检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 852-854页

作者：阳洪波袁建刚彭小忠中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细... 详细信息

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细胞而非神经元来源的“异常”构象氨基酸作为一种新型神经递质 ,不仅更新了传统“神经递质”的定义。

关键词： D构象丝氨酸丝氨酸消旋酶 NMDA受体中枢神经系统功能

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A类清道夫受体I型的过量表达对转基因小鼠血脂水平的影响(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第2期35卷 117-121页

作者：高俊刘德培黄粤董文吉吴敏冯东晓梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所、医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所、医学分子生物学国家重点实验室

清道夫受体能结合带负电荷的大分子 ,特别是经过修饰的脂蛋白颗粒 ,与血浆脂质代谢有密切关系。为研究A类清道夫受体的过量表达对血脂代谢的影响 ,首先从小鼠巨噬细胞中经RT PCR获得鼠清道夫受体A类I型 (MSR AI)的表达序列 ,插入到含人... 详细信息

清道夫受体能结合带负电荷的大分子 ,特别是经过修饰的脂蛋白颗粒 ,与血浆脂质代谢有密切关系。为研究A类清道夫受体的过量表达对血脂代谢的影响 ,首先从小鼠巨噬细胞中经RT PCR获得鼠清道夫受体A类I型 (MSR AI)的表达序列 ,插入到含人清道夫受体基因增强子和金属硫蛋白启动子的真核表达载体中。选择Km×ICR杂交一代为实验小鼠 ,显微注射、移卵后 ,获得转基因小鼠 ,经PCR、Southern杂交鉴定 ,获得完整整合外源DNA序列的首建鼠 4只 ,拷贝数分别为 15、6、2和 4。Northern杂交实验显示A类清道夫受体基因主要在脾脏中表达 ;在金属锌诱导下 ,MSR AI表达有所增高 ,同时血清中甘油三酯水平显著升高 ,胆固醇浓度下降。结果表明A类清道夫受体的过量表达能显著影响血脂水平 ,具体机制需进一步研究。

关键词：清道夫受体金属硫蛋白启动子转基因小鼠过量表达血脂

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一种简便的染色质免疫沉淀法的建立

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生物化学与生物物理进展 2003年第4期30卷 634-638页

作者：傅湘辉刘德培辛立郝德龙董文吉黄粤梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的... 详细信息

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的染色质免疫沉淀法 ,并通过对诱导前后的MEL细胞中 β 珠蛋白基因簇组蛋白H3乙酰化的研究 ,证实了其可操作性 .结果表明 :高敏位点HS2和活跃基因 βmaj的启动子区域存在较高的组蛋白乙酰化水平 ,且诱导前后变化显著 ,而不活跃基因Ey的启动子区域则几乎检测不到组蛋白的乙酰化 ,且诱导前后无明显变化 .

关键词：染色质免疫沉淀法染色质 MEL细胞组蛋白乙酰化基因表达调节

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病毒载体与造血干细胞基因治疗

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Acta Genetica Sinica 2003年第4期30卷 383-388页

作者：董文吉祖振响刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干... 详细信息

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干细胞转导条件 ,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功 ;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体 ,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体。

关键词：造血干细胞反转录病毒载体慢病毒载体腺相关病毒载体基因治疗

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CD3ε和5-氟尿嘧啶在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P53的表达

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中华医学杂志 2003年第22期83卷 1962-1967页

作者：程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM... 详细信息

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM的TJK及T3JK细胞株。用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 /或 5 FU(2 5 μg/ml)刺激不同的T淋巴细胞诱导细胞凋亡 ,用噻唑蓝比色法检测细胞存活率 ,并计算细胞死亡率 ;用瞬时转染野生型或突变型P5 3表达质粒的方法和Western印迹检测P5 3蛋白质的表达 ,分析其在T淋巴细胞凋亡中的作用。结果　在CD3ε和 5 FU分别诱导T淋巴细胞凋亡过程中 ,均伴随着P5 3蛋白质表达增加 ;两者联合使用使T淋巴细胞凋亡和P5 3蛋白质表达显著增加 ;P5 3过表达可明显增加T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。结论　抗CD3ε抗体和 5 FU联合作用可显著提高P5 3蛋白质表达 ,两者在T淋巴细胞凋亡中具有协同效应。

关键词： CD3ε 5-氟尿嘧啶 T淋巴细胞凋亡协同作用 P53 表达单克隆抗体

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RSD-7的克隆及其在睾丸组织中的定位

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中国医学科学院学报 2003年第3期25卷 289-293,T002页

作者：张晓东苟大为缪时英张建超宗书东王琳芳中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 NationalFamilyPlanningResearchInstitute

目的分离、克隆精子发生相关基因,深入了解精子发生的分子机制。方法采用本组克隆的大鼠睾丸EST筛选cDNA文库、Northernblot、原核表达和纯化、抗体制备和免疫组化等技术。结果(1)获得1个新的全长cDNA序列,命名为RSD-7。全长1238bp,编码... 详细信息

目的分离、克隆精子发生相关基因,深入了解精子发生的分子机制。方法采用本组克隆的大鼠睾丸EST筛选cDNA文库、Northernblot、原核表达和纯化、抗体制备和免疫组化等技术。结果(1)获得1个新的全长cDNA序列,命名为RSD-7。全长1238bp,编码232个氨基酸,GenBank接收号为AF315467。序列分析显示,RSD-7基因编码蛋白质含有1个Ubiquitin-like结构域。(2)Northernblot结果显示,在8种成鼠组织中,RSD-7基因仅在睾丸组织中有明显表达。不同发育天龄的大鼠睾丸组织Northernblot结果显示,出生后30d的大鼠RSD-7基因开始表达,一直到120d仍有表达。(3)RSD-7cDNA在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了GST-RSD-7融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗RSD-7蛋白的多克隆抗体。(4)通过免疫组织化学方法,RSD-7蛋白定位于Sertoli细胞胞浆和质膜上。结论初步分析了RSD-7基因的表达特征并制备了抗RSD-7多克隆抗体,为进一步研究RSD-7蛋白在精子发生过程中的功能提供了条件。

关键词：精子发生基因克隆 RSD-7cDNA Sertoli细胞

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多基因疾病相关基因定位的研究策略

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中国科学（C辑） 2003年第3期33卷 193-201页

作者：刘天承邱长春周文郁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

多基因疾病既是影响世界上多数人生命健康和生活质量的重要因素,也是长期困惑广大科研人员的难题之一。对多篇相关文献进行综合比较的结果说明:研究样本、遗传标记的选择和遗传统计方法是多基因疾病研究中必须优先考虑的三个方面,它直... 详细信息

多基因疾病既是影响世界上多数人生命健康和生活质量的重要因素,也是长期困惑广大科研人员的难题之一。对多篇相关文献进行综合比较的结果说明:研究样本、遗传标记的选择和遗传统计方法是多基因疾病研究中必须优先考虑的三个方面,它直接决定了实验设计的可能性和结果的合理性。其中,样本的选择尤为重要,不同群体的样本在多基因疾病相关基因定位的不同阶段所起的作用不同,有的适合于疾病相关基因初步定位,有的适合于精细定位和疾病的群体关联分析。遗传标记的选择和遗传统计方法是由实验目的、样本特点和资料的完整情况等决定的。对不同的统计结果应采用适当的标准,以排除假阳性。

关键词：多基因疾病基因定位研究策略样本选择遗传标记遗传统计方法群体关联分析

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麦芽酚对活性氧损伤人神经瘤细胞的保护作用

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第5期19卷 677-681页

作者：王健杨洋许彩民潘华珍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

以人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)为材料 ,使用过氧化氢 (H2 O2 )产生过量活性氧诱导SH SY5Y细胞株进入氧化应激状态 .研究麦芽酚对过量活性氧造成的SH SY5Y细胞株氧化损伤的保护作用 .分析活性氧对细胞膜蛋白和DNA的损伤 ,细胞线粒体功能变... 详细信息

以人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)为材料 ,使用过氧化氢 (H2 O2 )产生过量活性氧诱导SH SY5Y细胞株进入氧化应激状态 .研究麦芽酚对过量活性氧造成的SH SY5Y细胞株氧化损伤的保护作用 .分析活性氧对细胞膜蛋白和DNA的损伤 ,细胞线粒体功能变化 ,白介素 6 (IL 6 )的表达变化以及细胞核因子κB(NF κB)的激活 .结果显示 ,2mmol L麦芽酚保护细胞 2h后 ,对细胞膜蛋白和DNA的损伤均有明显的保护作用 ,减少了膜蛋白的氧化和细胞DNA片段化的形成 ,细胞线粒体功能损伤减小 ,细胞表达的IL 6减少 ,被激活的NF κB水平同时降低 .结果证明 ,麦芽酚可以有效保护活性氧对神经细胞的氧化损伤。

关键词：麦芽酚活性氧损伤人神经瘤细胞保护作用

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免疫细胞死亡受体的信号传导途径及其调节

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中国免疫学杂志 2003年第8期19卷 519-523页

作者：郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

死亡受体(Death Receptor)是肿瘤坏死因子受体(TNFR,Tumor Necrosis Factor Receptor)基因超家族的成员,具有富含Cys的胞外结构域[1]和胞内死亡结构域(DD,Death Domain).死亡结构域具有诱导细胞凋亡的功能,有时也可抑制细胞凋亡或介导... 详细信息

死亡受体(Death Receptor)是肿瘤坏死因子受体(TNFR,Tumor Necrosis Factor Receptor)基因超家族的成员,具有富含Cys的胞外结构域[1]和胞内死亡结构域(DD,Death Domain).死亡结构域具有诱导细胞凋亡的功能,有时也可抑制细胞凋亡或介导其它生物学功能.死亡受体包括:CD95(也称Fas或Apol)、TNFR1(也称p55或CD120a)[1,2]、DR3(Death Receptor 3)(Apo3,WSL-1,TRAMP,LARD)[3]、DR4[4]和DR5(也称Apo2-R,TRAIL-R2,TRICK 2,或KILLER)[5]、p75神经生长因子受体(NGFR)[6]和禽源的CAR1[7]等.它们的配体依次分别是:CD95、TNFR1、DR3,DR4和DR5的配体分别是CD95L、TNF、淋巴毒素α、Apo3L(也称TWEAK)、Apo2L/TRAIL(TNF-related Apoptosis Inducing Ligand).CAR1的配体至今还没有发现.……

关键词：免疫细胞死亡受体信号传导调节

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氯化钠密度梯度离心法制备用于显微注射的外源DNA片段

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遗传 2003年第5期25卷 587-590页

作者：刘立仁赵华路张俊武中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

DNA显微注射是生产转基因动物最可靠和最常使用的一种方法,外源DNA的纯度对显微注射的成功起着至关重要的作用。本文介绍用氯化钠密度梯度离心的方法制备用于显微注射的外源DNA片段。与传统的琼脂糖凝胶回收的方法相比较,用此方法制备... 详细信息

DNA显微注射是生产转基因动物最可靠和最常使用的一种方法,外源DNA的纯度对显微注射的成功起着至关重要的作用。本文介绍用氯化钠密度梯度离心的方法制备用于显微注射的外源DNA片段。与传统的琼脂糖凝胶回收的方法相比较,用此方法制备的外源DNA片段对小鼠受精卵进行显微注射后,受卵体母鼠的胚胎存活率,以及子代小鼠的外源基因整合率均有明显的提高。这一方法可为进一步提高转基因动物的成功率,提供方法学上的参考。

关键词：显微注射氯化钠密度梯度离心胚胎存活率外源基因整合率

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