检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 1997年第2期49卷 197-203页

作者：周吕罗洁新中国医学科学院基础医学研究所北京100005 中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8... 详细信息

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8～16×10－8mol／L剂量范围内，呈剂量依赖性。（2）丙谷胺或抗胃泌素血清可以阻断G5对胃肌细胞的收缩反应，而阿托品则不影响G5的作用。（3）G5与乙酸胆碱对平滑肌细胞收缩有相加作用。（4）胞内钙释放阻断剂TMB-8可抑制G5对胃肌细胞的收缩作用。（5）G5作用于胃窦平滑肌细胞后胞内游离Ca2+显著上升。上述结果提示：胃泌素通过特异性受体引起胃平滑肌细胞收缩，其收缩作用通过胞内Ca2+释放介导。

关键词：胃平滑肌细胞胃泌素收缩游离钙

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ULBP4原核表达、生物学功能鉴定及其单克隆抗体的制备和初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第3期23卷 242-245页

作者：曹伟郝志勇郗雪艳孔燕马驰崔莲仙何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫系北京100005

目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表... 详细信息

目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表达质粒pET22b(+)/ULBP4(前225aa胞外段),在Rosetta-gamiTMB(DE3)大肠杆菌中获得表达且主要位于包含体中,经纯化透析复性后,分析其对NK细胞IFN-γ细胞因子分泌的影响。以ULBP4为抗原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次经HAT选择培养、间接ELISA法、克隆化培养、荧光免疫检测和流式细胞术以及Western blot筛选和鉴定抗ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结果:构建了pET22b(+)/ULBP4(225aa)原核表达体系,并检测到重组蛋白的有效表达;纯化的重组蛋白在体外培养体系中可以刺激NK细胞IFN-γ细胞因子的分泌。此外,还获得了4株可稳定分泌抗人ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结论:成功地构建并表达了具有生物活性的ULBP4,为γδT细胞的识别机制研究建立抗原制备平台,同时所制备的抗人ULBP4 mAb,为后续研究奠定了基础。

关键词： ULBP4 NKG2D IFN-γ Rosetta-gami^TMB(DE3)大肠杆菌表达生物学功能单克隆抗体

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褪黑素通过减弱催乳素基因增强子的突变抑制大鼠垂体催乳素瘤的增生

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生理学报 2005年第3期57卷 319-327页

作者：高列杨全会许荣中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理学系北京100005

本工作旨在探讨褪黑素(melatonin,MLT)抑制17-β-雌二醇(17-β-estradiol,E2)诱发的Sprague-Dawley大鼠垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤增生的分子机制。结果表明,每只大鼠每日定时皮下注射一定剂量的MLT(0.25、0.50mg)能显著抑制E2诱发的大鼠垂体PRL瘤的增生;偏低(0.05mg)或过高剂量(1.00、2.00mg)的MLT也抑制PRL瘤的增生,但无统计学意义。采用PCR和DNA直接测序显示,与正常垂体对照组比较,PRL瘤中PRL基因增强子出现五处突变,-1885bp位点由C突变为G,-1857^-1855由ACA替换为G,-1792^-1791插入G,-1383^-1382插入GGTGTGTG片段,-1265^-1250缺失GTGTGTGTGTGTGTGT片段。0.25mg/dMLT处理组,PRL瘤中的PRL基因增强子上述个别突变部位仍然存在(-1885由C突变为G),突变消失(-1792^-1791无插入G),大部分表现为突变减弱(-1856^-1855缺失AC,-1385^-1384缺失TG,-1250^-1253缺失GTGT)。采用荧光素酶报告基因检测PRL基因增强子活性显示,正常垂体、PRL瘤和0.25mg/dMLT处理的PRL瘤三组中,PRL基因增强子的活性分别为(13448.17±3012.74)、(161831.67±60996.01)和(10212.17±2634.71)OD单位。PRL瘤组增强子活性较正常垂体升高11倍(P<0.001),MLT处理组增强子活性较PRL瘤组降低93.69%(P<0.001)。上述三组PRL基因增强子空间结构的分析表明,PRL基因增强子DNA的曲折程度为PRL瘤组>MLT处理组>正常垂体。以上结果证实,MLT抑制大鼠垂体PRL瘤增生的重要分子机制之一可能是减弱PRL基因增强子的突变,也提示MLT可减弱PRL基因增强子的突变,从而下调PRL基因的高表达,可能与降低DNA的曲折程度有关。

关键词：褪黑素催乳素瘤增强子突变

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胃动素对Cajal间质细胞引起的大鼠胃平滑肌收缩的作用

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中华医学杂志 2003年第16期83卷 1422-1427页

作者：周吕王礼建袁勃王玲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理学系北京100005

目的　观察Cajal间质细胞 (ICC)在胃平滑肌收缩的关键作用 ,以及胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法　 (1)采用大鼠胃体上 1/3起搏区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中 ,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。 ... 详细信息

目的　观察Cajal间质细胞 (ICC)在胃平滑肌收缩的关键作用 ,以及胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法　 (1)采用大鼠胃体上 1/3起搏区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中 ,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。 (2 )用美蓝 +光照选择性损伤ICC对胃平滑肌收缩的影响。 (3)损伤ICC后胃动素对胃肌收缩的影响。结果　 (1)带有ICC的胃体起搏区和胃窦肌条记录到稳定的收缩活动 ,胃窦收缩频率和振幅较胃体起搏区高。 (2 )损伤胃环肌层ICC后 ,导致胃体起搏区和胃窦平滑肌收缩频率与振幅下降 80 %～ 90 % ,运动几乎消失。 (3)胃动素 0 0 3～ 0 2 5 μg/ml明显增加胃体起搏区和胃窦的收缩频率和振幅 ,呈剂量依赖性增加。损伤ICC后几乎完全取消胃动素对胃肌的收缩作用。抗胃动素血清和阿托品可阻断胃动素的作用。结论　ICC是胃平滑肌运动的起搏细胞。胃动素通过ICC对胃肌收缩进行调节。

关键词：胃动素 Cajal间质细胞大鼠胃平滑肌收缩作用

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小鼠乳腺癌细胞系Ca761-03的建立及其生物学特性研究

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中国肿瘤临床 2006年第20期33卷 1177-1179页

作者：苏广彦刘险峰任乐荣顾蓓章静波刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京市100005

目的:建立体外培养的小鼠乳腺癌细胞系,明确其生物学特性。方法:利用乳腺癌移植瘤组织,进行体外原代培养,并对其纯化和反复传代,进行生长曲线,倍增时间,软琼脂集落形成,细胞周期,染色体众数,免疫组织化学染色及体内成瘤率,转移率等鉴定... 详细信息

目的:建立体外培养的小鼠乳腺癌细胞系,明确其生物学特性。方法:利用乳腺癌移植瘤组织,进行体外原代培养,并对其纯化和反复传代,进行生长曲线,倍增时间,软琼脂集落形成,细胞周期,染色体众数,免疫组织化学染色及体内成瘤率,转移率等鉴定。结果:建立了一个小鼠乳腺癌细胞系,命名为Ca761-03。其生长迅速,呈贴壁生长。倍增时间为25.98h;平均软琼脂克隆形成率为5.39%;G1期31.8%,S期57.3%,G2+M期10.9%;CK染色为阳性,ER,PR均为阴性;体内移植成瘤率100%,肺转移率100%,未见淋巴结转移。结论:成功建立了小鼠乳腺癌细胞系,并对其生物学特性进行了较系统的观察与研究。

关键词：乳腺癌小鼠 Ca761-03

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人GM－CSF在链霉菌中的表达

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高技术通讯 1995年第7期5卷 14-17页

作者：刘岱岚袁建刚强伯勤李元梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院医药生物技术研究所

报道了ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ基因表达质粒的构建，以及该重组质粒在变铅青链霉菌Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓＴＫ５４中的表达，结果表明：ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ质粒具有表达ｈＧＭ－ＣＳＦ的功能。重组菌株细胞裂解液经ＴＦ－１... 详细信息

报道了ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ基因表达质粒的构建，以及该重组质粒在变铅青链霉菌Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓＴＫ５４中的表达，结果表明：ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ质粒具有表达ｈＧＭ－ＣＳＦ的功能。重组菌株细胞裂解液经ＴＦ－１细胞培养及集落形成实验均证实了其生物学活性。并分析了影响外源基因表达的某些因素，如ＳＤ序列与ＡＴＧ之间的距离，时间对表达的诱导等，探讨了外源基因高效表达的适宜条件。

关键词：集落刺激因子基因表达链霉菌微生物

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胆固醇逆向转运过程中新靶点及其药物的研究进展

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中国药理学通报 2006年第8期22卷 904-907页

作者：骆庆峰孙兰杜冠华中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050

血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)拮抗动脉粥样硬化(AS)的最主要机制在于参与胆固醇逆向转运(RCT)过程。近年来,将RCT过程中几个重要蛋白质和酶类,包括apoAⅠ,ABCA1,CETP等作为新的用药靶点进行了药物干预的尝试,在调节血脂和预防AS等方面... 详细信息

血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)拮抗动脉粥样硬化(AS)的最主要机制在于参与胆固醇逆向转运(RCT)过程。近年来,将RCT过程中几个重要蛋白质和酶类,包括apoAⅠ,ABCA1,CETP等作为新的用药靶点进行了药物干预的尝试,在调节血脂和预防AS等方面取得了良好的效果,开创了治疗该类疾病的新局面,对下一步的疾病治疗具有重要的指导作用。

关键词：胆固醇逆向转运动脉粥样硬化高密度脂蛋白

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D构象丝氨酸在中枢神经系统中的功能研究进展

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生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 852-854页

作者：阳洪波袁建刚彭小忠中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细... 详细信息

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细胞而非神经元来源的“异常”构象氨基酸作为一种新型神经递质 ,不仅更新了传统“神经递质”的定义。

关键词： D构象丝氨酸丝氨酸消旋酶 NMDA受体中枢神经系统功能

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电损毁延髓最后区对犬消化间期移行性复合运动的作用

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中华医学杂志 2000年第10期80卷 764-768页

作者：王礼建周吕田瑞中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005

目的　探讨延髓最后区对胃肠消化间期移行性复合运动 (MMC)的影响。方法　应用 8只犬进行慢性实验 ,在胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动。在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素。用放射... 详细信息

目的　探讨延髓最后区对胃肠消化间期移行性复合运动 (MMC)的影响。方法　应用 8只犬进行慢性实验 ,在胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动。在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素。用放射免疫法 (RIA)测定血浆胃动素含量。观察 :(1)消化间期正常MMC活动和血浆胃动素浓度变化 ;(2 )电损毁延髓最后区对MMC活动和血浆胃动素水平的影响 ;(3)电损毁延髓最后区对外源性胃动素启动MMCⅢ相收缩作用的影响。结果　(1)正常犬消化间期出现典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相MMC。MMCⅢ相与血浆胃动素释放高峰同步发生。(2 )电损毁延髓最后区后 ,胃窦和十二指肠MMC的收缩运动明显抑制 ,MMCⅠ相延长 ,Ⅱ、Ⅲ相明显缩短 ,失去了损毁前MMC周期性、时相性和移行性的特点 ,血浆胃动素浓度明显降低 ,外源性静脉注射胃动素不能启动MMCⅢ相收缩。结论　延髓最后区对消化间期MMC的周期发生和移行有重要的调控作用 ,其作用途径与胃动素介导有关。

关键词：延髓消化生理学胃动素

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应用原位双膜法快速筛选人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子

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生物化学与生物物理进展 2002年第2期29卷 307-310页

作者：张艳丽陈松森杨克恭狄旭熊安琪张友鸿中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法 ,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上 ,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白 ,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合... 详细信息

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法 ,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上 ,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白 ,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合的蛋白 .利用此法筛选到人Flt3配体 (hFL)的甲醇酵母高表达转化子 ,液体诱导表达量约 2 0mg L .ELISA结果证明 ,原位双膜法所得的菌落染色强度与该菌落液体诱导表达水平正相关 .蛋白质印迹结果显示 ,培养上清在 2 5ku处有明显杂交条带 ,而对照组杂交呈阴性 ,且表达量随诱导天数增加 .原位双膜法是一种良好的筛选方法 ,可以快捷、准确地筛选高表达酵母转化子 .

关键词：原位双膜法人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子表达巴斯德毕赤酵母

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