检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 184-184页

作者：陆瑜李宏帆莫志成吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

白细胞介素2受体(IL-2R)α亚基的胞内末端较短,可能不直接参与IL-2的信号传递,但它在激活淋巴细胞中的特异表达以及与IL-2结合参与淋巴细胞增殖和免疫应答强度的调控.本组曾报道IL-2Rα基因5＇端顺式调控元件NRE不仅与其3＇端下游NRE反... 详细信息

白细胞介素2受体(IL-2R)α亚基的胞内末端较短,可能不直接参与IL-2的信号传递,但它在激活淋巴细胞中的特异表达以及与IL-2结合参与淋巴细胞增殖和免疫应答强度的调控.本组曾报道IL-2Rα基因5＇端顺式调控元件NRE不仅与其3＇端下游NRE反向重复序列(NIRS)共同参与对IL-2Rα基因表达的调控,同时反式作用因子可能通过NRE和/或NIRS以及单链或双链DNA的选择性影响该基因的启动子活性[1].为研究IL-2Rα基因NRE的作用机制,本组对其特异的结合蛋白进行了研究.

关键词：白细胞介素体α 基因负调控元件相关结合蛋白筛选克隆

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白细胞介素2受体α基因表达中两组近端启动子活性的研究

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中国医学科学院学报 2002年第1期24卷 40-40页

作者：程小款衡凤燕刘觉辉吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

淋巴细胞表面的高亲和力白细胞介素2受体（IL-2R）的由α、β和γ三个亚基组成。其中α亚基只在激活淋巴细胞上表达，并且只能与IL-2特异性结合。因此，IL-2Rα基因的活化过程参与决定淋巴细胞增殖和免疫应答强度的调控。

关键词：启动子转录调控白细胞介素2受体α基因基因表达

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应用蛋白质组学方法研究食管癌组织中异常表达的蛋白

应用蛋白质组学方法研究食管癌组织中异常表达的蛋白

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第七届海内外生命科学论坛

作者：胡海吴旻王明荣夏书华应万涛胡莉萍徐昕蔡岩蔡有余钱小红沈岩中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 军事医学科学院放射医学研究所基因组学与蛋白质组学实验室 100850 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学及分子生物学国家重点实验室北京100007

蛋白质组学方法是直接观察组织细胞中所有蛋白表达状态的高通量研究方法.通过比较在不同病理、生理状态下、不同外因刺激下细胞、组织蛋白的表达图谱，可能发现与特定生命现象相关的蛋白质.本文中应用这一方法分析了食管癌组织与配对的... 详细信息

蛋白质组学方法是直接观察组织细胞中所有蛋白表达状态的高通量研究方法.通过比较在不同病理、生理状态下、不同外因刺激下细胞、组织蛋白的表达图谱，可能发现与特定生命现象相关的蛋白质.本文中应用这一方法分析了食管癌组织与配对的癌旁组织间差异表达的蛋白.肿瘤细胞或癌旁食管上皮细胞通过显微切割方式从组织冰冻切片中获得，提取其总蛋白进行二维电泳.电泳胶被银染显色，应用Imagemarster 2-D Elite软件对获得的蛋白图谱加以分析，寻找癌与癌旁组织差异表达的蛋白，最后用质谱技术测定目的蛋白的肽质指纹谱.本研究共分析了34例食管癌及其配对的癌旁组织，发现并鉴定了29个差异表达的蛋白.其中9个在食管癌组织表达上调，包括HSP27、MHCⅠ等;20个在癌旁组织中高表达，如膜联蛋白(annexin)Ⅰ、膜联蛋白Ⅴ等.根据已有的资料提示，这些蛋白分别与细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应、转录调控等相关.以上结果表明蛋白质组学方法将会在肿瘤发生、发展机理的研究方面发挥重要作用，通过这种方法鉴定的肿瘤异常表达蛋白可能成为肿瘤诊断及预后判断的标志物.

关键词：蛋白质组学食管癌二维电泳蛋白表达

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133名商业性服务男性受供者16PF测评

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中国心理卫生杂志 2002年第1期16卷 48-48页

作者：左群张孔来李贞洁刘德辉周小辉河北省职工医学院预防医学系流行病学与卫生统计学教研室 071000 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室河北省职工医学院附属医院检验科香港中文大学临床流行病学中心广东省深圳市收容教育所

国内外研究已经证明, 参与商业性服务是HIV/AIDS (爱滋病病毒/ 爱滋病)发生与传播的主要危险社会行为.有关资料显示, 与商业性服务有关的HIV感染比例不断增加已成为我国目前HIV/AIDS流行发展的一个重要特征, 近年来, 除了从事商业性服... 详细信息

国内外研究已经证明, 参与商业性服务是HIV/AIDS (爱滋病病毒/ 爱滋病)发生与传播的主要危险社会行为.有关资料显示, 与商业性服务有关的HIV感染比例不断增加已成为我国目前HIV/AIDS流行发展的一个重要特征, 近年来, 除了从事商业性服务提供的女性不断增加外, 商业性服务男性受供者数量也呈不断上升趋势.

关键词：商业性服务男性受供者 AIDS 人格特征卡特尔16人格因素量表

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白细胞介素体α基因负调控元件相关结合蛋白的筛选与克隆

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中国医学科学院学报 2002年第2期24卷

作者：陆瑜李宏帆莫志成吴宁华沈？琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

白细胞介素2受体（IL-2R）α亚基的胞内末端较短，可能不直接参与IL-2的信号传递，但它在激活淋巴细胞中的调控。本组曾报道IL-2Rα基因5'端顺式调控元件NRE不仅与其3'端下游NRE反向重复序列9NIRS）共同参与对IL-2Rα基因表达... 详细信息

白细胞介素2受体（IL-2R）α亚基的胞内末端较短，可能不直接参与IL-2的信号传递，但它在激活淋巴细胞中的调控。本组曾报道IL-2Rα基因5'端顺式调控元件NRE不仅与其3'端下游NRE反向重复序列9NIRS）共同参与对IL-2Rα基因表达的调控，同时反式作用因子可能通过NRE和/或NIRS以及单链或双链DNA的选择性影响该基因的启动子活性。为研究IL-2Rα基因NRE的作用机制，本组对其特异的结合蛋白进行了研究。

关键词：白细胞介素体α 基因负调控元件相关结合蛋白筛选克隆

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小鼠红细胞分化-去核因子的发育期相关性表达与鉴定

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中国科学（C辑） 2001年第1期31卷 52-58页

作者：章正琰薛社普中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院细胞生物室

以质粒pBS-SK-MEDDF上的小鼠 MEDDF cDNA片段为模板, 通过PCR方法删除该片段的非编码序列, 将编码序列克隆到pGEM-T-Easy质粒中, 经DNA序列测定后, 证明其克隆序列正确, 再将MEDDF编码序列定向克隆到表达载体pET-30α(+)的BamHⅠ和Hind... 详细信息

以质粒pBS-SK-MEDDF上的小鼠 MEDDF cDNA片段为模板, 通过PCR方法删除该片段的非编码序列, 将编码序列克隆到pGEM-T-Easy质粒中, 经DNA序列测定后, 证明其克隆序列正确, 再将MEDDF编码序列定向克隆到表达载体pET-30α(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间, 构建了原核表达载体, 在获高效表达菌株中, 特异表达蛋白质的量占细菌总蛋白的40%. 以纯化的该蛋白质为抗原, 免疫新西兰纯种大耳兔, 获得高效价的抗血清. 经免疫细胞化学验证, MEDDF在红细胞的表达具有发育阶段特异性, 推测与小鼠红细胞终末分化的启动及细胞核浓缩相关. 另外, MEDDF还在小鼠骨髓中的粒细胞系及巨核细胞系表达, 说明该蛋白质与小鼠骨髓髓系细胞的分化有渊源关系.

关键词：发育期红细胞分化相关因子原核表达 MEDDF 造血因子发育期

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红细胞分化去核因子在诱导小鼠红白血病细胞分化以及恶性逆转中的作用

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中国医学科学院学报 2001年第1期23卷 32-35,F003页

作者：赵青葛晔华周建平马静陈克铨薛社普韩代书中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细... 详细信息

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性，采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较，细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8％。用 RT- PCR检测发现，转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍， c- myc表达量下降了 66.3％。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。

关键词：小鼠红细胞分化去核因子红细胞分化红白血病

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重组腺相关病毒转导外源基因入EB病毒转化的B淋巴细胞获长期表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第6期21卷 594-599页

作者：史耕先刘音李琳朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包... 详细信息

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包装后转导淋巴细胞 ,经G418筛选 ,用有限稀释法克隆转导成功的淋巴细胞。Northern杂交和RT PCR检测转导基因的mRNA表达水平。ConA结合试验检测细胞在转导基因后 6A8α 甘露糖苷酶活性的改变。结果　pAGX 反义6A8DNA及pAGX 正义 6A8DNA经包装获得了高复制滴度的重组AAV(rAAV)颗粒 ,藉助rAAV成功地把 6A8基因转导入EB病毒转化的B细胞株SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB。Northern杂交结果显示 ,转导的正义或反义 6A8DNA获得表达。经 1年余传代培养 ,RT PCR检测见BJAB和SKW6细胞中转导的正义或反义 6A8DNA的mRNA表达增加 ,新霉素抗性基因 (neoR)也获得表达 ,表明转导基因获得了长期表达。ConA结合强度在转导反义 6A8DNA的细胞升高 ,提示转导反义 6A8DNA可影响 6A8α 甘露糖苷酶的表达。结论　用AAV载体成功地把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB ,转导的基因获得长期表达 ,并干扰 6A8α 甘露糖苷酶的表达。

关键词：重组腺相关病病毒 EB病毒转化 B淋巴细胞外源基因转导

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在免疫老化中T细胞结构与功能的变化

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中国免疫学杂志 2001年第2期17卷 57-60页

作者：何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫室北京100005

21世纪人口的老龄化对人类社会是一个重大的挑战。我国目前已经步入老年型社会。随着社会性人口的衰老，与人口衰老相关疾病的发生急剧增加，特别是阿尔采默痴呆(AD)、帕金森病(PD)、骨质疏松和II型糖尿病为代表的老年性疾病引起的智... 详细信息

21世纪人口的老龄化对人类社会是一个重大的挑战。我国目前已经步入老年型社会。随着社会性人口的衰老，与人口衰老相关疾病的发生急剧增加，特别是阿尔采默痴呆(AD)、帕金森病(PD)、骨质疏松和II型糖尿病为代表的老年性疾病引起的智能衰退、行动障碍、骨折和肾功能衰竭等严重地影响老人的生活质量，为社会和家庭带来沉重负担。老年性疾病并非简单地由机体老化所致，也非疾病在老年期的明显表现，但是以老化为其发病基础的。同时，遗传因素和体内外环境因素在老年性疾病的发生与发展方面起一定作用。然而，目前大多数老年性疾病研究尚处于资料的积累阶段，迫切需要有科学创意假说的提出，从多个角度全方位地对老化和老年性疾病的发生机制进行研究，进而为临床提供有效的手段用于老年性疾病的防治。 衰老或老化（senescence）是机体代谢过程中的一个必然阶段，主要表现为机体对环境刺激的适应能力减弱以至丧失。老化的机制颇为复杂，有关老化的理论假说也颇多，如氧化损伤学说、遗传控制学说、体细胞突变学说、衰老符合途径假说等。美国病理学家Wolford在60年代首先提出老化的免疫学假说，认为免疫系统从根本上参加了正常脊椎动物的老化过程，是老化过程的主要调节系统之一。老化免疫学旨在研究免疫老化（Immunesenescence）的发生与发展机制，研究正常脊椎动物免疫系统功能与结构的增龄性变化规律，为高等生物生命活动研究提供全程性（尤其生命处于衰退阶段时）免疫系统方面的信息，并且探讨免疫老化对机体抗感染和抗肿瘤机能及其自身免疫病易感性等方面的影响，为解决衰老所致的免疫相关性疾病的诊断、预防和治疗提供策略与方法。 T淋巴细胞功能降低与数量减少是增龄性免疫系统的主要改变，其中胸腺增龄性萎缩（退化）表现尤为明显。T细胞与免疫老化的关系是老化免疫学机制研究的核心内容，其中至少有以下6项研究为研究者们所关注：其一，T细胞来源于骨髓的前体T细胞，因此老化对T细胞的影响的第一个证据应在老龄动物或老年人造血发生的研究之中来寻求，老化时干细胞缺陷受到重视；其二，胸腺是T淋巴细胞发育与成熟的场所，对于成年个体来说，胸腺似乎为 T细胞发育成熟的特殊目的而存在。然而，胸腺随增龄而发生退化，即便是年轻成熟的个体，其胸腺功能和T细胞产生也随着胸腺退化而表现低下，因此胸腺退化机制的澄清对老化免疫的深刻理解至关重要；其三，静止成熟的T淋巴细胞在外周是长寿命的,其人类T细胞一般认为可存活几十年。在此期间，它们也将受到老化过程的影响；其四，T淋巴细胞介导的免疫应答表现为特异性T细胞克隆的迅速扩增性增殖。此外，记忆性反应也是少数T细胞克隆增殖的结果。这些增殖性淋巴细胞与老化的关系受到研究者的重视；其五，老化时T细胞与抗原呈递细胞的关系有待于澄清；其六，老化时T细胞活化时信号传导异常目前引起关注。

关键词：衰老老化 T细胞结构功能

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血管紧张素II对血管内皮细胞三种转录因子作用的影响

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中国病理生理杂志 2001年第3期17卷 196-199页

作者：王华斯琴王小明郭恒怡李素敏吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室北京100005

目的和方法 :分别采用凝胶迁移率改变法 (EMSA)和Western -blot的方法从基因转录水平探讨AngII对血管内皮细胞株ECV30 4的影响。结果 :(1)EMSA结果表明 ,AngII组核抽提物与 3种探针的结合活性均高于正常对照组 ,与NF -κB ,SP - 1和AP ... 详细信息

目的和方法 :分别采用凝胶迁移率改变法 (EMSA)和Western -blot的方法从基因转录水平探讨AngII对血管内皮细胞株ECV30 4的影响。结果 :(1)EMSA结果表明 ,AngII组核抽提物与 3种探针的结合活性均高于正常对照组 ,与NF -κB ,SP - 1和AP - 1探针结合活性分别为正常对照组的 10 98倍 ,3 97倍和 1 33倍 ,说明AngII对血管内皮细胞的作用机制可能与NF -κB ,SP - 1和AP - 1等转录因子的转录活性增加有关。进一步证实NF -κB ,AP -1在内皮细胞功能失调发病机制中的重要作用 ,同时发现转录因子SP - 1也可能参与此过程。 (2 )Western -blot结果表明 ,AngII处理后细胞核内NF -κB含量明显增加 ,提示AngII能够增加血管内皮细胞转录因子NF -κB的核转位 ,进一步验证了EMSA的结论。而细胞核内SP - 1和AP - 1的含量较对照组略有增加 ,提示AngII对SP - 1和AP - 1的核转位无明显影响而可能主要是促进转录因子与相应顺式调控元件的结合活性。结论 :AngII对内皮细胞 3种重要的转录因子的活性有不同程度的影响。

关键词：血管紧张素Ⅱ 转录因子血管内皮细胞 EMSA Western-blot 基因转录

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