检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学遗传学杂志 1996年第6期13卷 366-367页

作者：赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

染色质纤维荧光原位杂交曾赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｅｃｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前最重要的基因物理定位方法之一。但是其分辨率受到分裂期染色体高度... 详细信息

染色质纤维荧光原位杂交曾赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｅｃｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前最重要的基因物理定位方法之一。但是其分辨率受到分裂期染色体高度凝聚的限制，最高分辨率约为１Ｍｂ［...

关键词：染色质纤维荧光原位杂交

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大鼠脑缺血再灌后NMDA受体、NO及cGMP含量的变化

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 175-179页

作者：强文安左萍萍刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室

目的观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌的脑缺血模型，观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和... 详细信息

目的观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌的脑缺血模型，观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和下丘脑５个部位的ＮＭＤＡ受体活性（３Ｈ－ＭＫ８０１结合）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量变化。结果３Ｈ－ＭＫ８０１结合在海马、纹状体两部位呈持续性明显增加；原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）于缺血后３天在海马、大脑皮层、纹状体达高峰；而诱导型（ｉＮ－ＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量仅在海马呈持续上升，两者在增加幅度与趋势上也很相似。结论在海马缺血性神经损伤过程中，ＮＭＤＡ受体－ＮＯ－ｃＧＭＰ通路激活可能起重要作用。

关键词：脑缺血再灌注损伤 NMDA 一氧化氮 cGMP

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苯丙氨酸羟化酶基因内短串联重复序列多态性的分析及应用

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中华医学杂志 1995年第1期75卷 22-24页

作者：黄尚志方炳良初海鹰袁丽芳王玫许顺斌罗会元中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

在苯丙氨酸羟化酶基因内含子３中有一４核苷酸（ＴＣＴＡ）串联重复序列，作者分析了中国人中这一位点的多态性，聚合酶链反应扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，经银染色显示结果，在中国人群中检出７种等位片段。在３６例正常人中... 详细信息

在苯丙氨酸羟化酶基因内含子３中有一４核苷酸（ＴＣＴＡ）串联重复序列，作者分析了中国人中这一位点的多态性，聚合酶链反应扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，经银染色显示结果，在中国人群中检出７种等位片段。在３６例正常人中这些等位片段的频率分别为０．０２８、０．０４２、０．０１４、０．１３８、０．５４２、０．２０８和０．０２８，多态性信息量（ＰＩＣ）为０．５８５；在１６个苯丙酮尿症家庭中，频率为０．０１６、０．０７８、０．０４７、０．３１２、０．３７５、０．１５６和０．０１６，ＰＩＣ为０．６９３，在苯丙酮尿症产前基因诊断中应用价值极高。短串联重复序列多态性连锁分析简化了苯丙酮尿症基因诊断的途径，有利于向基层推广。作者应用连锁分析成功地进行了２例产前诊断。

关键词：苯酮尿症聚合酶链反应多态性连锁分析

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IgA Fc受体介导的中性粒细胞脱颗粒反应的机理研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第2期21卷 121-125页

作者：毕波张伟石敏鹿佳木斯大学医学院中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的　对IgAFc受体 (FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒行为进行研究。方法　分别用IgA免疫复合物 (IgAIC)和单克隆抗体 (MIP8a)交联中性粒细胞表面的FcαR ,用细胞释放的乳铁蛋白作为脱颗粒反应的指示剂 ,比较不同交联物激活细胞后产生的... 详细信息

目的　对IgAFc受体 (FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒行为进行研究。方法　分别用IgA免疫复合物 (IgAIC)和单克隆抗体 (MIP8a)交联中性粒细胞表面的FcαR ,用细胞释放的乳铁蛋白作为脱颗粒反应的指示剂 ,比较不同交联物激活细胞后产生的脱颗粒现象。结果　MIP8a交联FcαR后中性粒细胞发生迅速脱颗粒反应 ,在胞外无钙离子的情况下 ,该反应减弱。但是在胞外无镁离子的情况下 ,反应不受影响。IgAIC交联FcαR后仅引起缓慢的脱颗粒反应 ,在胞外无钙离子或无镁离子的情况下 ,都不能发生反应。结论　FcαR作为受体 (由IgAIC交联FcαR)和FcαR作为抗原 (由MIP8a交联FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒反应不同。

关键词： Fc受体中性粒细胞脱颗粒 IgA免疫复合物

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犬腺病毒 1型疫苗株 E3缺失表达载体的构建

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中国医学科学院学报 2001年第1期23卷 40-44,F003页

作者：黎皓唐七义张云王树蕙郭彩云中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原室北京100005

探索以犬腺病毒 1型疫苗株 (Cannaught Laboratory Limited, CLL)作为病毒重组疫苗和基因转移载体的可行性。方法构建带增强型绿色荧光蛋白（ enhanced green fluorescent protein, EGFP）报告基因的 E3缺失重组病毒 CLLEGFP。将 CLLEGF... 详细信息

探索以犬腺病毒 1型疫苗株 (Cannaught Laboratory Limited, CLL)作为病毒重组疫苗和基因转移载体的可行性。方法构建带增强型绿色荧光蛋白（ enhanced green fluorescent protein, EGFP）报告基因的 E3缺失重组病毒 CLLEGFP。将 CLLEGFP感染各种人源细胞，并以灌胃、腹腔注射、尾静脉注射和肌肉注射等不同途径接种昆明小鼠。多时间点取小鼠组织标本，冷冻干燥切片，观察 EGFP的表达。 4周后采集小鼠血清，以 Western blot分析抗 EGFP抗体的产生。结果 CLLEGFP能够感染各种人源细胞并表达 EGFP。在腹腔接种 CLLEGFP 3 d的小鼠肝组织细胞中可见转导的 EGFP。 Western blot分析显示，以各种途径免疫接种重组病毒 4周后的小鼠血清中均存在抗 EGFP特异抗体。结论 CLL具有开发成为病毒重组疫苗和基因转移载体的潜力。

关键词：重组犬腺病毒1型疫苗株绿色荧光蛋白EGFP 表达载体

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吗啡长时程作用对SH-SY5Y细胞cAMP系统及c-Fos磷酸化的影响

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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 262-267页

作者：方芳曹清宋福津刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ及ｃＦｏｓ的变化... 详细信息

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ及ｃＦｏｓ的变化。结果　（１）１００μｍｏｌ／Ｌ吗啡作用２ｍｉｎ～３６ｈ可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低，随着吗啡作用时间的延长，ｃＡＭＰ水平逐渐回升，至３６ｈ时明显高于对照，这时加入１００ μｍｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ｈ可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化；（２）吗啡长时作用下，胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化，而膜相ＰＫＡ活性未见明显变化；（３）吗啡作用３６ｈ时，细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低，ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用；（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ活性及ｃＦｏｓ磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰＰＫＡ系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关，而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ发生去磷酸化，从而激活某些基因的转录。

关键词：吗啡蛋白激酶A c-Fos磷酸化 cAMP 吗啡依赖

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MICA反应性Vδ1γδT细胞对上皮肿瘤细胞的细胞毒作用

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中国医学科学院学报 2004年第1期26卷 1-7页

作者：齐锦彭萍戴梦华李勇海崔莲仙何维中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室北京100005

目的研究人类MHCⅠ类链相关基因A(MICA)是否可以在体外诱导Vδ1γδT细胞的扩增,并且对MICA反应性Vδ1γδT细胞的细胞毒作用进行初步研究。方法采用分子克隆技术原核表达并纯化MICA蛋白,使用重组MICA蛋白在体外诱导肿瘤组织中的Vδ1γ... 详细信息

目的研究人类MHCⅠ类链相关基因A(MICA)是否可以在体外诱导Vδ1γδT细胞的扩增,并且对MICA反应性Vδ1γδT细胞的细胞毒作用进行初步研究。方法采用分子克隆技术原核表达并纯化MICA蛋白,使用重组MICA蛋白在体外诱导肿瘤组织中的Vδ1γδ肿瘤浸润T淋巴细胞(TILs),3-(4,5-二甲基噻唑-乙-YL)-2,5-二甲基-四唑溴盐(MTT)法检测MICA反应性Vδ1γδTILs的细胞毒活性。结果原核表达系统pET30表达并纯化了MICA;固相化的MICA蛋白可以诱导肿瘤组织中的Vδ1γδTILs在体外扩增,同时Vδ1γδTILs对MICA+的肿瘤细胞具有明显杀伤活性。结论MICA反应性Vδ1γδT细胞可能是肿瘤过继免疫治疗的新的候选效应细胞。

关键词：人类MHC Ⅰ类链相关基因A Vδ1 γδT细胞肿瘤浸润淋巴细胞人卵巢上皮肿瘤

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病原体抗原对γδT细胞细胞毒活性及细胞因子产生的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第4期18卷 256-261页

作者：何维林颖李刚于松涛张素梅刘庆丰杜桂书李静中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院100005

目的体外研究病原体抗原活化的γδＴ细胞的细胞毒和细胞因子产生的反应性以及对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的影响，以期进一步澄清γδＴ细胞的功能。方法用洗淘法从外周血中分离纯化出γδＴ细胞，在体外探讨植物血凝素和结核分枝杆菌（Ｍ．... 详细信息

目的体外研究病原体抗原活化的γδＴ细胞的细胞毒和细胞因子产生的反应性以及对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的影响，以期进一步澄清γδＴ细胞的功能。方法用洗淘法从外周血中分离纯化出γδＴ细胞，在体外探讨植物血凝素和结核分枝杆菌（Ｍ．ｔｂ）、人类６型疱疹病毒（ＨＨＶ－６）和阴道毛滴虫（ＴＶ）病原体抗原对γδＴ细胞的细胞毒活性和细胞因子产生的影响，并采用细胞隔离渗透培养法观察γδＴ细胞分泌的细胞因子对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的作用。结果Ｍ．ｔｂ比ＴＶ可更强地促进γδＴ细胞对Ｋ５６２细胞的杀伤活性。Ｍ．ｔｂ和ＨＨＶ－６可刺激γδＴ细胞主要分泌ＴＨ１型细胞因子ＩＦＮ－γ，而ＴＶ可刺激γδＴ细胞优势产生ＴＨ２型细胞因子ＩＬ－６。经抗原活化的γδＴ细胞分泌的可溶性因子可促进ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖。结论细胞内感染的病原体是激发γδＴ细胞产生ＴＨ１型细胞因子的诱导因子，并对其杀伤活性有所增强，而细胞外感染病原体可激发γδＴ细胞产生ＴＨ２型的细胞因子。

关键词：抗原病原体 γδT细胞细胞因子细胞毒性

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一种对阿尔茨海默病模型小鼠认知和记忆功能具有明显改善作用的中药方剂

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中国中药杂志 2003年第8期28卷 751-754页

作者：孙华胡愉张建民栗世铀何维中国医学科学院协和医科大学协和医院中医科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β AP2 5 35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了... 详细信息

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β AP2 5 35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了中医经典药方柴胡加龙骨牡蛎汤、当归芍药散和作者自己研制的两种中药复方CHPI和CHPⅡ对该小鼠模型认知和记忆能力的疗效作用。同时 ,以西药脑复康做对照。结果 :CHPⅡ对AD模型小鼠的认知和记忆能力具有明显的改善。结论

关键词：阿尔茨海默病中医药疗法认知功能记忆功能柴胡加龙骨牡蛎汤当归芍药散

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修饰后中国山东地方株HPV16 E6E7基因的转化活性检测及免疫原性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 427-432页

作者：许雪梅张明策罗利群刘晓娟朱明昭司静懿郭秀婵宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室中国医学科学院中国协和医科大学预防医学科学院病毒所

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的... 详细信息

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的第 2 4位氨基酸。突变修饰后的基因命名为fmE6E7。PCR扩增fmE6E7,重组入pLNCX载体 ,脂质体法转染 3T3细胞 ,免疫荧光组织化学及Westernblot检测转染细胞蛋白的表达。经软琼脂集落培养法和BALB c裸鼠皮下接种法检测fmE6E7的转化活性。然后PCR扩增fmE6E7,构建pVR10 12 fmE6E7真核表达质粒 ,于C5 7BL 6小鼠肌肉内直接进行裸DNA免疫 ,51 Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性 ,间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。结果　测序证实获得了预期的突变结果。pLNCX fmE6E7转染细胞体外软琼脂培养 3周未见集落形成 ;裸鼠皮下接种 2月后未见移植瘤形成 (0 3)。免疫鼠获得了较好的E7特异性的抗体E和抗原特异性的CTL。结论　修饰后E6E7基因可融合表达 ,转化活性消除的同时还可诱发特异的细胞免疫和体液免疫 ,表明中国山东地方株的E6E7基因可作为HPV16治疗性DNA疫苗的靶基因。

关键词：免疫原性人乳头瘤病毒16型 E6基因 E7基因 DNA疫苗细胞毒性T淋巴细胞宫颈癌

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