检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2004年第5期24卷 509-513页

作者：白海花张昕原邱长春顾明亮吉日木图赵宏林赵文海侯淑琴周文郁吴柒柱白玉华内蒙古民族大学通辽028000 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为鉴定蒙古族X连锁先天缺失牙 /头发卷曲家系外胚层发育不全无汗综合征致病基因 (EDA)突变类型及其与表型的关系 ,本文以七代患有先天缺失牙的蒙古族大家系为研究对象 ,应用聚合酶链反应产物直接测序 (PCR/Sequencing)分析每个成员EDA... 详细信息

为鉴定蒙古族X连锁先天缺失牙 /头发卷曲家系外胚层发育不全无汗综合征致病基因 (EDA)突变类型及其与表型的关系 ,本文以七代患有先天缺失牙的蒙古族大家系为研究对象 ,应用聚合酶链反应产物直接测序 (PCR/Sequencing)分析每个成员EDA基因第一外显子碱基突变及其部位。测序结果显示 ,先证者及其他男性患者EDA基因第一外显子 193位的胞嘧啶被鸟嘌呤取代 ,均为 193G/G纯合基因型 ,193C→G颠换是一种新的错义突变 ,导致胞外区 6 5精氨酸转变为甘氨酸 (R6 5G)。先症者母亲Ⅳ 8为 193C/G杂合基因型 ,牙齿正常。携带 193G/C杂合基因型女性临床表型为Ⅴ 3表现 11、2 1、31、4 1缺如 ,Ⅴ 31表现 12、2 2缺如 ,两者均伴有头发卷曲 ,而Ⅴ 1、Ⅴ 6、Ⅴ 8、Ⅴ 11、Ⅴ2 0、Ⅴ 4 6及Ⅳ 10、Ⅵ 3等牙齿数目及形态均无明显异常 ,头发无卷曲。综上所述 ,该蒙古族大家系中EDA基因第一外显子 193位C→G颠换引起的错义突变 ,是导致其发病的主要分子机制之一。但携带

关键词：蒙古族 X连锁先天缺失牙头发卷曲家系 EDA基因基因型表型

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自体成纤维细胞注射移植的存活性初探

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基础医学与临床 2003年第3期23卷 314-317页

作者：赵玉明赵作均林惶左瑾方福德王佳琦中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院面颈整形美容中心北京100041 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E... 详细信息

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E染色 ,天狼猩红染色观察 ,发现3H TdR掺入标记的细胞依然存活 ;注射部位出现大量的幼稚型成纤维细胞 ;真皮厚度增加 ,实验组为 14 0 2 6± 6 31(× 5 μm) ,对照组为 12 7 6 6± 4 78(× 5 μm) (P <0 0 1) ;Ⅲ型胶原含量增加 ,实验组为 2 6 3± 1 4 1(cm2 ) ,对照组为 1 0 5± 0 90 (cm2 ) (P <0 0 5 )。表明自体成纤维细胞注射移植后 ,能够在体内长期存活并分泌新生Ⅲ型胶原 ,为临床应用提供了初步、可靠的理论依据。

关键词：成纤维细胞细胞移植放射自显影 ^3H-TdR

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树载脂蛋白CⅡ的cDNA和蛋白质结构分析

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基础医学与临床 2002年第2期22卷 134-137页

作者：曾武威张坚陈保生吴钢张文成薛红中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所北京100050

以从树肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了树apoCⅡ的cDNA序列 ,并推导出其蛋白质氨基酸序列 ,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果显示 ,树apoCⅡcDNA序列 (在GenBan... 详细信息

以从树肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了树apoCⅡ的cDNA序列 ,并推导出其蛋白质氨基酸序列 ,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果显示 ,树apoCⅡcDNA序列 (在GenBank中的注册号为AF335 5 85 )长 483bp ,其中开放阅读框架 30 6bp ,编码 10 1个氨基酸的前原蛋白 ,其蛋白原由 79个氨基酸组成。树apoCⅡ的氨基酸顺序与人、猴、狗的同源性分别为 86 %、87%和 81%。与人及其它种属动物的相同序列比较显示 ,树apoCⅡ分子C 端激活LPL功能区比N 端脂质结合区更具保守性。

关键词：结构分析树Qu 载脂蛋白CⅡ cDNA 蛋白质 SMART-RACE技术

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表皮生长因子受体介导的肿瘤靶向基因治疗的一种新策略

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中国医学科学院学报 2004年第6期26卷 661-665页

作者：方华圣洪梅张树政卢圣栋 Ion Beam Bioengineering Laboratory School of Physical Science and TechnologyZhengzhou UniversityZhengzhou 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 Laboratory of Enzyme Engineering Institute of MicrobiologyChinese Academy of Sciences

目的建立一种针对表皮生长因子受体(EGFR)富集的恶性肿瘤进行靶向基因治疗的方法。方法构建重组真核表达载体pcDNA3.1-PEⅢmut。将组蛋白H1亚基与表皮生长因子C环(H1-EGFc)融合蛋白作为非病毒载体,与pcDNA3.1-PEⅢmut在体外形成复合物... 详细信息

目的建立一种针对表皮生长因子受体(EGFR)富集的恶性肿瘤进行靶向基因治疗的方法。方法构建重组真核表达载体pcDNA3.1-PEⅢmut。将组蛋白H1亚基与表皮生长因子C环(H1-EGFc)融合蛋白作为非病毒载体,与pcDNA3.1-PEⅢmut在体外形成复合物。以此蛋白质-DNA复合物分别处理EGFR富集的BT-325和Hela细胞以及EGFR缺乏的JK细胞,并在处理48h后计算该蛋白质-DNA复合物对各细胞的杀伤率。结果含3μgDNA的H1-EGFc与pcDNA3.1-PEⅢmut复合物对EGFR富集的BT-325和Hela细胞的杀伤率分别是46.03%和48.12%,但对EGFR缺乏的JK细胞无杀伤作用。结论成功建立了针对EGFR富集恶性肿瘤的靶向基因治疗方法。

关键词：表皮生长因子受体杀伤基因靶向基因治疗

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SARS冠状病毒PUMC_2株全基因组cDNA分段克隆

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中国医学科学院学报 2003年第5期25卷 499-503页

作者：樊峥谈昕煜阴彬邹柯王婷沈岩倪安平秦川袁建刚强伯勤彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 Chinese National Human Genome Center Beijing Department of Clinical Laboratory PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Institute of Experimental Animal CAMS and PUMCBeijing

目的分段克隆SARS冠状病毒PUMC2株的全基因组cDNA。方法以SARS冠状病毒PUMC2株基因组RNA为模板,用RT-PCR扩增cDNA片段,PCR产物经纯化后,连接入pGEM-T载体中,进行序列测定。结果获得了SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA的分段克隆。结论... 详细信息

目的分段克隆SARS冠状病毒PUMC2株的全基因组cDNA。方法以SARS冠状病毒PUMC2株基因组RNA为模板,用RT-PCR扩增cDNA片段,PCR产物经纯化后,连接入pGEM-T载体中,进行序列测定。结果获得了SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA的分段克隆。结论SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA分段克隆的获得,为SARS冠状病毒基因功能的研究和全长有感染性cDNA的克隆奠定了基础。

关键词： SARS冠状病毒PUMC2株分段克隆

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中国人2型糖尿病的基因分型和定位

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解剖学报 1999年第4期30卷 289-292页

作者：赵进英王姮左瑾李玉秀孙琦黄薇陈竺蔡有余方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院上海第二医科大学瑞金医院中国医学科学院实验动物研究所

目的　对中国人２型糖尿病即非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）家系基因组ＤＮＡ进行基因分型及基因定位。　方法　采用分布于１～２２号染色体及Ｘ染色体上的３５８对荧光标记的微卫星引物，进行多重ＰＣＲ，ＰＣＲ扩增产物用聚... 详细信息

目的　对中国人２型糖尿病即非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）家系基因组ＤＮＡ进行基因分型及基因定位。　方法　采用分布于１～２２号染色体及Ｘ染色体上的３５８对荧光标记的微卫星引物，进行多重ＰＣＲ，ＰＣＲ扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分离，然后进行电泳图谱及信息收集。应用ＧｅｎｅｓｃａｎＴＭ３．０软件和Ｇｅｎｏ－ｔｙｐｅＴＭ２．１软件进行基因分型和基因定位。　结果　在３５个家系中共有１９３个微卫星标志能准确进行基因分型。共得４１４９５个基因型。经过多点连锁分析和患病同胞对分析，初步确定在１，１０，１２，１８，２０号染色体上存在ＮＩＤＤＭ相关基因位点。　结论　用全基因组扫描技术可以对中国人２型糖尿病相关基因位点进行基因分型和基因定位。

关键词：糖尿病 Ⅱ型基因分型基因定位

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羊瘙痒因子263K感染仓鼠终末期脑中胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达和分布变化研究

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病毒学报 2004年第2期20卷 118-123页

作者：陈岚张瑾肖新莉韩俊高建梅张宝云许彩民董小平中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

为了探讨羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织中星形胶质细胞和神经元的数量及功能改变,利用免疫印迹、免疫组化方法研究了胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specificenolase,NSE)在受染仓... 详细信息

为了探讨羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织中星形胶质细胞和神经元的数量及功能改变,利用免疫印迹、免疫组化方法研究了胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specificenolase,NSE)在受染仓鼠各脑区中表达变化的特点,同时比较其与神经病理学改变及PrPSc沉积的关系。结果表明,感染终末期仓鼠的脑组织中GFAP表达量明显增高,与正常对照相比,大脑皮质、脑干和小脑区域GFAP着色细胞数量分别增高3 69、2 41和1 56倍。感染仓鼠脑组织NSE表达量低于正常对照,小脑、海马CA1区和大脑皮质NSE着色细胞数量分别仅为正常对照相应区域的22 5%、54 2%和53 9%。这些变化与PrPSc在脑组织中的沉积程度和空泡样变性程度相吻合。结果提示,GFAP和NSE的检测可分别很好地反映星形胶质细胞和神经元的数量及功能状态,成为在朊病毒病发病过程中重要的病理变化指标。

关键词：朊病毒病羊瘙痒因子感染仓鼠脑胶质纤维神经元

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锌指蛋白ZNF580定位在MGC803细胞核

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基础医学与临床 2006年第2期26卷 199-200页

作者：张文成张敏徐瑞成陈保生武警医学院细胞生物学与医学遗传学教研室天津300162 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

新基因(AF184939)ZNF580是由本组克隆并于Genbank注册的C2H2型锌指蛋白转录因子基因,其cDNA748－1266bp之间的碱基构成一个完整的开放阅读框,编码172个氨基酸。蛋白功能基序分析表明:其羧基端序列中含有3个重复串联的C2H2型锌指蛋白主构... 详细信息

新基因(AF184939)ZNF580是由本组克隆并于Genbank注册的C2H2型锌指蛋白转录因子基因,其cDNA748－1266bp之间的碱基构成一个完整的开放阅读框,编码172个氨基酸。蛋白功能基序分析表明:其羧基端序列中含有3个重复串联的C2H2型锌指蛋白主构域:CX2CX3FX5LX2HX3H(X代表保守性差的氨基酸),富含脯氨酸残基的氨基端序列为转录激活结构域。[第一段]

关键词： C2H2型锌指蛋白 MGC803 细胞核开放阅读框氨基酸转录因子碱基构成蛋白功能转录激活新基因

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人神经系统特异表达RNA结合蛋白HuC cDNA的克隆、表达及纯化

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基础医学与临床 2006年第6期26卷 608-612页

作者：强华王先平狄文娜胡洁淼彭小忠贾连顺阴彬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室第二军医大学长征医院上海200003

目的克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利... 详细信息

目的克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利用GST纯化系统,对HuC重组蛋白进行纯化。结果经过表达及纯化条件的摸索,最终获得重组HuC蛋白。结论HuC蛋白是一种神经系统表达RNA结合蛋白,重组HuC蛋白的获得为HuC抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

关键词： RNA结合蛋白HuC cDNA克隆原核表达纯化

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维生素D受体基因多态性与乙型肝炎病毒感染的关联研究

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中华医学遗传学杂志 2006年第4期23卷 402-405页

作者：李俊红陈冬梅李卓刘英高冀荣曾宪嘉钟崇芳朱席林勾春燕潘利单晶郭新会李辉首都医科大学附属北京佑安医院肝炎研究所北京100054 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨中国汉族人群维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)基因多态性是否与乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染结局相关联。方法以184例慢性乙肝患者和205名无症状HBV携带者为研究对象,收集外周血,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应-... 详细信息

目的探讨中国汉族人群维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)基因多态性是否与乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染结局相关联。方法以184例慢性乙肝患者和205名无症状HBV携带者为研究对象,收集外周血,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)方法,分析VDR基因第2外显子FokⅠ位点、第9外显子TaqⅠ位点的多态性分布。结果单因素分析结果显示FokⅠ位点FF基因型在慢性乙肝组的频率44.6%显著高于无症状HBV携带组的31.7%(P<0.05)。经多因素非条件Logistic回归分析调整混杂作用后,结果仍然显示FF基因型在慢性乙肝组与无症状HBV携带组之间的差异存在统计学意义(OR=1.95,P<0·05)。FokⅠ位点与TaqⅠ位点组成的FT单倍型在慢性乙肝组的分布频率显著高于无症状HBV携带组(OR=1.45,P<0.05),fT单倍型在慢性乙肝组的分布频率显著低于无症状HBV携带组(OR=0.72,P<0.05)。结论维生素D受体基因多态性可能影响HBV感染的遗传易感性。

关键词：维生素D受体乙型肝炎遗传多态性

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