检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2006年第32期86卷 2266-2270页

作者：王礼建周吕袁勃王玲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理学系北京100005

目的研究瘦素对大鼠消化间期移行性复合运动(MMC)和消化期胃运动的作用,并观察空腹MMC与餐后消化期胃运动的不同时程血中瘦素浓度的变化以及与胃动素变化的关系。方法50只Wister大鼠随机分为5组进行慢性实验。在胃体、胃窦和幽门浆膜植... 详细信息

目的研究瘦素对大鼠消化间期移行性复合运动(MMC)和消化期胃运动的作用,并观察空腹MMC与餐后消化期胃运动的不同时程血中瘦素浓度的变化以及与胃动素变化的关系。方法50只Wister大鼠随机分为5组进行慢性实验。在胃体、胃窦和幽门浆膜植入应力传感器记录清醒大鼠胃运动。颈外静脉内置慢性静脉插管供注射药物及取血样品。血清瘦素和胃动素用放免法测定,进餐用标准试餐。结果空腹胃运动出现典型的消化间期MMC运动,分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ时相,其Ⅲ相可传至幽门。进餐后胃运动呈持续有规则的蠕动性收缩的消化期运动。空腹MMC运动中血清瘦素的浓度分别为Ⅰ相(5．6±1．0)μg/L,Ⅱ相(11．4±2．1)μg/L,Ⅲ相(2．1±0．7)μg/L,显示MMCⅡ相瘦素浓度最高(P<0．01)。餐后消化期,血中瘦素浓度于进餐后3 min开始升高,至餐后10 min达到高峰(28．1±4．4)μg/L,随后30 min瘦素仍维持高水平(与餐前比较均P<0．01)。与瘦素相反,胃动素在MMCⅢ相时浓度最高,而餐后其浓度较低。静脉灌流瘦素(2．5μg·kg-1·10 min)可使空腹胃运动变为餐后胃体舒张、胃窦与幽门收缩的消化期运动类型。抗瘦素血清、阿托品及胆囊收缩素(CCK)-A受体阻断剂戊酰胺酸均可阻断瘦素对胃运动的作用。结论瘦素是启动空腹胃MMCⅡ相活动及餐后消化期运动的激素,其变化会导致与饱感有关的胃排空延迟。瘦素对胃运动的作用是通过胆碱能神经及CCK-A受体介导。

关键词：瘦素胃动素胃运动

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高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞NF-κB的激活和血小板源生长因子B链的表达

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 354-359页

作者：周礼董继红于淼尹洪超佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导... 详细信息

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导通路的影响。方法　胃饲高胆固醇乳剂建立高胆固醇血症大鼠模型 ,免疫组织化学染色法 [链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法 ]明确主动脉内皮细胞NF κB激活后发生核转位的情况 ;应用原位杂交技术观察内皮细胞PDGF BmRNA的表达 ,同时应用免疫组织化学染色法 (SP法 )观察内皮细胞合成PDGF B链的情况。结果　与对照组相比 ,胃饲高胆固醇乳剂 6周后 ,2个月龄大鼠出现高胆固醇血症 ,主动脉内皮细胞NF κB核转位的比例明显增加 ,PDGF BmRNA的表达也增多。 10个月龄对照组Wistar大鼠的主动脉内皮细胞几乎不表达PDGF BmRNA ,摄入高胆固醇乳剂 16周后 ,内皮细胞表达PDGF BmRNA明显增多。较之摄入胆固醇同时期的 2个月龄大鼠 ,NF κB的核转位及内皮细胞PDGF B链的合成均增多(0 4 6 1± 0 0 75比 0 35 0± 0 0 94 ;0 2 30± 0 0 4 0比 0 185± 0 0 37) ,其差异有显著性意义 (P <0 0 5 ;P <0 0 0 1)。结论　高胆固醇血症能激活大鼠主动脉内皮细胞的NF κB 。

关键词：高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞血小板源生长因子B链基因表达细胞核因子KB

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ULBP4原核表达、生物学功能鉴定及其单克隆抗体的制备和初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第3期23卷 242-245页

作者：曹伟郝志勇郗雪艳孔燕马驰崔莲仙何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫系北京100005

目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表... 详细信息

目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表达质粒pET22b(+)/ULBP4(前225aa胞外段),在Rosetta-gamiTMB(DE3)大肠杆菌中获得表达且主要位于包含体中,经纯化透析复性后,分析其对NK细胞IFN-γ细胞因子分泌的影响。以ULBP4为抗原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次经HAT选择培养、间接ELISA法、克隆化培养、荧光免疫检测和流式细胞术以及Western blot筛选和鉴定抗ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结果:构建了pET22b(+)/ULBP4(225aa)原核表达体系,并检测到重组蛋白的有效表达;纯化的重组蛋白在体外培养体系中可以刺激NK细胞IFN-γ细胞因子的分泌。此外,还获得了4株可稳定分泌抗人ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结论:成功地构建并表达了具有生物活性的ULBP4,为γδT细胞的识别机制研究建立抗原制备平台,同时所制备的抗人ULBP4 mAb,为后续研究奠定了基础。

关键词： ULBP4 NKG2D IFN-γ Rosetta-gami^TMB(DE3)大肠杆菌表达生物学功能单克隆抗体

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小鼠乳腺癌细胞系Ca761-03的建立及其生物学特性研究

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中国肿瘤临床 2006年第20期33卷 1177-1179页

作者：苏广彦刘险峰任乐荣顾蓓章静波刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京市100005

目的:建立体外培养的小鼠乳腺癌细胞系,明确其生物学特性。方法:利用乳腺癌移植瘤组织,进行体外原代培养,并对其纯化和反复传代,进行生长曲线,倍增时间,软琼脂集落形成,细胞周期,染色体众数,免疫组织化学染色及体内成瘤率,转移率等鉴定... 详细信息

目的:建立体外培养的小鼠乳腺癌细胞系,明确其生物学特性。方法:利用乳腺癌移植瘤组织,进行体外原代培养,并对其纯化和反复传代,进行生长曲线,倍增时间,软琼脂集落形成,细胞周期,染色体众数,免疫组织化学染色及体内成瘤率,转移率等鉴定。结果:建立了一个小鼠乳腺癌细胞系,命名为Ca761-03。其生长迅速,呈贴壁生长。倍增时间为25.98h;平均软琼脂克隆形成率为5.39%;G1期31.8%,S期57.3%,G2+M期10.9%;CK染色为阳性,ER,PR均为阴性;体内移植成瘤率100%,肺转移率100%,未见淋巴结转移。结论:成功建立了小鼠乳腺癌细胞系,并对其生物学特性进行了较系统的观察与研究。

关键词：乳腺癌小鼠 Ca761-03

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人GM－CSF在链霉菌中的表达

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高技术通讯 1995年第7期5卷 14-17页

作者：刘岱岚袁建刚强伯勤李元梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院医药生物技术研究所

报道了ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ基因表达质粒的构建，以及该重组质粒在变铅青链霉菌Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓＴＫ５４中的表达，结果表明：ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ质粒具有表达ｈＧＭ－ＣＳＦ的功能。重组菌株细胞裂解液经ＴＦ－１... 详细信息

报道了ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ基因表达质粒的构建，以及该重组质粒在变铅青链霉菌Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓＴＫ５４中的表达，结果表明：ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ质粒具有表达ｈＧＭ－ＣＳＦ的功能。重组菌株细胞裂解液经ＴＦ－１细胞培养及集落形成实验均证实了其生物学活性。并分析了影响外源基因表达的某些因素，如ＳＤ序列与ＡＴＧ之间的距离，时间对表达的诱导等，探讨了外源基因高效表达的适宜条件。

关键词：集落刺激因子基因表达链霉菌微生物

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人红细胞-兔VX2肿瘤细胞融合疫苗的制备及其对兔VX2肿瘤复发转移的影响

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中国肿瘤临床 2005年第9期32卷 530-532页

作者：刘险峰刘玉琴任乐荣苏广彦顾蓓董继红中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京市100005

目的:制备一种新型肿瘤疫苗,观察其抗肿瘤效应。方法:PEG法制备人红细胞-兔VX2细胞融合疫苗,MTT法检测疫苗体外刺激兔单核细胞增殖的作用,观察疫苗治疗对兔VX2肿瘤复发转移的影响。结果:融合疫苗体外显著刺激单核细胞增殖,后者能特异性... 详细信息

目的:制备一种新型肿瘤疫苗,观察其抗肿瘤效应。方法:PEG法制备人红细胞-兔VX2细胞融合疫苗,MTT法检测疫苗体外刺激兔单核细胞增殖的作用,观察疫苗治疗对兔VX2肿瘤复发转移的影响。结果:融合疫苗体外显著刺激单核细胞增殖,后者能特异性杀伤VX2靶细胞,疫苗治疗能显著降低VX2肿瘤的复发转移率。结论:人红细胞-兔VX2细胞融合疫苗体内外均可诱导特异性抗肿瘤免疫效应,该疫苗为研究人肿瘤细胞融合疫苗提供了支持。

关键词：红细胞 VX2 兔细胞融合肿瘤疫苗复发转移

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转基因小鼠人载脂蛋白AI基因表达对血浆高密度脂蛋白的影响

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中华医学杂志 1998年第7期78卷 531-533页

作者：李汇华谷素敏佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学研究室

目的研究载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）基因表达调控对血浆高密度脂蛋白（ＨＤＬ）代谢的影响。方法采用已建立的含小鼠金属硫蛋白Ｉ（ＭＴ－Ｉ）启动子的人ａｐｏＡＩ转基因Ｃ５７ＢＬ／６小鼠系，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒ... 详细信息

目的研究载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）基因表达调控对血浆高密度脂蛋白（ＨＤＬ）代谢的影响。方法采用已建立的含小鼠金属硫蛋白Ｉ（ＭＴ－Ｉ）启动子的人ａｐｏＡＩ转基因Ｃ５７ＢＬ／６小鼠系，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术检测锌诱导前后人ａｐｏＡＩ基因整合和表达的情况。结果转基因小鼠整合４～１５拷贝的人ａｐｏＡＩ基因。人ａｐｏＡＩ基因主要在肝和肾中表达，经重金属锌诱导后，人ａｐｏＡＩ基因可在肝、小肠及肾中高效表达。转基因鼠血浆总ａｐｏＡＩ水平比对照组明显增高，其中人ａｐｏＡＩ水平经锌诱导后增高约４６％。与对照组相比，血浆ＨＤＬ水平在锌诱导前后分别增高约４７％和１０３％。转基因鼠ＨＤＬ和人ａｐｏＡＩ水平间呈显著正相关（ｒ＝０．８５，Ｐ＜０．０１）。结论ＡｐｏＡＩ对血浆ＨＤＬ水平升高有重要的调节作用。

关键词：转基因小鼠载脂蛋白AI 基因表达 HDL 冠心病

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D构象丝氨酸在中枢神经系统中的功能研究进展

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生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 852-854页

作者：阳洪波袁建刚彭小忠中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细... 详细信息

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细胞而非神经元来源的“异常”构象氨基酸作为一种新型神经递质 ,不仅更新了传统“神经递质”的定义。

关键词： D构象丝氨酸丝氨酸消旋酶 NMDA受体中枢神经系统功能

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瞬态诱发耳声发射的能量分布图

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生物物理学报 1998年第4期14卷 784-790页

作者：李丽明林金森张正国中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

耳声发射是近年来耳科界研究的热点。文章提出以小波变换提取不同尺度下瞬态诱发耳声发射（ＴＥＯＡＥ）的小波信号，并以其平均能量作为特征参数，建立了ＴＥＯＡＥ能量分布图，为ＴＥＯＡＥ的定量频率分析提供新手段。ＴＥＯＡＥ能量... 详细信息

耳声发射是近年来耳科界研究的热点。文章提出以小波变换提取不同尺度下瞬态诱发耳声发射（ＴＥＯＡＥ）的小波信号，并以其平均能量作为特征参数，建立了ＴＥＯＡＥ能量分布图，为ＴＥＯＡＥ的定量频率分析提供新手段。ＴＥＯＡＥ能量分布图以正常人的平均能量作为０ｄＢ，以单侧５％位数作为９５％正常值范围，它体现了能量的损失情况，便于与纯音测听的结果相比较。ＴＥＯＡＥ能量分布图的建立，说明ＴＥＯＡＥ信号也包含了定量的频率信息，并提供了其定量分析的有效手段。

关键词：瞬态诱发耳声发射小波变换能量分布图

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应用原位双膜法快速筛选人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子

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生物化学与生物物理进展 2002年第2期29卷 307-310页

作者：张艳丽陈松森杨克恭狄旭熊安琪张友鸿中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法 ,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上 ,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白 ,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合... 详细信息

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法 ,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上 ,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白 ,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合的蛋白 .利用此法筛选到人Flt3配体 (hFL)的甲醇酵母高表达转化子 ,液体诱导表达量约 2 0mg L .ELISA结果证明 ,原位双膜法所得的菌落染色强度与该菌落液体诱导表达水平正相关 .蛋白质印迹结果显示 ,培养上清在 2 5ku处有明显杂交条带 ,而对照组杂交呈阴性 ,且表达量随诱导天数增加 .原位双膜法是一种良好的筛选方法 ,可以快捷、准确地筛选高表达酵母转化子 .

关键词：原位双膜法人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子表达巴斯德毕赤酵母

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