检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2000年第3期20卷 64-68页

作者：张雪青陈平张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500～900mg／kg体重的剂量注射15天后，鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3～6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）... 详细信息

实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500～900mg／kg体重的剂量注射15天后，鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3～6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）及白细胞计数（WBC）基本上均在正常范围内。受注射家兔的血液钾、钠、氯含量无异常变化，血浆离子渗透压亦保持稳定。这些结果说明异丁酰胺能够有效地在成年小鼠体内作用于早期成红细胞，激活胚胎εy-珠蛋白基因的转录，并且不显示血液学和电解质毒性，进一步证明了其在β-地中海贫血治疗中的潜在价值。

关键词：异丁酰氨胚胎εy珠蛋白基因毒性实验

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氧化低密度脂蛋白新基因OLRG-1的克隆及组织分布

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基础医学与临床 2000年第5期20卷 20-22页

作者：张可满陈保生薛红吴钢曾武威中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

用改进的差异显示反转录-PCR技术，从血管内皮细胞中获得了一个氧化低密度脂蛋白诱导差异表达的cDNA 片段。以此片段为探针，从人主动脉cDNA 文库中筛选了一个新的全长cDNA 。其核苷酸总长4137bp，编码642 个氨基酸的蛋白质。Northern... 详细信息

用改进的差异显示反转录-PCR技术，从血管内皮细胞中获得了一个氧化低密度脂蛋白诱导差异表达的cDNA 片段。以此片段为探针，从人主动脉cDNA 文库中筛选了一个新的全长cDNA 。其核苷酸总长4137bp，编码642 个氨基酸的蛋白质。Northern 印迹分析证实氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞后，该基因表达减低了3 倍，基因定名为OLRG-1。OLRG-1 为一多组织表达的基因，与人NS1-BP 基因高度同源。氧化低密度脂蛋白可能通过降低OLRG-1 的表达，影响mRNA 前体的剪接成熟，调控基因的表达。

关键词：血管内皮细胞 Qx-LDL 基因表达动脉粥样硬化

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应用mRNA差异显示技术研究精子发生中阶段特异性基因表达

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 38-42页

作者：赵明刘辉贤刘德瑜缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家计划生育委员会科研所

为进行精子发生过程中具有阶段特异性表达特征的基因研究，本文应用mRNA差异显示与曲细精管透光分期技术相结合的方法，对大鼠IX～XII期和XIII～Ⅰ期曲细精管的基因表达指纹图谱进行了比较。通过27组不同引物组合的差异PCR反应，共得到5... 详细信息

为进行精子发生过程中具有阶段特异性表达特征的基因研究，本文应用mRNA差异显示与曲细精管透光分期技术相结合的方法，对大鼠IX～XII期和XIII～Ⅰ期曲细精管的基因表达指纹图谱进行了比较。通过27组不同引物组合的差异PCR反应，共得到56个具有阶段特异性表达特征的cDNA片段。通过对它们中的12个进行序列测定和序列同源性分析，其中8个为代表未知基因的新的EST，另有一个与小鼠quaking基因具有高度的同源性，提示这一基因同样存在于大鼠曲轴精管中并呈阶段特异性表达。将所得序列送至GenBank，均获得新的序列编号。

关键词：差异显示精子发生阶段特异性基因 mRNA

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srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第4期16卷 443-447页

作者：罗寿青郑德先刘彦信李董饶青吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9... 详细信息

从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9.经过 2轮筛选 ,获得了纯化的重组病毒 ,再用重组病毒感染昆虫细胞 ,Western印迹检测证明 srh M- CSFR得到了表达 ,它是分泌到上清液中的糖基化蛋白 .Western印迹分析了不同时间点的 srh M- CSFR表达情况 ,结果表明 srh M- CSFR的表达在 96～ 1 2 0 h时达到最大 .srh M- CSFR的产量约为 1 mg/L,EIA法进行配基结合活性分析表明 ,srh M- CSFR与 M- CSF结合的解离常数为 5nmol/L.

关键词： srhM-CSFR 杆状病毒表达系统配基综合活性

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原发性高血压相关新基因的发现——D1S249位点与汉族EH相关联

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中国科学（C辑） 2000年第6期30卷 621-626页

作者：郑勇邱长春周文郁侯淑琴朱席琳郑华清赵立娟李国江中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京市房山区第一医院北京102400

原发性高血压（ｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＥＨ）被认为是多基因、多因素相互作用引起的复杂疾病。过去１０年中，高血压相关基因研究虽然已取得令人高兴的进展，但究竟有多少基因参与发病，及其之间的相互作用仍... 详细信息

原发性高血压（ｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＥＨ）被认为是多基因、多因素相互作用引起的复杂疾病。过去１０年中，高血压相关基因研究虽然已取得令人高兴的进展，但究竟有多少基因参与发病，及其之间的相互作用仍不清楚。以北京房山区高血压群体及家系为研究对象，应用全基因组扫描技术，通过病例－对照相关研究和９８对受累同胞对连锁分析，筛查鉴定与汉族原发性高血压相关联的新基因位点。病例－对照群体分析结果表明，位于１号染色体长臂１ｑ３２区的Ｄ１Ｓ２４９微卫星多态性位点与汉族原发性高血压相关联，χ＾２＝１４．６，Ｐ＝０．００２。该位点存在１２种等位基因，Ａ９等位基因（１８１ｂｐ）频率在高血压组较对照组明显升高，两组间频率为１３．６％ｖ．ｓ２．７％，χ＾２＝６．３０，Ｐ＝０．０１（ＯＲ＝４．５７，９５％ＣＩ＝１．

关键词：原发性高血压全基因组扫描 D1S249位点

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发展中的酵母杂交体系

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生命科学 2000年第1期12卷 34-35页

作者：张树民陈英碚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

酵母杂交体系包括双杂交、反向双杂交和三杂交等体系。双杂交作为一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用的方法；已经得到了广泛的应用。而反向双杂交和三杂交系统是在双杂交基础上发展起来的两种新技术。反向双杂交除了筛选突变株，以... 详细信息

酵母杂交体系包括双杂交、反向双杂交和三杂交等体系。双杂交作为一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用的方法；已经得到了广泛的应用。而反向双杂交和三杂交系统是在双杂交基础上发展起来的两种新技术。反向双杂交除了筛选突变株，以获取蛋白质结合的信息外，还能发现可导致已知蛋白质间特异相互作用发生解离的肽类或其他小分子物质，进一步分析蛋白质间作用位点、调控。三杂交系统则在蛋白质与小分子配基之间以及多种蛋白质之间相互作用中具有重要的应用价值。

关键词：反向双杂交系统三杂交系统蛋白质相互作用

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合成的GPI-Pr基因及其与PNH的关系

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国外医学（分子生物学分册） 2000年第2期22卷 109-111页

作者：刘海丽中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最... 详细信息

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最新研究进展。

关键词： GPI-锚 GPI-Pr PNH 血红蛋白系统

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红系NFE2反式作用因子

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国外医学（分子生物学分册） 2000年第3期22卷 158-162页

作者：徐冬冬刘德培中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室北京100005

NFE2是碱性亮氨酸拉链家族成员之一,由一个广泛表达的18kD亚基和一个组织限制表达的45kD亚基组成。NFE2是生血组织特异的反式作用因子。它通过α和β珠蛋白基因簇的位点控制区调节珠蛋白基因转录。而且对正常血小板的生成是必须的。

关键词：珠蛋白基因转录红系NFE2反式作用因子

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重组可溶性TRAIL在大肠杆菌中的表达、分离纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：刘彦信史娟郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的... 详细信息

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的30%左右,亲和层析纯化后,重组融合蛋白的纯度可达95%以上.其表现分子量约为22 kD,等电点为6.29,N-末端的氨基酸顺序与理论值相同.该融合蛋白在浓度为0.1～1 μg/mL时,能显著诱导所试全部7种肿瘤细胞株细胞凋亡,不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡;对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用,但不杀伤正常人外周血淋巴细胞;动物实验研究表明,能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长,而对正常小鼠无任何毒性.结论:该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡,具有重要临床应用前景.

关键词：肿瘤细胞凋亡分离纯化 TRAIL 大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属

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T淋巴细胞生与死的决定

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：郑德先刘彦信中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋... 详细信息

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋巴细胞的生存与死亡起不同的调节作用,其中任何一个或两个酪氨酸同时突变为苯丙氨酸均可影响T淋巴细胞激活,并阻断T细胞死亡的信号传递.T细胞接受抗CD3抗体刺激后,CD3ε-ITAM的Y170可募集Lck、3-磷酸肌醇激酶的P85α亚基和Shc,而Y181可募集ZAP70与其结合,从而介导不同的信号极联,决定细胞生(激活)或死(凋亡)的不同命运.方法和结果:在CD3ε介导的细胞凋亡过程中,凋亡基因Fas及其配体FasL的表达增加.进一步的研究发现,核转录因子Nur77在细胞激活时表达上调,在细胞接受持续刺激并出现凋亡时,Nur77的表达进一步增加.为阐明Fas、FasL和Nur77三者表达的相关性,建立了稳定表达Nur77的T细胞株,构建了Fas及FasL启动子驱动的荧光素酶报告基因表达载体并转染该细胞株,研究Nur77过量表达对Fas及FasL转录的影响,结果表明Nur77可以上调Fas的表达,但对FasL的表达没有影响.Nur77上调Fas的表达,从而增加了Fas+细胞和细胞凋亡.结论:Nur77具有决定细胞'生'(细胞激活)或'死'(细胞凋亡)的关键作用.

关键词：细胞凋亡信号传递

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