检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2007年第6期27卷 674-679页

作者：师珍艳阴彬魏群彭小忠北京师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室北京100875 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的筛选出抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体。方法利用原核表达所获得的SARS病毒N蛋白,筛选人源单链抗体噬菌体展示库,经特异性的检测,以期得到抗SARS-CoV病毒N蛋白的特异单链抗体。结果获得了8个抗SARS病毒N蛋白的候选克隆。经测序,获... 详细信息

目的筛选出抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体。方法利用原核表达所获得的SARS病毒N蛋白,筛选人源单链抗体噬菌体展示库,经特异性的检测,以期得到抗SARS-CoV病毒N蛋白的特异单链抗体。结果获得了8个抗SARS病毒N蛋白的候选克隆。经测序,获得了编码抗体可变区的基因序列,并进行了原核表达。结论筛选得到的抗SARS-CoV病毒N蛋白单链抗体具有高度的特异性,可以用作临床实验或研究SARS病毒过程中快速检测SARSN蛋白或SARS病毒粒子的候选抗体。

关键词： SARS-CoV病毒 N蛋白人源单链抗体噬菌体展示

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人乳头瘤病毒16型晚期基因L1在原核细胞的表达及免疫效果观察

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中国妇幼保健 2007年第35期22卷 5028-5032页

作者：刘朝奇许雪梅徐建青李昆司静懿刘世德三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443003 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

目的：人乳头瘤病毒16型（HPV16）疫苗的研制可望防治宫颈癌的发生、发展，本实验从中国感染人群中克隆L1基因，期望制备中国人群的HPV16的预防性疫苗。方法：从HPV16阳性的尖锐湿疣临床标本中，PCR扩增HPV16L1基因，克隆、测序，并在... 详细信息

目的：人乳头瘤病毒16型（HPV16）疫苗的研制可望防治宫颈癌的发生、发展，本实验从中国感染人群中克隆L1基因，期望制备中国人群的HPV16的预防性疫苗。方法：从HPV16阳性的尖锐湿疣临床标本中，PCR扩增HPV16L1基因，克隆、测序，并在原核细胞表达L1蛋白，纯化蛋白经过复性后，电镜观察病毒样颗粒（VLP），VLP免疫动物观察抗体产生情况。结果：克隆的HPV16L1，测序结果发现有4个特异性突变位点是nt6240的C-G、nt6432 A→G、nt6901-03及nt6951-53。将HPV16L1基因克隆到原核表达载体pET-28a（＋），高表达的蛋白应用蛋白转印证实是HPV16L1蛋白，纯化的蛋白复性后可以自组装VLP，免疫动物产生高滴度的抗体。结论：从临床标本克隆表达了HPVl6L1基因，可以在原核细胞高表达及体外组装VLP，并且具有良好的免疫原性。为研制HPV16预防性疫苗探索一条易于推广而经济的制备途径。

关键词： HPVl6 L1基因蛋白表达免疫

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JDP2在神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分化中的作用

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科学通报 2007年第24期52卷 2866-2870页

作者：沈金花吴萌吴宁华张业沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 Division of Hematology & Oncology Department of MedicineCase Western Reserve UniversityClevelandOhio 44106USA

c-Jun二聚化蛋白(JDP2)是AP-1家族成员,参与基因的转录抑制.为探讨JDP2在神经母细胞瘤分化过程中的作用,构建了稳定整合有JDP2全长编码区的SH-SY5Y细胞株(SY5Y-JDP2).实验结果显示,JDP2能促进SH-SY5Y细胞的分化.与对照细胞相比,SY5Y-JDP... 详细信息

c-Jun二聚化蛋白(JDP2)是AP-1家族成员,参与基因的转录抑制.为探讨JDP2在神经母细胞瘤分化过程中的作用,构建了稳定整合有JDP2全长编码区的SH-SY5Y细胞株(SY5Y-JDP2).实验结果显示,JDP2能促进SH-SY5Y细胞的分化.与对照细胞相比,SY5Y-JDP2细胞在S期比例降低,生长速率迟缓,并且表现p21高水平表达,在分化过程中cyclin D1降低.由此可见,JDP2对生长的抑制作用可能是SH-SY5Y细胞撤出细胞周期进入分化的主要原因.

关键词： JDP2 SH-SY5Y细胞全反式维甲酸(RA) 分化 p21

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北方汉族人群醛固酮合成酶基因多态性与高血压的关系

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 329-335页

作者：牛文全王建炳李素洁周文郁赵景波邱长春中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室哈尔滨150086 黑龙江省电力医院体检科哈尔滨150081

目的探讨北方汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区C-344T和第三外显子K173R多态性位点与原发性高血压的关系。方法在哈尔滨报社人群中分别选取182例原发性高血压患者和189例正常对照者进行病例-对照研究,采用多聚酶链式反应/限... 详细信息

目的探讨北方汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区C-344T和第三外显子K173R多态性位点与原发性高血压的关系。方法在哈尔滨报社人群中分别选取182例原发性高血压患者和189例正常对照者进行病例-对照研究,采用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测C-344T和K173R的基因型。结果各位点基因型分布在男性和女性组中均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。C-344T位点的基因型和等位基因频率以及K173R的等位基因频率在整个群体和按性别分组后亚群体的分布在高血压组和对照组间差异均没有显著性(P≥0.05)。而K173R位点的基因型频率在整个群体中具有边缘统计学意义(P=0.0500),且在女性组中更为明显(P=0.0038),并以显性方式遗传,这种遗传方式在对混杂因素进行校正后更加明显。同时K173R与女性的收缩压显著相关。结论在北方汉族人群中,CYP11B2 K173R多态性位点与女性高血压的易感相关联。

关键词：原发性高血压醛固酮合成酶基因基因多态性

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促红细胞生成素及其类似物研究现状

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医学研究杂志 2007年第10期36卷 5-7页

作者：韦冬陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室/中国协和医科大学基础医学院北京100005

重组人促红细胞生成素(recombinant humanerythropoietin,rhEpo)已经广泛应用于临床上对贫血的治疗。新近又发现其具有相当的血管、肌肉、神经保护作用。其治疗作用广泛应用于临床后,仍有许多的局限性不良反应。随着有关研究的深入,一... 详细信息

重组人促红细胞生成素(recombinant humanerythropoietin,rhEpo)已经广泛应用于临床上对贫血的治疗。新近又发现其具有相当的血管、肌肉、神经保护作用。其治疗作用广泛应用于临床后,仍有许多的局限性不良反应。随着有关研究的深入,一些新产品、新方法逐渐问世,有望更好地解除不良反应而充分发挥其临床治疗作用。[第一段]

关键词：重组人促红细胞生成素类似物神经保护作用治疗作用不良反应临床

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琥珀酰辅酶A转移酶的表达纯化及抗体制备

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生物技术通讯 2007年第3期18卷 426-429页

作者：张勤朱大海中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院生化与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的:琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)是酮体代谢过程中的关键限速酶,此酶缺陷多由SCOT基因突变引起,患者多有酮症酸中毒表现。为了进一步研究SCOT的功能,采用原核表达系统表达并纯化重组SCOT,制备SCOT多克隆抗体。方法:选择蛋鸡、肉鸡模式生... 详细信息

目的:琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)是酮体代谢过程中的关键限速酶,此酶缺陷多由SCOT基因突变引起,患者多有酮症酸中毒表现。为了进一步研究SCOT的功能,采用原核表达系统表达并纯化重组SCOT,制备SCOT多克隆抗体。方法:选择蛋鸡、肉鸡模式生物为研究对象,通过生物信息学对其抗原性和属间同源性进行分析,通过RT-PCR从鸡的骨骼肌cDNA中扩增了SCOT基因N端半长片段,克隆到表达载体pET28b中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化重组SCOT;用纯化的重组SCOT免疫小鼠后得到多克隆抗体。结果:Western印迹表明,制备的SCOT抗体具有较高的特异性,可特异性识别鸡的SCOT蛋白,同时可特异性识别小鼠和人的相应SCOT蛋白。结论:SCOT多克隆抗体的制备为后续在鸡、鼠和人中研究SCOT基因提供基础。

关键词：琥珀酰辅酶A转移酶原核表达抗体制备 westem印迹

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树鼩脂蛋白脂肪酶的cDNA克隆、组织分布及活性测定

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中国动脉硬化杂志 2007年第11期15卷 801-804页

作者：周冰曾武威孙国涛刘惠荣吴钢薛红陈保生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

目的了解不易感动脉粥样硬化动物树鼠句的脂蛋白脂肪酶的结构和活性特点,并与其它种属比较,探讨脂蛋白脂肪酶在树鼠句独特脂代谢中的作用。方法以树鼠句脂肪细胞mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术获得树鼠句脂蛋白脂... 详细信息

目的了解不易感动脉粥样硬化动物树鼠句的脂蛋白脂肪酶的结构和活性特点,并与其它种属比较,探讨脂蛋白脂肪酶在树鼠句独特脂代谢中的作用。方法以树鼠句脂肪细胞mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术获得树鼠句脂蛋白脂肪酶的cDNA序列并推导出其氨基酸序列;实时定量PCR方法检测树鼠句脂蛋白脂肪酶mRNA在各组织中的分布;真核表达树鼠句和人脂蛋白脂肪酶蛋白,放射性同位素法测定二者的活性并比较。结果树鼠句脂蛋白脂肪酶cDNA序列全长为3293bp,其中编码区1437bp,编码20个氨基酸的信号肽和458个氨基酸的成熟蛋白,该成熟蛋白N-端比人脂蛋白脂肪酶多10个氨基酸。树鼠句脂蛋白脂肪酶与其它哺乳类动物的氨基酸序列同源性大于90%,功能域高度保守。树鼠句脂蛋白脂肪酶的组织表达谱比较广泛,在心肌和脂肪组织中大量表达,但在骨骼肌中未检测到,却在肝脏中有中低水平表达,与人脂蛋白脂肪酶在这两种组织中的表达相反。活性测定结果显示,树鼠句脂蛋白脂肪酶活性显著高于人(7.67倍),这与测定的树鼠句血浆低甘油三酯水平相符。结论树鼠句的高活性脂蛋白脂肪酶可能是其血浆低水平甘油三酯的主要原因。

关键词：分子生物学脂蛋白脂肪酶组织分布酶活性甘油三酯树树鼩

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树鼠句膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1cDNA和蛋白质结构分析及其组织表达

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中国动脉硬化杂志 2007年第9期15卷 653-656页

作者：周冰曾武威刘惠荣孙国涛吴钢薛红陈保生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

目的获得不易感动脉粥样硬化动物树鼠句的膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1的cDNA和蛋白质序列,鉴定其组织分布,探讨其是否参与树鼠句独特的高密度脂蛋白代谢。方法以树鼠句肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得树鼠... 详细信息

目的获得不易感动脉粥样硬化动物树鼠句的膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1的cDNA和蛋白质序列,鉴定其组织分布,探讨其是否参与树鼠句独特的高密度脂蛋白代谢。方法以树鼠句肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得树鼠句ATP结合盒转运体A1 cDNA序列并推导出其氨基酸序列,应用实时聚合酶链反应技术分析树鼠句ATP结合盒转运体A1 mRNA在各组织中的分布情况。结果获得的树鼠句ATP结合盒转运体A1 cDNA序列全长为7 762 bp,其中开放阅读框架6 786 bp,编码2 261个氨基酸的蛋白。该蛋白与人ATP结合盒转运体A1的长度相同,二者在氨基酸水平上高度同源(95%)。多组织表达谱显示树鼠句ATP结合盒转运体A1在多种组织中广泛表达,其中表达量最高的依次为肺脏、肝脏、肾脏和脾脏,这与人和小鼠ATP结合盒转运体A1在肝中高表达而在肺和脾中低表达的分布有很大差异。结论树鼠句ATP结合盒转运体A1组织表达谱的特点有可能增加其在体内的浓度和数量,从而可能间接增加高密度脂蛋白的合成。

关键词：分子生物学膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1 蛋白质序列组织分布高密度脂蛋白树[鼠句]

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颗粒酶B:有力的细胞免疫杀伤因子

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医学分子生物学杂志 2007年第2期4卷 121-124页

作者：李一叶卢圣栋中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

丝氨酸蛋白酶家族成员颗粒酶B是细胞毒淋巴细胞介导的颗粒胞吐免疫效应中有力的杀伤因子。近年来,颗粒酶B与穿孔素协同作用的靶细胞摄取机制受到质疑,“受体内化”及“静电交换”等新模型被相继提出。颗粒酶B在靶细胞内能够诱导caspase... 详细信息

丝氨酸蛋白酶家族成员颗粒酶B是细胞毒淋巴细胞介导的颗粒胞吐免疫效应中有力的杀伤因子。近年来,颗粒酶B与穿孔素协同作用的靶细胞摄取机制受到质疑,“受体内化”及“静电交换”等新模型被相继提出。颗粒酶B在靶细胞内能够诱导caspase依赖及非依赖性的凋亡,还能直接作用于死亡底物发挥细胞毒作用,同时具有基质重塑等重要的细胞外功能。颗粒酶B与自身免疫疾病及抗病毒感染密切相关,在恶性肿瘤细胞杀伤方面的应用价值正日益受到关注。

关键词：颗粒酶B 细胞毒淋巴细胞凋亡

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MicroRNA参与的调控网络

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医学分子生物学杂志 2007年第4期4卷 367-370页

作者：熊霞辉陈梅红中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

成熟的microRNA(miRNA)是一类长约18～24个核苷酸、内源性非编码小RNA分子,它在体内下调靶基因的表达。迄今在不同物种中已发现的miRNA达上千种。miRNA的发现为基因表达调控研究打开了新的窗口。目前研究者不仅关注miRNA在发育、分化、... 详细信息

成熟的microRNA(miRNA)是一类长约18～24个核苷酸、内源性非编码小RNA分子,它在体内下调靶基因的表达。迄今在不同物种中已发现的miRNA达上千种。miRNA的发现为基因表达调控研究打开了新的窗口。目前研究者不仅关注miRNA在发育、分化、生长和代谢等诸多生物过程中的作用,而且开始进一步探寻其发挥作用的分子机理,以期重新描绘基因表达调控网络图。文章综述了miRNA对其靶基因的调控特点,介绍了miRNA自身调控研究的最新进展,从而有助于理解miRNA参与的基因表达调控网络的复杂性。

关键词： microRNA 调控

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