检索结果-内蒙古大学图书馆

验证性筛选PDZ结构域结合配体文库快速研究HtrA2/Omi PDZ结构域的结合特性

中国科学（C辑） 2007年第1期37卷 107-116页

作者：马素参宋婀莉高诗娟田瑞高友鹤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室蛋白质组学研究中心病理生理学系北京100005

HtrA2/Omi是一种线粒体丝氨酸蛋白酶,在哺乳动物细胞中具有双重功能,即诱导细胞凋亡和参与维持线粒体活性的动态平衡.PDZ结构域是最重要的蛋白质相互作用结构域之一,参与多种生物学过程,如细胞信号转导、蛋白质降解、细胞骨架组织等.最... 详细信息

HtrA2/Omi是一种线粒体丝氨酸蛋白酶,在哺乳动物细胞中具有双重功能,即诱导细胞凋亡和参与维持线粒体活性的动态平衡.PDZ结构域是最重要的蛋白质相互作用结构域之一,参与多种生物学过程,如细胞信号转导、蛋白质降解、细胞骨架组织等.最近研究发现,HtrA2/Omi蛋白的PDZ结构域与配体的相互作用,可以调节HtrA2/Omi蛋白自身的水解酶活性.以HtrA2/Omi PDZ结构域为研究对象,用酵母双杂交系统验证性筛选PDZ结构域结合配体文库,快速研究该结构域的结合特性,并在人类全蛋白质组范围内预测并发现该结构域新的相互作用蛋白,最后分析这些新的相互作用所能够形成的最小相互作用网络来评估其可信度.研究结果揭示了HtrA2/Omi PDZ结构域新的结合特性,即:不仅能够结合已报道的II类PDZ配体而且还可以结合I类和III类PDZ配体,并且配体-3位氨基酸具有一定范围内的可变性.而且,发现了7个新的HtrA2/Omi PDZ结构域相互作用蛋白,为进一步阐明HtrA2/Omi蛋白的生物学功能提供了重要线索.同时证明了验证性筛选目的结构域结合配体文库,这一结构域结合特性研究新策略的实用性和高效性.

关键词： HtrA2/Omi PDZ结构域结构域结合特性验证性筛选蛋白质相互作用生物信息学

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大鼠神经元凋亡相关碱性蛋白ARBP cDNA的克隆和功能

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第1期19卷 36-40页

作者：白氡明洪周新富陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 南澳洲Flinders大学医学院生理系

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广... 详细信息

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广泛的分布 .在R2L1细胞中转染ARBP反义cDNA表达载体后 ,既可以促进细胞增殖 ,又可以抑制去血清诱导的细胞凋亡 .因而 ,ARBP蛋白对神经元细胞的凋亡具有重要的调节作用 .

关键词：神经营养因子低亲和力受体 p75NTR cDNA末端快速扩增凋亡相关碱性蛋白大鼠神经元

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sTRAIL在大肠杆菌中的表达及其诱导细胞凋亡活性的研究

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科学通报 1999年第9期44卷 972-975页

作者：朱迅刘彦信马正宇郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩... 详细信息

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩增了TRAIL胞外功能区(sTRAIL) ,并将其插入原核表达载体 ,转化大肠杆菌后 ,可溶型重组蛋白 (rsTRAIL)获得了高效稳定表达 ,其产量达到菌体总蛋白的 30 %左右 .体外研究表明 ,亲和层析纯化后的重组蛋白在 0 .1～ 1 μg/mL的浓度范围内 ,能显著诱导所试全部 7种肿瘤细胞株细胞凋亡 ,但不能诱导正常鼠成纤维细胞株细胞凋亡 ;进一步研究表明 ,rsTRAIL对贲门癌、乳腺癌和恶性胸腺瘤等原代细胞也具有强烈的杀伤作用 ,但不能杀伤正常人外周血淋巴细胞 .此实验结果为rsTRAIL特异性地诱导肿瘤细胞凋亡的生物学作用提供了新的实验证据 ,具有重要的临床应用价值 .

关键词：肿瘤细胞细胞凋亡 sTRAIL 肿瘤坏死因子

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8-氯腺苷诱导MOLT-4细胞凋亡

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科学通报 1997年第2期42卷 189-193页

作者：王宪焘郑德先刘睿中刘彦信杨桂珍刘士廉闵吉梅郑萍张礼和中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国协和医科大学基础医学院北京100005 北京医科大学药学院天然药物与仿生药物国家重点实验室北京100083

8-氯腺苷(8-CA)是我们新合成的腺苷类似物,方家椿等报道8-CA对小鼠肝癌实体瘤以及人白血病细胞系HL-60和K562等有明显抑制生长作用。

关键词：细胞凋亡 MOLT-4细胞氯腺苷癌细胞抗癌药

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人载脂蛋白(a)中Kringle域的结构与功能

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生命的化学 2007年第5期27卷 418-421页

作者：申乐陈保生中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Kringle domain,也称Kringle域是蛋白质分子中由3个二硫键形成的特殊的三环状结构。人体很多种蛋白质均含有这种结构,其中以载脂蛋白(a)中所含有的Kringle域数目为最多。载脂蛋白(a)是脂蛋白(a)的重要组成部分,而Kringle域在脂蛋白(a)... 详细信息

Kringle domain,也称Kringle域是蛋白质分子中由3个二硫键形成的特殊的三环状结构。人体很多种蛋白质均含有这种结构,其中以载脂蛋白(a)中所含有的Kringle域数目为最多。载脂蛋白(a)是脂蛋白(a)的重要组成部分,而Kringle域在脂蛋白(a)完整颗粒的结构组装及载脂蛋白(a)的功能方面均发挥这十分重要的作用。载脂蛋白(a)与纤维蛋白溶解酶原之间具有高度的同源性,而且载脂蛋白(a)中的部分Kringle域能够通过抑制血管生长实现抑制肿瘤生长的目的。这些研究进一步明确了脂蛋白(a)与载脂蛋白(a)的病理生理学意义,并对临床相关疾病的治疗提供了理论依据。

关键词：载脂蛋白(a) 三环结构域脂蛋白(a) 血管生长

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巨噬细胞集落刺激因子受体的配基结合区的分析

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科学通报 2000年第2期45卷 178-182页

作者：罗寿青郑德先刘彦信饶青吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白．酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ... 详细信息

从人胎盘中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白．酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ１－３结合Ｍ－ＣＳＦ的能力是重组Ｄ２－３的３倍，前者的Ｋｄ为１１ｎｍｏｌ／Ｌ，后者的为３９ｎｍｏｌ／Ｌ．而重组的Ｄ３则完全没有结合能力．这些数据提示Ｄ２－３是与其配基结合的主体位点，Ｄ１为其配基结合的辅助位点，可能对配基结合位点的刚性也有贡献．

关键词：巨噬细胞集落刺激因子受体结合活性 M-CSF

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FMRP与TDG蛋白的相互作用

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科学通报 1999年第18期44卷 1981-1985页

作者：陈雨亭 B. Bardoni 余珉朱宁吴冠芸 J.L. Mandel 沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 IGBMC CNRS-INSERM-ULP 67404 Illkirch France

脆性X智力低下蛋白FMRP表达的缺乏可以导致最常见的遗传性智力低下疾病--脆性X综合征. 用酵母双杂交体系筛选与FMRP相互作用的蛋白质,以期通过相互作用的蛋白质研究与FMRP相关的生化途径. 从小鼠胚胎cDNA文库中得到一个与FMRP特异相互... 详细信息

脆性X智力低下蛋白FMRP表达的缺乏可以导致最常见的遗传性智力低下疾病--脆性X综合征. 用酵母双杂交体系筛选与FMRP相互作用的蛋白质,以期通过相互作用的蛋白质研究与FMRP相关的生化途径. 从小鼠胚胎cDNA文库中得到一个与FMRP特异相互作用蛋白的cDNA ( Genbank号af102875 ). 该cDNA编码的蛋白与人的G/T错配DNA胸腺嘧啶糖苷酶( hTDG )高度同源. 通过多种FMRP选择剪接异构体或缺失体与一系列TDG缺失体间相互作用的研究,确定了FMRP与TDG的相互作用发生在FMRP第13外显子(第397～425氨基酸残基)和TDG第122～346氨基酸残基区域内. 上述结果有助于深入研究FMRP涉及的生化途径.

关键词：脆性X智力低下蛋白质 (FMRP) G/T错配DNA胸腺嘧啶糖苷酶(TDG) 酵母双杂交蛋白质相互作用

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重组可溶型Fas的表达及抗体制备

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中华医学杂志 2000年第12期80卷 914-915页

作者：刘彦信赵芳萍祖淑玉刘士廉刘复强翟艳苓杨敏赵相印郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 100005 首都医科大学附属北京同仁医院

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异丁酰胺活化成年小鼠中胚胎εy珠蛋白基因的转录

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 64-68页

作者：张雪青陈平张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500～900mg／kg体重的剂量注射15天后，鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3～6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）... 详细信息

实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500～900mg／kg体重的剂量注射15天后，鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3～6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）及白细胞计数（WBC）基本上均在正常范围内。受注射家兔的血液钾、钠、氯含量无异常变化，血浆离子渗透压亦保持稳定。这些结果说明异丁酰胺能够有效地在成年小鼠体内作用于早期成红细胞，激活胚胎εy-珠蛋白基因的转录，并且不显示血液学和电解质毒性，进一步证明了其在β-地中海贫血治疗中的潜在价值。

关键词：异丁酰氨胚胎εy珠蛋白基因毒性实验

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氧化低密度脂蛋白新基因OLRG-1的克隆及组织分布

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基础医学与临床 2000年第5期20卷 20-22页

作者：张可满陈保生薛红吴钢曾武威中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

用改进的差异显示反转录-PCR技术，从血管内皮细胞中获得了一个氧化低密度脂蛋白诱导差异表达的cDNA 片段。以此片段为探针，从人主动脉cDNA 文库中筛选了一个新的全长cDNA 。其核苷酸总长4137bp，编码642 个氨基酸的蛋白质。Northern... 详细信息

用改进的差异显示反转录-PCR技术，从血管内皮细胞中获得了一个氧化低密度脂蛋白诱导差异表达的cDNA 片段。以此片段为探针，从人主动脉cDNA 文库中筛选了一个新的全长cDNA 。其核苷酸总长4137bp，编码642 个氨基酸的蛋白质。Northern 印迹分析证实氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞后，该基因表达减低了3 倍，基因定名为OLRG-1。OLRG-1 为一多组织表达的基因，与人NS1-BP 基因高度同源。氧化低密度脂蛋白可能通过降低OLRG-1 的表达，影响mRNA 前体的剪接成熟，调控基因的表达。

关键词：血管内皮细胞 Qx-LDL 基因表达动脉粥样硬化

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