培养物中加入Ni,显示细胞排泌或被逆向转运胆固醇的效应显著增加,实验结果提示Ni的作用可能与增强HDL的清除功能有关。

关键词：硝苯吡啶动脉粥样硬化高脂蛋白

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大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白mRNA在生精周期中的表达

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 287-289页

作者：陈咏梅叶世隽黄玉苓郑文利中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织胚胎教研室北京100005

目的　研究大鼠睾丸支持细胞 (sertoli cell,SC)雄激素结合蛋白 (ABP) m RNA水平与曲细精管上皮周期的相关关系。方法　以地高辛标记的大鼠 ABP c DNA探针在 SD大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交 ,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定... 详细信息

目的　研究大鼠睾丸支持细胞 (sertoli cell,SC)雄激素结合蛋白 (ABP) m RNA水平与曲细精管上皮周期的相关关系。方法　以地高辛标记的大鼠 ABP c DNA探针在 SD大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交 ,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。结果　 ABP m RNA在 - 期维持低水平 ; - 期迅速升高 ,达到高峰 ; - 期骤然下降 ,但仍高于 - 期水平 , - 期又略有回升 ;随后迅速下降至 - 期水平。结论　 SC内 ABPm RNA水平具有明显的生精周期依赖性变化。

关键词：支持细胞雄激素结合蛋白睾丸 mRNA 生精周期

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人IgA Fc受体(CD89)的功能部位

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 521-524页

作者：任继辉石敏鹿张伟中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室北京100005

目的确定人 IgA Fc受体（ Fcα R, CD89）结合 IgA的功能部位。方法先采用 PCR及点突变 PCR技术获得不同片段的 Fcα R cDNA，再将各片段分别插入表达质粒 pET30a中，在大肠杆菌中表达出不同片段的受体，用一组能够结合 Fcα R的单克隆... 详细信息

目的确定人 IgA Fc受体（ Fcα R, CD89）结合 IgA的功能部位。方法先采用 PCR及点突变 PCR技术获得不同片段的 Fcα R cDNA，再将各片段分别插入表达质粒 pET30a中，在大肠杆菌中表达出不同片段的受体，用一组能够结合 Fcα R的单克隆抗体通过 Western印迹法鉴别所表达片段是否具有 Fcα R的功能部位。结果表达了 5种不同片段的 Fcα R，能够封闭 Fcα R的中和抗体仅与受体的远膜区（ EC1）结合。结论 Fcα R的功能部位位于 EC1上。

关键词： Fc受体 IgA 点突变

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心钠素基因的突变及对其利尿活性的影响

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中华医学杂志 2002年第19期82卷 1324-1327页

作者：李涛梁红雁闫峰卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学北京100005

目的　提高心钠素的生物学活性。方法　通过改造心钠素基因、构建突变型心钠素基因的逆转录病毒载体以及用肌内注射法将突变型和非突变型心钠素基因表达载体的裸DNA分别导入阿霉素诱导的肾病大鼠体内 ,以对其突变前后的利尿活性进行比... 详细信息

目的　提高心钠素的生物学活性。方法　通过改造心钠素基因、构建突变型心钠素基因的逆转录病毒载体以及用肌内注射法将突变型和非突变型心钠素基因表达载体的裸DNA分别导入阿霉素诱导的肾病大鼠体内 ,以对其突变前后的利尿活性进行比较研究。结果　获得了结构和功能两方面均符合预期的突变型心钠素基因。与空载体组相比 [87± 7 1pg/ml(n =6 ) ],突变和野生型心钠素基因组大鼠 (n =6 )血浆中的心钠素浓度均在试验开始后的第 5d明显升高 ,分别为 10 7± 7 8pg/ml(t =4 6 5 ,P <0 0 1)和 113± 8 6pg/ml(t =5 71,P <0 0 1)。两个试验组大鼠的尿量在试验开始后的第 5d就明显增多 ,有效期达 15d以上。突变型心钠素基因的作用更强 ,其大鼠在第 5、10和 15d时的尿液增长量分别是野生型心钠素组的 1 6、2 0和 1 9倍。结论　所获突变型心钠素基因的利尿作用明显增强。

关键词：利尿活性心钠素基因疗法逆转录病毒载体心力衰竭

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进行性脊髓性肌萎缩症患者神经元存活基因及神经元凋亡抑制蛋白基因的缺失

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 551-554页

作者：马素参袁丽芳刘天慈杨涛周文敏吴沪生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传室北京100005 Beijing Children's Hospital Affiliated to Capital University of Medical Science

目的研究中国人群中进行性脊髓性肌萎缩症 (spinal muscular atrophy, SMA)患者中神经元存活基因（ survival motor neuron, SMN）外显子 7及神经元凋亡抑制蛋白基因（ neuronal apoptosis inhibitory protein gene, NAIP）外显子 5缺... 详细信息

目的研究中国人群中进行性脊髓性肌萎缩症 (spinal muscular atrophy, SMA)患者中神经元存活基因（ survival motor neuron, SMN）外显子 7及神经元凋亡抑制蛋白基因（ neuronal apoptosis inhibitory protein gene, NAIP）外显子 5缺失情况，进一步探讨这 2个 SMA候选基因与 SMA的关系。方法应用 PCR- SSCP分析技术对 55个 SMA患儿家系及 40例正常人个体的 SMN基因外显子 7区域和 55例患儿 NAIP基因外显子 5的缺失进行检测。结果 SMN基因外显子 7区域纯合缺失率分别为： SMA I型 92％（ 23/25）；Ⅱ型 90％（ 27/30）。患儿双亲中有 2例母亲和 1例父亲也有纯合缺失。在 55例 SMA患儿中未检测到有 NAIP基因外显子 5的纯合缺失，仅发现 2例杂合性缺失。结论中国人 SMA患者中 SMN基因外显子 7的纯合缺失率高，而在正常人中未见有缺失，表明其与 SMA发生密切相关； NAIP基因外显子 5的杂合性缺失率在本实验中仅约为 4％。

关键词：脊肌萎缩症神经元存活基因神经元凋亡抑制蛋白基因单链构象多态性

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非同位素逆相点杂交方法检测苯丙酮尿症突变基因

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中华医学遗传学杂志 1998年第5期15卷 307-309页

作者：杨涛袁丽芳黄尚志赵时敏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室北京协和医院

目的建立一种简便、准确和快速的筛查苯丙酮尿症（ＰＫＵ）突变基因的方法。方法应用生物素渗入的聚合酶链反应扩增中国人ＰＫＵ患者常见突变位点：Ｙ２０４Ｃ（ｅｘｏｎ６，Ｅ６）、Ｒ２４３Ｑ（Ｅ７）、Ｙ３５６Ｘ（Ｅ１１）和Ｒ４１... 详细信息

目的建立一种简便、准确和快速的筛查苯丙酮尿症（ＰＫＵ）突变基因的方法。方法应用生物素渗入的聚合酶链反应扩增中国人ＰＫＵ患者常见突变位点：Ｙ２０４Ｃ（ｅｘｏｎ６，Ｅ６）、Ｒ２４３Ｑ（Ｅ７）、Ｙ３５６Ｘ（Ｅ１１）和Ｒ４１３Ｐ（Ｅ１２）所在的４个外显子区域，扩增标记产物再与固定于同一张膜上的等位基因特异性寡核苷酸探针进行逆相点杂交（ＲＤＢ），用碱性磷酸酶显色法检测杂交信号以确定突变类型。结果建立了检测以上突变位点的非同位素逆相点杂交方法，并对５例就诊的ＰＫＵ患者进行了ＲＤＢ检测，查明３例携带Ｒ２４３Ｑ突变，其中１例还带有Ｙ３５６Ｘ突变，用单链构象多态性方法验证了上述结果。

关键词：苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶逆相斑点杂交 PCR

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血管紧张素Ⅱ对人内皮细胞转录因子NF-κB的激活机制及其对PDGF-B基因转录的影响

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中华医学杂志 2002年第3期115卷 433-438页

作者：李皓尹鸿操张华曹心宜王宗立佘铭鹏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理研究室北京100005　　

目的　研究血管紧张素Ⅱ对ECV304细胞中转录因子NF-κB的作用和对PDGF-B 基因表达的影响.方法　采用电泳迁移率移动分析法(EMSA)和免疫组化方法,包括共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术；荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的... 详细信息

目的　研究血管紧张素Ⅱ对ECV304细胞中转录因子NF-κB的作用和对PDGF-B 基因表达的影响.方法　采用电泳迁移率移动分析法(EMSA)和免疫组化方法,包括共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术；荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的方法及Northern 印迹法研究血管紧张素Ⅱ激活NF-κB的信号传递路径和检测了血管紧张素Ⅱ刺激前后PDGF-B mRNA的表达水平.结果　血管紧张素Ⅱ刺激后,在ECV304细胞内有NF-κB的激活及核易位过程,应用免疫荧光共聚焦显微镜,免疫电镜及Northern 印迹等方法均可观察到PDGF-B或其基因表达增高.变异型激酶质粒IKKα-KM,IKKβ-KM 及 NIK-KM 可抑制经AngⅡ刺激的转染细胞内与NF-κB启动相连的荧光素酶的表达.结论　AngⅡ可激活胞浆内NF-κB并出现核易位,激酶NIK、IKKα和IKKβ参与了此信号传递路径.血管紧张素Ⅱ刺激后PDGF-B链mRNA水平增高.

关键词：血管紧张素Ⅱ NF-κB 内皮细胞 PDGF-B

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皮下移植心钠素基因表达细胞胶囊对高血压大鼠的降血压效应

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中华医学杂志 2002年第16期82卷 1086-1089页

作者：李涛梁红雁卢果史瑞文卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所中国医学科学院中国协和医科大学

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分... 详细信息

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分别导入SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中 ,制备可从孔中排出心钠素多肽的微孔胶囊 ,并将表达和不表达人心钠素的新生鼠皮肤成纤维细胞分别装入不同的胶囊中 ,封闭后分别植于实验组和对照组幼龄SHR(各 1 0只 )的皮下。移植后每周测定大鼠血浆心钠素水平、血压、尿量、尿液钾、钠浓度和体重 ,连续 7周。结果　在逆转录病毒载体的介导下 ,人心钠素基因既可在逆转录病毒载体的包装细胞系中表达 [(5 84± 0 0 7)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ] ,也可在SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中表达 [(1 3 37± 2 36)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ]。皮下移植胶囊后第 1周 ,实验组大鼠血浆中的心钠素浓度 (1 31pg/ml± 8pg/ml)明显高于对照组 (1 0 4pg/ml± 7pg/ml,t=8 62 ,P <0 0 1 )。 7周观察期间 ,两组大鼠的血压均随个体发育而逐渐升高 ,但实验组血压[(1 2 9± 9)～ (1 69± 9)mmHg]却始终明显低于对照组 [(1 4 5± 1 0 )～ (1 81± 9)mmHg ,P <0 0 5～0 0 1 ) ] ,其中第

关键词：皮下移植心钠素基因表达细胞降血压效应高血压心钠素基因治疗微孔胶囊

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苯丙酮尿症患者智能障碍程度与基因型相关性分析

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中华医学遗传学杂志 1998年第5期15卷 297-299页

作者：袁丽芳方炳良王玫王涛黄尚志杨涛赵时敏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传研究室北京协和医院

目的了解苯丙酮尿症（ｐｈｅｎｙｌｋｅｔｏｎｕｒｉａ，ＰＫＵ）患者智能障碍程度与突变基因性质的关系。方法应用ＰＣＲ－ＡＳＯ及ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对４５例经典型ＰＫＵ患儿作突变基因检测。对查明基因型的２７例患儿就其智能障... 详细信息

目的了解苯丙酮尿症（ｐｈｅｎｙｌｋｅｔｏｎｕｒｉａ，ＰＫＵ）患者智能障碍程度与突变基因性质的关系。方法应用ＰＣＲ－ＡＳＯ及ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对４５例经典型ＰＫＵ患儿作突变基因检测。对查明基因型的２７例患儿就其智能障碍程度及基因突变性质作一比较。结果苯丙氨酸羟化酶基因型与患儿智能障碍程度缺乏一致性。２７例中仅８例表型与基因型相符，１９例不符。结论苯丙氨酸羟化酶基因突变性质与其表达的酶活性、与治疗前血苯丙氨酸浓度高低相关，但与就诊晚。

关键词：苯丙酮尿症基因型智能障碍相关性分析

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人分泌型白细胞介素2受体α链基因的克隆及其在真核细胞中的表达

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中国医学科学院学报 1995年第5期17卷 326-332页

作者：程小款杜恺衡凤燕吴宁华沈珝琲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室

删除人白细胞介素－２受体α链ｃＤＮＡ中编码胞质内１３个氨基酸及跨膜区１９个氨基酸残基的ＤＮＡ片段后，接上人工合成的终止寡核苷酸片段，改建后的ｃＤＮＡ与真核表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ重组成质粒ｐＣＭＶ／ｒｓＩＬ２Ｒ。用电打... 详细信息

删除人白细胞介素－２受体α链ｃＤＮＡ中编码胞质内１３个氨基酸及跨膜区１９个氨基酸残基的ＤＮＡ片段后，接上人工合成的终止寡核苷酸片段，改建后的ｃＤＮＡ与真核表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ重组成质粒ｐＣＭＶ／ｒｓＩＬ２Ｒ。用电打孔及磷酸钙法将此质粒转染ＣＨＯ细胞，经Ｇ４１８筛出表达Ｎｅｏ基因的克隆２０株，通过ｍＲＮＡ狭缝杂交及ＥＬＩＳＡ检测，有５株能稳定表达分泌型α链ｍＲＮＡ及蛋白，其中４株细胞培养上清中的ＩＬ２Ｒα链的含量达１４００Ｕ／ｍｌ以上。

关键词：白细胞介素2 受体重组克隆真核基因表达

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