检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2024年第11期19卷 1300-1304,1311页

作者：胡明娜韩少伟张勇李飞新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830011 桂林医学院附属医院广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室桂林医学院附属医院广西神经鞘脂代谢相关疾病基础研究重点实验室

目的本研究旨在通过原核表达系统表达和纯化乙型肝炎病毒(HBV)相关抗原PreS1的二聚体蛋白2PreS1,并评估其在小鼠体内的免疫效果。方法设计并构建pET28a-his-2PreS1载体及对照载体pET28a-his-PreS1,在大肠埃希菌原核表达系统分别表达重... 详细信息

目的本研究旨在通过原核表达系统表达和纯化乙型肝炎病毒(HBV)相关抗原PreS1的二聚体蛋白2PreS1,并评估其在小鼠体内的免疫效果。方法设计并构建pET28a-his-2PreS1载体及对照载体pET28a-his-PreS1,在大肠埃希菌原核表达系统分别表达重组蛋白2PreS1及PreS1。接着通过镍柱对目的蛋白纯化,利用考马斯亮蓝染色和Western blot技术对目标蛋白进行鉴定。随后,分别将纯化的2PreS1蛋白以及PreS1蛋白与弗式或CpG佐剂配制成疫苗,接种至8周龄的C57小鼠中,在初次免疫及两周后进行加强免疫。并于初次免疫后第21 d断尾采血,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)技术测定小鼠血清中的PreS1抗体水平。结果在37℃220 rpm时用1 mmol/L IPTG持续诱导4 h为PreS1蛋白的最优表达条件,且在洗脱液中咪唑浓度为500 mmol/L时PreS1蛋白被洗脱;而2PreS1蛋白则在16℃200 rpm时用1 mmol/L IPTG低温过夜诱导表达得最为理想,且2PreS1蛋白在咪唑浓度为100 mmol/L被洗脱。通过ELISA分析,发现无论是采用弗式还是CpG作为佐剂,接种2PreS1疫苗的小鼠其血清中的PreS1抗体水平均显著高于仅接种PreS1疫苗的小鼠,且2PreS1与弗式佐剂配合使用时能诱导出比与CpG佐剂配合时更强烈的免疫反应。结论本研究不仅成功地表达和纯化了PreS1及其二聚体蛋白2PreS1,而且还通过在小鼠中的免疫应答实验证明了2PreS1相比单体PreS1蛋白具有更高的免疫原性,这表明了2PreS1作为疫苗成分的免疫效果更为优越。

关键词：乙型肝炎病毒(HBV) PreS1 2PreS1

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低强度脉冲超声缓解早发性卵巢功能不全大鼠卵巢炎症的研究

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中国超声医学杂志 2024年第4期40卷 469-473页

作者：邓娟肖鑫方伍柳李君粉贺思程周艺情王嫣重庆医科大学超声医学工程国家重点实验室生物医学工程学院

目的探究低强度脉冲超声(LIPUS)治疗早发性卵巢功能不全(POI)大鼠对其卵巢组织炎症的影响。方法将45只SD大鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)以及LIPUS组(n=15)。LIPUS辐照大鼠卵巢15 d后，采用RNA测序筛选治疗前后的差异基因并... 详细信息

目的探究低强度脉冲超声(LIPUS)治疗早发性卵巢功能不全(POI)大鼠对其卵巢组织炎症的影响。方法将45只SD大鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)以及LIPUS组(n=15)。LIPUS辐照大鼠卵巢15 d后，采用RNA测序筛选治疗前后的差异基因并富集出相关信号通路；蛋白质免疫印迹检测(Western blot)与实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组大鼠卵巢组织中相关炎症因子的表达水平。结果 LIPUS治疗前后差异基因显著富集到了IL-17、NK-κB以及Chemokine信号通路之上；与对照组相比，模型组IL-1β、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-17、S00A8、S00A9、CXCL1、CXCL3等与炎症相关因子蛋白及mRNA表达水平均显著增高(P<0.05),而LIPUS组相较于模型组均显著降低(P<0.05)。结论 LIPUS能抑制卵巢组织中炎症因子的表达，调控趋化因子、IL-17与NK-κB信号通路，从而修复卵巢组织结构与功能。

关键词：低强度脉冲超声早发性卵巢功能不全炎症

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唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素在细菌感染性疾病中的研究进展

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中国人兽共患病学报 2024年第8期40卷 790-795页

作者：何月月朱玥洁樊羿辰殷郑伟史娟张峰波丁剑冰新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830011

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins,Siglecs)在大多数白细胞上表达,并且在免疫细胞信号传导中起关键作用。最近的研究表明,许多细菌通过唾液酸(sialic acid,Sia)与Siglecs的相互作用来调... 详细信息

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins,Siglecs)在大多数白细胞上表达,并且在免疫细胞信号传导中起关键作用。最近的研究表明,许多细菌通过唾液酸(sialic acid,Sia)与Siglecs的相互作用来调控宿主免疫应答,影响疾病的发生发展。深入了解细菌致病机制对于破译潜在的有效治疗靶点和帮助人类管理细菌感染性疾病十分重要。本文就Siglecs的结构、生物学功能以及其在细菌感染性疾病中的研究进展作简要综述。

关键词： Siglecs 细菌感染免疫逃逸唾液酸

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结核分枝杆菌echA1蛋白的结构特征和抗原性分析

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中国人兽共患病学报 2023年第6期39卷 556-562,569页

作者：张娇马国荣朱娜杨玉荣宁夏医科大学基础医学院病原生物与免疫学系银川750004

目的对结核分枝杆菌Rv0222基因及其编码蛋白echA1进行生物信息学分析,制备该蛋白的多克隆抗体,为进一步研究其功能、筛选候选治疗靶点和免疫诊断提供基础。方法利用TMHMM、SignalP6.0、Net Phos3.1、Protpapram、Protscale和sopma等在... 详细信息

目的对结核分枝杆菌Rv0222基因及其编码蛋白echA1进行生物信息学分析,制备该蛋白的多克隆抗体,为进一步研究其功能、筛选候选治疗靶点和免疫诊断提供基础。方法利用TMHMM、SignalP6.0、Net Phos3.1、Protpapram、Protscale和sopma等在线分析软件分析echA1蛋白的理化性质等信息。抗原表位则利用IEDB网站中的在线分析软件和NetCTL-1.2进行分析。利用分子克隆技术构建pET-30a-Rv0222表达载体并转化入*** BL21(DE3)中,IPTG诱导echA1蛋白表达后经His亲和层析柱纯化并免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。收集结核病患者及健康人血清,ELISA法检测样本中特异性抗体水平。结果Rv0222基因编码的echA1蛋白由262个氨基酸组成,为一种亲脂性蛋白。echA1蛋白二级结构包括α-螺旋(43.51%)、β-折叠(13.74%)、β-转角(9.92%)和无规则卷曲(32.82%)。该蛋白无跨膜区和信号肽,含16个磷酸化位点,并可与fadB、fadB2、fadE1、和accD1等10多种蛋白发生相互作用。表位预测分析显示该蛋白含有多个B细胞表位和T细胞表位。纯化的echA1蛋白可有效引起小鼠的免疫应答,获得的多克隆抗体具有良好的抗原特异性,效价在102400和204800之间。结核病患者抗体检测敏感度为64.6%,健康人抗体检测特异度为94.6%,结核病患者与健康者相比,差异具有统计学意义(t=10.66,P<0.0001)。结论EchA1蛋白为一种稳定性的亲脂性蛋白,含有多个潜在优势B和T细胞表位,并可以与多个脂肪代谢相关蛋白相互作用;制备的多克隆抗体具有很高的抗原特异性;该蛋白在结核病血清学诊断方面具有一定应用价值。

关键词：结核分枝杆菌生物信息学原核表达多克隆抗体 echA1

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酿酒酵母细胞cdc50基因敲除及其转录组测序分析

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中国酿造 2024年第4期43卷 123-128页

作者：李鑫玉唐秀琴李子航刘佳王琦邹伟昆明医科大学公共卫生学院云南昆明650500 昆明医科大学基础医学院云南昆明650500

为探讨cdc50基因对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞功能的影响,该研究以PYM14质粒为模板,采用醋酸锂转化法对野生型酿酒酵母BY4742进行cdc50基因敲除,测定突变菌株Δcdc50生长情况,分别对野生型酵母菌株BY4742和突变菌株Δcdc5... 详细信息

为探讨cdc50基因对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞功能的影响,该研究以PYM14质粒为模板,采用醋酸锂转化法对野生型酿酒酵母BY4742进行cdc50基因敲除,测定突变菌株Δcdc50生长情况,分别对野生型酵母菌株BY4742和突变菌株Δcdc50进行转录组分析,筛选二者差异表达基因(DEGs),并对其进行基因本体论(GO)、京都基因与基因百科全书(KEGG)富集分析。结果表明,成功构建酿酒酵母cdc50基因缺失菌株Δcdc50,cdc50基因缺失后酵母细胞形态由圆形变为杆状,培养12 h后菌株Δcdc50相对生长率为1.98%,较野生型酵母BY4742菌株显著降低(P<0.05)。与野生型酵母菌株BY4742相比,菌株Δcdc50的DEGs共有581个,其中271个基因上调,310个基因下调。GO富集分析表明,DEGs主要富集在生物学过程中的氧化还原过程等,分子功能中的氧化还原酶活性、辅助因子结合和跨膜转运体活性等。KEGG富集分析表明,DEGs主要富集于糖酵解/糖异生、脂肪酸降解和碳代谢通路等。

关键词：酿酒酵母 cdc50基因敲除转录组差异表达基因

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棘球蚴感染极化巨噬细胞调控免疫性血小板减少症(ITP)的机制研究

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中国病原生物学杂志 2023年第9期18卷 1058-1064页

作者：张星星张文宝焦红杰艾柯代·卡得齐文静武娟宋传龙李军严媚新疆医科大学第一附属医院新疆乌鲁木齐830054 中亚高发病成因与防治国家重点实验室临床医学研究院新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学基础医学院

目的探讨细粒棘球蚴感染早期和晚期巨噬细胞极化对免疫性血小板减少症(ITP)的调节作用。方法将BALB/c小鼠分为ITP组和空白对照组。ITP组经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立BALB/c小鼠早期和晚期感染模型,并根据感染剂量和时间分为低剂量感染4... 详细信息

目的探讨细粒棘球蚴感染早期和晚期巨噬细胞极化对免疫性血小板减少症(ITP)的调节作用。方法将BALB/c小鼠分为ITP组和空白对照组。ITP组经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立BALB/c小鼠早期和晚期感染模型,并根据感染剂量和时间分为低剂量感染4周/ITP组(Eg-L-4w/ITP),高剂量感染4周/ITP组(Eg-H-4w/ITP),高剂量感染4周/con组(Eg-H-4w/con)和高剂量感染12周/ITP组(Eg-H-12w/ITP)。分别于感染第4周和12周腹腔注射Anti-CD41抗体,对照组腹腔注射PBS。同时尾静脉连续采血5 d。将小鼠处死,取肝组织,HE染色后观察病理变化;通过流式细胞术检测小鼠脾脏、外周血F4/80^(+)CD11c^(+)M1和F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞以及T、B淋巴细胞及其亚型细胞比例。结果感染组小鼠肝组织出现棘球蚴感染寄生灶,感染灶周围炎症细胞浸润。ITP组小鼠注射致病抗体后血小板数显著减少,ITP模型建立成功。血常规结果显示,细粒棘球蚴感染小鼠4周ITP模型小鼠外周血血小板未明显增多,感染12周ITP模型小鼠血小板数增多。提示细粒棘球蚴感染小鼠晚期状态对ITP小鼠模型具有调节保护作用。流式细胞术检测低、高剂量感染4周组小鼠脾脏和外周血F4/80^(+)CD11c^(+)M1型巨噬细胞比例分别为(11.12±1.24)%、(12.54±1.73)%和(6.11±0.66)%、(6.34±0.79)%,与ITP组、对照组的(6.90±1.48)%、(7.30±1.20)%和(4.40±0.49)%、(2.78±0.56)%比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。低、高剂量感染4周组脾脏和外周血F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞以及B、T淋巴细胞比例均高于ITP组和对照组(均P<0.05)。结论细粒棘球蚴感染早期的F4/80^(+)CD11c^(+)M1型巨噬细胞和感染晚期的F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞均对免疫性血小板减少症(ITP)有调节作用。

关键词： ITP 细粒棘球蚴感染巨噬细胞极化小鼠模型

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索马鲁肽治疗阿尔茨海默病的潜在靶点:沉默信息调节因子1

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3235-3239页

作者：柴世凡李欣儒叶育采孙俊丽蔡红艳王昭君山西医科大学基础医学院生理学系细胞生理学教育部重点实验室细胞生理学山西省重点实验室山西省太原市030000 山西医科大学麻醉学院山西省太原市030000 山西医科大学基础医学院微生物与免疫教研室山西省太原市030000

背景:研究发现胰高血糖素样肽1及其类似物具有显著的神经保护作用,并且已有部分药物应用到阿尔茨海默病临床三期研究阶段,然而其发挥神经保护作用的具体机制尚不明确,有待进一步探讨阐明。目的:拟通过生物信息学和网络药理学分析方法筛... 详细信息

背景:研究发现胰高血糖素样肽1及其类似物具有显著的神经保护作用,并且已有部分药物应用到阿尔茨海默病临床三期研究阶段,然而其发挥神经保护作用的具体机制尚不明确,有待进一步探讨阐明。目的:拟通过生物信息学和网络药理学分析方法筛选出阿尔茨海默病发病机制的相关基因,以及索马鲁肽(一种胰高血糖素样肽1受体激动剂)治疗阿尔茨海默病的相关靶点,对两者进行综合分析挑选出潜在靶点基因,并在细胞水平加以验证。方法:利用DisGeNET数据库筛选出阿尔茨海默病患者与健康人群的差异基因,利用PubChem在线数据库得到索马鲁肽的化学结构式和2D结构图,利用DAVID在线数据库进行GO/KEGG富集分析,利用STRING数据库进行蛋白互作网络的构建,利用HPA数据库判断目的蛋白在人体各组织中的分布特点,最后使用蛋白印迹技术和免疫荧光技术检测索马鲁肽干预HT22细胞之后的蛋白表达情况。结果与结论:①利用DisGeNET数据库内数据得到3374个阿尔茨海默病患者与健康人群的差异基因,同时获得索马鲁肽潜在药物的101个靶基因,取两者交集得到23个相关基因;结合蛋白互作网络从中筛选出10个关键基因,分别是沉默信息调节因子1(SIRT1)、CASP9、CCND1、CASP1、KEAP1、DLG4、CASP4、GRB2、GRIA1、EDNRA;②GO基因功能分析显示关键基因主要富集在:半胱氨酸型内肽酶的正向调节活动,蛋白溶解的正向调节,半胱氨酸型内肽酶的正向调节,涉及凋亡活动过程的细胞质部分,AMPA谷氨酸受体复合物,炎症复合物,CARD结构域结合,半胱氨酸型内肽酶活性,半胱氨酸型内肽酶活性参与凋亡过程;KEGG信号通路分析结果主要为:结直肠癌,非小细胞癌,子宫内膜癌,上述均与免疫浸润、炎症、自噬凋亡相关;此外,根据关键基因的关联度排名及在HPA在线数据库不同组织中的分布情况,挑选出最显著的差异基因为SIRT1;③细胞实验显示,SIRT1蛋白表达在β-淀粉样蛋白1-42干预后的HT22细胞中显著下调,而经过索马鲁肽处理后明显上升;④结果显示,SIRT1可能是索马鲁肽治疗阿尔茨海默病的靶点基因。

关键词： DisGeNet数据库阿尔茨海默病索马鲁肽 2型糖尿病生物信息学网络药理学沉默信息调节因子1

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白藜芦醇减轻同型半胱氨酸引起的巨噬细胞免疫应答和增殖的作用

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中国临床药理学杂志 2024年第14期40卷 2038-2042页

作者：张学森秦凯悦李晓菡王艳佳徐茜杨晓玲吴忠市人民医院骨科国家卫健委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏医科大学基础医学院

目的探讨白藜芦醇（Res）在同型半胱氨酸（Hcy）引起巨噬细胞免疫应答和增殖中的作用。方法将小鼠ANA-1细胞分为对照组（常规培养）、模型组(100μmol·L-1Hcy)和低、中、高剂量实验组(在模型组基础上分别加25、50和100μmol·... 详细信息

目的探讨白藜芦醇（Res）在同型半胱氨酸（Hcy）引起巨噬细胞免疫应答和增殖中的作用。方法将小鼠ANA-1细胞分为对照组（常规培养）、模型组(100μmol·L-1Hcy)和低、中、高剂量实验组(在模型组基础上分别加25、50和100μmol·L-1白藜芦醇)以及Hcy+Ad-SIRT1组(100μmol·L-1Hcy+Ad-SIRT1)、Hcy+si-FOXO1组(100μmol·L-1Hcy+si-FOXO1)、Hcy+Res-L+Ad-SIRT1+si-FOXO1组(100μmol·L-1Hcy+25μmol·L-1白藜芦醇+转染Ad-SIRT1+si-FOXO1)。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖，用酶联免疫吸附法检测细胞培养液上清液中白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。用蛋白质印迹法检测沉默信息调节因子（SIRT1）和叉头蛋白O1（FOXO1）蛋白的表达水平。结果对照组、模型组和低、中、高剂量实验组450 nm光密度值分别为0.25±0.02、0.36±0.02、0.33±0.01、0.30±0.02和0.29±0.01,模型组较对照组细胞增殖显著增加，低、中、高剂量实验组细胞增殖较模型组均显著减少（均P<0.05）;对照组、模型组、低剂量实验组细胞培养液上清液中IL-6分别为（394.04±20.06）、（614.23±21.09）和（501.53±16.52）pg·mL-1,TNF-α分别为（516.54±18.96）、（717.22±24.81）和（632.74±19.11）pg·mL-1,SIRT1蛋白相对表达水平分别1.00±0.05、0.57±0.05和0.77±0.04,FOXO1蛋白相对表达水平分别为1.00±0.05、2.31±0.18和1.58±0.11,低剂量实验组的上述指标与对照组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。模型组、低剂量实验组、Hcy+Ad-SIRT1组及Hcy+si-FOXO1组细胞培养液上清液IL-6和TNF-α含量均显著低于模型组，在统计学上差异有统计学意义（均P<0.05）;低剂量实验组共转染Ad-SIRT1和si-FOXO1后，细胞培养液上清液IL-6和TNF-α含量均显著低于Ad-SIRT1组和si-FOXO1组（均P<0.05）。结论白藜芦醇能够减轻Hcy引起的巨噬细胞免疫应答和增殖，其机制与SIRT1/FOXO1通路有关。

关键词：白藜芦醇同型半胱氨酸沉默信息调节因子1 叉头蛋白O1 免疫应答增殖

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布鲁氏菌病疫苗新进展及其佐剂的应用

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中国人兽共患病学报 2024年第8期40卷 796-806页

作者：史娟朱玥洁殷郑伟何月月张峰波新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011

布鲁氏菌病是严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患传染病之一,疫苗接种已成为预防和控制布鲁氏菌感染的有效方法之一,市场上已有不少动物用的减毒活疫苗,但是目前尚无人用疫苗。伴随着基因工程和分子生物信息学研究的不断深入,各种... 详细信息

布鲁氏菌病是严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患传染病之一,疫苗接种已成为预防和控制布鲁氏菌感染的有效方法之一,市场上已有不少动物用的减毒活疫苗,但是目前尚无人用疫苗。伴随着基因工程和分子生物信息学研究的不断深入,各种亚单位疫苗应运而生,例如DNA疫苗、多表位疫苗、重组蛋白疫苗和载体疫苗。疫苗佐剂是针对不同免疫应答需要而研发出来的,本文将对布鲁氏菌病疫苗的研究进展进行综述,同时参考目前常用的疫苗佐剂进行介绍,以期能够对后续疫苗的研发提供新的思路。

关键词：布鲁氏菌疫苗佐剂

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白纹伊蚊自噬基因ATG8蛋白多克隆抗体的制备及应用

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中国病原生物学杂志 2023年第7期18卷 787-792页

作者：何珊肖秋秋石梦婷李威仪彭哲慧程金芝吴家红贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室安顺市人民医院检验科

目的通过原核表达系统制备白纹伊蚊(Aedes albopictus,Aa)ATG8,免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,并验证抗体的实用性。方法从白纹伊蚊Aa23细胞中提取cDNA,通过PCR扩增AaATG8基因片段,然后与载体pET30a连接,构建原核表达载体pET30a-AaATG8... 详细信息

目的通过原核表达系统制备白纹伊蚊(Aedes albopictus,Aa)ATG8,免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,并验证抗体的实用性。方法从白纹伊蚊Aa23细胞中提取cDNA,通过PCR扩增AaATG8基因片段,然后与载体pET30a连接,构建原核表达载体pET30a-AaATG8并转化至大肠埃希菌DH5α感受态细胞,挑取单克隆进行PCR鉴定,提取质粒进行测序鉴定。再将重组质粒转化到大肠埃希菌BL21感受态细胞,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白rAa-ATG8,纯化透析后免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体,采用ELISA检测抗体效价,并以该抗体为一抗采用Western blot检测不同物种ATG8蛋白的表达。结果成功构建原核表达载体PET30a-AaATG8并在大肠埃希菌中诱导表达目的蛋白。重组蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,ELISA检测其血清抗体效价为1∶640000;Western blot显示rAa-ATG8多克隆抗体可用于检测埃及伊蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊、三带喙库蚊、家蝇ATG8蛋白,反应条带位于18、16或14 ku处。结论成功获得高效价的rAa-ATG8多克隆抗体,该抗体不仅可用于检测白纹伊蚊ATG8蛋白,还可用于检测埃及伊蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊、三带喙库蚊、家蝇ATG8蛋白,为研究自噬在蚊虫以及其他物种中的作用奠定了基础。

关键词：白纹伊蚊自噬相关蛋白8/ATG8 原核表达抗体制备

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