检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理学报 2002年第2期34卷 181-186页

作者：刘卫霞吴静赵昭周彦彭小忠袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究?

筛选cDNA文库得到了人的钙周期蛋白结合蛋白基因 ,将此基因的全编码区克隆到原核表达载体pET2 8上 ,诱导目的蛋白质表达以后将重组蛋白质用亲和层析的方法进行纯化 ,得到了纯度很好的重组的目的蛋白质 ,以此作为抗原免疫动物 ,得到抗钙... 详细信息

筛选cDNA文库得到了人的钙周期蛋白结合蛋白基因 ,将此基因的全编码区克隆到原核表达载体pET2 8上 ,诱导目的蛋白质表达以后将重组蛋白质用亲和层析的方法进行纯化 ,得到了纯度很好的重组的目的蛋白质 ,以此作为抗原免疫动物 ,得到抗钙周期蛋白结合蛋白的特异多克隆抗体。Western印迹的结果表明 ,该基因在小鼠多种组织中广泛表达 ;免疫组化的结果表明 ,BT32 5细胞诱导分化后钙周期蛋白结合蛋白分布有变化 ,由分布于胞质中转向分布于胞核和核周胞质

关键词：钙周期蛋白(calcyclin) 钙周期蛋白结合蛋白(CacyBP) 克隆表达

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聚醚型聚氨酯材料表面纤维蛋白原的吸附性研究

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中国生物医学工程学报 1998年第4期17卷 326-331页

作者：许海燕陆颂芳王春仁彭屹孔桦杨子彬中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

本文采用放射性同位素标记的方法研究了嵌段聚醚型聚氨酯在纯纤维蛋白原溶液中和稀释血浆中的表面纤维蛋白原吸附性规律，考察了聚醚型聚氨酯的特性粘数及溶液体系中的ＮａＣｌ浓度对材料表面纤维蛋白原吸附性的影响，结果表明，随着聚... 详细信息

本文采用放射性同位素标记的方法研究了嵌段聚醚型聚氨酯在纯纤维蛋白原溶液中和稀释血浆中的表面纤维蛋白原吸附性规律，考察了聚醚型聚氨酯的特性粘数及溶液体系中的ＮａＣｌ浓度对材料表面纤维蛋白原吸附性的影响，结果表明，随着聚合物特性粘数的增大，材料表面的纤维蛋白原吸附量呈降低的趋势；溶液体系中盐浓度的降低导致纤维蛋白原凝固性增强，在纯纤维蛋白原溶液中，材料表面纤维蛋白原的吸附量相应增多，而在稀释血浆中，纤维蛋白原的吸附量相应减少，在达到最低值后又有上升的趋向，表明纤维蛋白原在材料表面的吸附还受血浆中其它大分子的影响。

关键词：聚醚型聚氨酯表面吸附纤维蛋白原特性粘数

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纳米生物医学研究的进展与发展趋势

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中国生物医学工程学报 2005年第6期24卷 643-648,654页

作者：许海燕中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

纳米科技具有巨大的发展潜力和诱人的应用前景,其中的一个重要方向是纳米生物医学。近年来,随着纳米科技与现代医学和生物学的交叉与渗透,纳米生物医学正在迅速形成一个崭新的研究领域,该领域的进步与发展将为现代生物学和医学的研究提... 详细信息

纳米科技具有巨大的发展潜力和诱人的应用前景,其中的一个重要方向是纳米生物医学。近年来,随着纳米科技与现代医学和生物学的交叉与渗透,纳米生物医学正在迅速形成一个崭新的研究领域,该领域的进步与发展将为现代生物学和医学的研究提供全新的技术和视点。文中主要对纳米结构材料及相关纳米技术在组织引导再生与修复、药物的靶向输送和控制释放、纳米尺度物质的生物学效应和安全性评价等几个方面的研究现状及取得的进展进行了综合评述。

关键词：纳米科技生物医学工程药物运送细胞生长健康与安全

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用DDRT-PCR方法克隆小鼠精子发生早期相关基因的EST

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第1期35卷 92-96页

作者：俞作仁郭睿葛晔华关纪奎马静薛社普韩代书中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系北京100005

为了避免差异显示技术中的放射性污染 ,并用之于筛选、克隆精子发生早期的相关基因 ,分离纯化了小鼠的原始精原细胞及B型精原细胞 ,提取其总RNA ,逆转录获得cDNA ,以荧光差异显示方法筛选差异表达基因。利用斑点杂交技术对差异片段进行... 详细信息

为了避免差异显示技术中的放射性污染 ,并用之于筛选、克隆精子发生早期的相关基因 ,分离纯化了小鼠的原始精原细胞及B型精原细胞 ,提取其总RNA ,逆转录获得cDNA ,以荧光差异显示方法筛选差异表达基因。利用斑点杂交技术对差异片段进行快速鉴定以排除假阳性。选取 16条差异显著的片段做克隆测序 ,通过Gen Bank/Blast比较 ,有 7个片段属于新的EST ,且均表现为在B型精原细胞中表达强度高于原始精原细胞。提交Gen Bank获得注册号。从中选取较有意义的 3条基因片段通过半定量RT PCR方法进一步验证其表达特征。和传统的差异显示方法比较 ,文中所采用的mRNA差异显示技术可快速排除假阳性结果 ,避免同位素标记带来的放射性污染。结果表明所获得的 7个新EST均表现为B型精原细胞中高表达 ,这些表达升高的基因可能与其后精子发生过程中的一系列特殊现象 (如减数分裂、变态成形 )有关 ,为生精细胞的分化做物质上的准备。

关键词：荧光mRNA差异显示技术精子发生基因克隆斑点杂交

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Toll样受体(TLRs)的信号转导与免疫调节

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生物化学与生物物理进展 2006年第9期33卷 820-827页

作者：王海坤韩代书中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系北京100005

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是进化中比较保守的一个受体家族,至少包括10个成员.TLRs能特异地识别病原相关的分子模式(PAMPs),不仅在激活天然免疫中发挥重要的作用,而且还调节获得性免疫,是连接天然免疫和获得性免疫的桥梁.... 详细信息

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是进化中比较保守的一个受体家族,至少包括10个成员.TLRs能特异地识别病原相关的分子模式(PAMPs),不仅在激活天然免疫中发挥重要的作用,而且还调节获得性免疫,是连接天然免疫和获得性免疫的桥梁.近年来,TLRs信号转导的研究,特别是在负调控研究领域,进展非常迅速.对TLRs信号通路新进展以及TLRs在抗感染免疫中的作用进行了综述.

关键词： Toll样受体天然免疫获得性免疫信号转导

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NO-cGMP信息通路在阿片类药物耐受和依赖中的调节作用

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中国药理学通报 1999年第2期15卷 106-111页

作者：臧梦维刘景生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室

ＮＯ合酶抑制剂能阻断或逆转μ、δ激动剂耐受和戒断反应，而对κ激动剂无明显作用，其药理效应类似于阿片成瘾治疗的常用药物可乐定。甲基兰抑制鸟苷酸环化酶活性，使ｃＧＭＰ生成减少，对阿片类药物耐受和戒断症状均有阻断作用，提示... 详细信息

ＮＯ合酶抑制剂能阻断或逆转μ、δ激动剂耐受和戒断反应，而对κ激动剂无明显作用，其药理效应类似于阿片成瘾治疗的常用药物可乐定。甲基兰抑制鸟苷酸环化酶活性，使ｃＧＭＰ生成减少，对阿片类药物耐受和戒断症状均有阻断作用，提示ＮＯｃＧＭＰ通路在阿片耐受和依赖发生中起重要作用，为寻找和设计治疗阿片类耐受成瘾的药物提供新的策略。

关键词：一氧化氮合酶阿片类药物阿片成瘾治疗

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红系细胞中Cre重组酶介导的位点特异性片段交换(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第10期35卷 947-951页

作者：李兴国严皓珩刘德培郝德龙梁植权北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所

Cre介导的片段交换技术利用重组酶Cre的位点特异性重组特性 ,在基因组的特定位点进行靶片段与目的片段的交换。运用互为反向的Lox位点 ,在鼠红白血病MEL细胞中进行靶载体的整合和交换载体的交换 ,探讨在特定的染色质环境下红系特异性顺... 详细信息

Cre介导的片段交换技术利用重组酶Cre的位点特异性重组特性 ,在基因组的特定位点进行靶片段与目的片段的交换。运用互为反向的Lox位点 ,在鼠红白血病MEL细胞中进行靶载体的整合和交换载体的交换 ,探讨在特定的染色质环境下红系特异性顺式作用元件的功能。电穿孔转染MEL细胞后从含有潮霉素 (hygromycin)的选择性半固体培养基中挑取MEL细胞单克隆 ,通过PCR和Southern杂交鉴定整合完整性和拷贝数 ,获得三种整合有靶载体p1L HyTk L1 β EGFP neo的细胞株A ,B和D。交换载体pL1 HS2 1L(含有 732 bp的人β 珠蛋白基因簇 5′DNaseI高敏位点 2核心片段 )和Cre表达载体pBS185共转染细胞株A ,9 (1,3 二羟 2丙氧甲基 )鸟嘌呤 (gancyclovir)负筛选后挑取单细胞克隆A HS。PCR检测显示HS2片段以反方向进行了交换。流式细胞仪分析显示平均的荧光细胞百分比 (2 .4 2 % )低于未交换的细胞株A (35 .94 % )。A HS中EGFP的低表达可能是处于非容许方向的HS2片段出现方向依赖性基因沉默所致。

关键词：染色体整合位点特异性重组 Cre/Lox 珠蛋白基因基因沉默

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反义6A8cDNA转染肿瘤细胞生物学行为的研究

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中华医学杂志 1999年第4期79卷 292-294页

作者：刘玉琴张立新顾蓓马凤蓉赵雪梅薛克勋高进朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

目的探讨反义６Ａ８对肿瘤细胞恶性行为的影响。方法选用来自人鼻咽癌细胞系ＣＮＥ２Ｚ的高转移克隆ＣＮＥ２Ｌ２细胞，分别用ｐＲＣ／ＣＭＶ反义６Ａ８ｃＮＤＡ表达载体及空质粒转染并检测了反义６Ａ８ｃＤＮＡ转染、空载体转染... 详细信息

目的探讨反义６Ａ８对肿瘤细胞恶性行为的影响。方法选用来自人鼻咽癌细胞系ＣＮＥ２Ｚ的高转移克隆ＣＮＥ２Ｌ２细胞，分别用ｐＲＣ／ＣＭＶ反义６Ａ８ｃＮＤＡ表达载体及空质粒转染并检测了反义６Ａ８ｃＤＮＡ转染、空载体转染及未转染细胞自身及与基质的粘附性、运动性和水解酶活性、体外侵袭性及体内生长转移能力。结果反义６Ａ８ｃＤＮＡ转染ＣＮＥ２Ｌ２细胞与基质的粘附性下降，其运动性和水解能力及体外侵袭及体内生长及转移能力也均下降。结论反义６Ａ８ｃＤＮＡ转染可明显降低肿瘤的恶性行为。

关键词：反义cDNA 转染肿瘤细胞生物学行为恶性行为

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河豚鱼基因组格式化粘粒文库的构建

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 99-104页

作者：杨立刘山鸣张小晓周巍贾开亮戴理吴东颖高春生刘国仰杨焕明中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传室

目的构建河豚鱼基因组文库，为人类基因组的研究提供资料。方法以红鳍东方豚的精子ＤＮＡ为材料，采用含有“外显子捕获”元件的粘粒（ｓＣＯＧＨ２）作为载体，构建河豚鱼的基因组粘粒文库。结果该文库共有５７６００个克隆，分别被保... 详细信息

目的构建河豚鱼基因组文库，为人类基因组的研究提供资料。方法以红鳍东方豚的精子ＤＮＡ为材料，采用含有“外显子捕获”元件的粘粒（ｓＣＯＧＨ２）作为载体，构建河豚鱼的基因组粘粒文库。结果该文库共有５７６００个克隆，分别被保存在６００块９６孔细胞培养板中，插入片段的大小平均为３５ｋｂ，相当于５．０个库容量，即从本文库中筛选到河豚鱼基因组任一单拷贝序列的机率为９９．２％。该文库能承受１０次以上的反复冻融，重组粘粒克隆在传代中仍保持高稳定性。以河豚鱼基因组ＤＮＡ为探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，结果显示出强阳性的杂交信号。结论该文库符合粘粒文库的质量要求。

关键词：河豚鱼比较基因组学粘粒文库

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Ca^(2+)/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路在DPDPE长时程作用的NG108-15细胞中的作用

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中国药理学通报 2002年第1期18卷 23-28页

作者：郭庆民刘景生中国医学科学院基础医学研究所.中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的　观察阿片类依赖时Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )信息通路的变化 ,以及Ca2 + /CaMKⅡ信息通路与cAMP水平之间的关系。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别采用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 3 ... 详细信息

目的　观察阿片类依赖时Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )信息通路的变化 ,以及Ca2 + /CaMKⅡ信息通路与cAMP水平之间的关系。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别采用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 3 2 P参入法以及RT PCR测定cAMP水平、钙调蛋白 (CaM)活性、CaMKⅡ活性和mDOR的mRNA表达水平的变化。结果　DPDPE长时程作用NG10 8 15细胞 ,cAMP水平升高 ,形成阿片依赖 ;细胞CaM活性和CaMKⅡ活性也升高 ,该升高可被CaM拮抗剂W 7所抑制 ,而CaMKⅡ活性的升高可被CaMKⅡ特异性抑制剂KN 6 2所抑制。W 7或KN 6 2可抑制阿片依赖导致的细胞cAMP水平的升高。阿片依赖时 ,加入纳洛酮诱发戒断 ,CaM活性、CaMKⅡ活性进一步增高。而在阿片依赖时 ,δ阿片受体的mRNA表达水平无明显变化。结论　Ca2 + /钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信息通路可通过调节cAMP水平参与阿片依赖的机制。

关键词：阿片类药物 NG108-15细胞钙调蛋白蛋白激酶Ⅱ DPDPE长时程作用信息通路 cAMP

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