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TNFα、oxLDL对单核细胞玻璃粘连蛋白mRNA表达的影响及其可能的信号转导途径

中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 99-100页

作者：李素敏王晓明邱劲斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

玻璃粘连蛋白(vitronectin)含有精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(PGD)序列和肝素结合区.单核细胞表面的玻璃粘连蛋白是血管内皮细胞表面β3整合素族的配基之一,二者的结合能够促进血液循环中的单核细胞和内皮细胞的粘附.一些致动脉粥样硬化因... 详细信息

玻璃粘连蛋白(vitronectin)含有精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(PGD)序列和肝素结合区.单核细胞表面的玻璃粘连蛋白是血管内皮细胞表面β3整合素族的配基之一,二者的结合能够促进血液循环中的单核细胞和内皮细胞的粘附.一些致动脉粥样硬化因素作用血管内皮细胞的同时,也作用于单核细胞,使其表面的玻璃粘连蛋白表达增高,从而成为动脉粥样硬化早期单核细胞与病变部位动脉内皮细胞粘附异常增强的机制之一.目的:是观察单核细胞株U937细胞在TNFα、oxLDL及蛋白激酶C抑制剂H-7、Calphostin和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂PD098059的作用下玻璃粘连蛋白基因的表达.方法:利用传代培养的单核细胞株U937进行实验,分为TNFα、ox-LDL刺激组、TNFα+H-7、TNFα+Calphostin、 TNFα+PD098059组、ox-LDL+H-7、ox-LDL+Calphostin、ox-LDL+PD098059组和正常对照组,分别作用18小时.玻璃粘连蛋白基因的mRNA表达用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测.结果:与正常对照组相比,TNFα、oxLDL可明显刺激U937细胞玻璃粘连蛋白mRNA的表达;蛋白激酶C抑制剂H-7和Calphostin显著抑制TNFα的诱导作用,而H-7和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂PD098059则可抑制oxLDL的诱导作用.结论:TNFα、oxLDL可能通过激活蛋白激酶C和/或丝裂素原活化蛋白激酶途径,启动单核细胞玻璃粘连蛋白基因的表达,从而参与了动脉粥样硬化的发生发展过程.

关键词：单核细胞 oxLDL mRNA 白细胞玻璃粘连蛋白 TNF

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混合稀土常乐及硝酸镧对大鼠大脑及海马皮质胆碱能M受体活性的影响

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中华预防医学杂志 2000年第7期34卷 29-31页

作者：左萍萍郭安臣北京市中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室

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编码人白细胞分化抗原5D4的基因表达

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 517-520页

作者：汪焱马凤蓉孟晓燕史耕先刘音赵方萄朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室北京100005

目的确证 5D4 cDNA是全长 cDNA，并为制备抗 5D4不同表位的单克隆抗体准备抗原。方法构建重组表达质粒 pGEX- 5X- 3- 5D4全长和 pGEX- 5X- 3- 5D4 5′侧 ,并转化大肠杆菌 DH5α ,使其表达 5D4分化抗原，用 Northern印迹分析和 RT- PCR检... 详细信息

目的确证 5D4 cDNA是全长 cDNA，并为制备抗 5D4不同表位的单克隆抗体准备抗原。方法构建重组表达质粒 pGEX- 5X- 3- 5D4全长和 pGEX- 5X- 3- 5D4 5′侧 ,并转化大肠杆菌 DH5α ,使其表达 5D4分化抗原，用 Northern印迹分析和 RT- PCR检测 5D4 mRNA在不同组织和免疫细胞株中的表达状况。结果 5D4 mRNA有 5种转录本，它们在不同组织有不同的表达， 1.9 kb RNA在所检测的 8种组织中只见于小肠组织和脾脏。 5D4 mRNA在不同免疫细胞的表达量不同。在大肠杆菌 DH5α中表达出了相对分子质量约为 66 000和 60 000的 5D4- GST融合蛋白。结论 1 846 bp 5D4 cDNA为全长 cDNA，并在大肠杆菌 DH5α中成功表达出了与 GST融合的 5D4分化抗原全长 (66 000)及其跨膜区侧氨基端蛋白质 (60 000)。

关键词：分化抗原5D4 基因表达

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雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用及其作用机制

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 224-226页

作者：王岚叶惟三惠玲刘霄郭燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织胚胎教研室北京100005

目的　研究雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用机制。方法　用雷公藤内酯酮 2 0 0μg/ (kg· d)喂服Wistar大鼠 ,8周后取材。做大鼠睾丸精子计数、精子活动度、睾丸切片的形态学观察 ,精核蛋白提取以及基因 cyclinD1和 Cdk4m RNA的原位... 详细信息

目的　研究雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用机制。方法　用雷公藤内酯酮 2 0 0μg/ (kg· d)喂服Wistar大鼠 ,8周后取材。做大鼠睾丸精子计数、精子活动度、睾丸切片的形态学观察 ,精核蛋白提取以及基因 cyclinD1和 Cdk4m RNA的原位杂交实验。结果　实验组大鼠睾丸精子数量为 (2 6 .43± 3.90 )× 10 6 / g,比对照组大鼠的精子计数 (4 1.15± 5 .5 1)× 10 6 / g明显降低 (P<0 .0 1) ,精子活动度为 (6 6 .0± 6 .8) % ,较对照组 (88.0± 2 .0 ) %极显著降低 (P<0 .0 0 1) ;cyclin D1和 Cdk4基因表达在精子细胞中显著上升。结论　雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用显著 ,作用机制可能主要是增加精子细胞 cyclin D1和 Cdk4基因的表达 ,抑制附睾精核蛋白的生物合成。

关键词：雷公藤内酯酮雄性抗受精作用精核蛋白避孕药

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6A8α-甘露糖苷酶表达对人B淋巴细胞3D5增殖反应的影响

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 529-532页

作者：赵方萄史耕先李琳朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室北京100005

目的观察 6A8α-甘露糖苷酶表达对人 B细胞株 3D5增殖反应的影响。方法以重组腺相关病毒颗粒为载体，将正义 6A8 DNA或反义 6A8 DNA转导入 EB病毒转化的人 B细胞株 3D5，用单抗 6A8a染色反应和 Con A结合试验确认 6A8α-甘露糖苷酶高表... 详细信息

目的观察 6A8α-甘露糖苷酶表达对人 B细胞株 3D5增殖反应的影响。方法以重组腺相关病毒颗粒为载体，将正义 6A8 DNA或反义 6A8 DNA转导入 EB病毒转化的人 B细胞株 3D5，用单抗 6A8a染色反应和 Con A结合试验确认 6A8α-甘露糖苷酶高表达和低表达。以野生型细胞及转导空载载体的细胞作对照， MTT法检测细胞对 B细胞生长因子（ BCGF）、葡萄球菌 Cowen I（ SAC）或 IL- 6刺激的增殖反应。结果转导正义 6A8 DNA的细胞高表达 6A8α-甘露糖苷酶，转导反义 6A8 DNA的细胞低表达 6A8α-甘露糖苷酶。转导正义 6A8 DNA的 3D5细胞在 SAC诱导下的增殖反应明显增强（ P< 0.05），但转导反义 6A8 DNA细胞的增殖反应无变化。对低分子量 BCGF或 IL- 6诱导的刺激，转导正义 6A8或反义 6A8对细胞的增殖反应均无影响。结论 6A8α-甘露糖苷酶活性增高使 3D5细胞对 SAC刺激的增殖反应增强。 6A8α-甘露糖苷酶活性变化对低相对分子质量 BCGF或 IL- 6诱导的增殖反应无影响。

关键词： 6A8 α-甘露糖苷酶 3D5 B细胞增殖反应

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大鼠免疫相关脑区的定位

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 525-528页

作者：高扬黄以光林嘉友王东林荣安中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室北京100005

目的定位免疫功能相关的中枢脑区。方法以大鼠脑内细胞因子 IL- 1β、 IL- 6、 IL- 2和 TGF-β 1的表达为观察指标 ,应用免疫组化 ABC法和免疫荧光法 ,比较不同免疫状态大鼠与正常对照大鼠脑内 IL- 1β、 IL- 6、 IL- 2和 TGF-β 1阳性... 详细信息

目的定位免疫功能相关的中枢脑区。方法以大鼠脑内细胞因子 IL- 1β、 IL- 6、 IL- 2和 TGF-β 1的表达为观察指标 ,应用免疫组化 ABC法和免疫荧光法 ,比较不同免疫状态大鼠与正常对照大鼠脑内 IL- 1β、 IL- 6、 IL- 2和 TGF-β 1阳性细胞的分布，以及细胞因子的表达与免疫状态的关系；分析 IL- 1β、 IL- 6和 TGF-β 1阳性细胞的细胞性质。结果（ 1）在免疫组和对照组大鼠多个脑区中观察到 IL- 1β、 IL- 6和 TGF-β 1阳性细胞的分布，但仅有下丘脑外侧区 (LH)和前杏仁核（ AA）内 IL- 1β、 IL- 6和 TGF-β 1的表达与大鼠是否被抗原免疫有关。（ 2）细胞双标记证明表达细胞因子的细胞为神经元。结论下丘脑外侧区和前杏仁核为参与神经免疫调节功能的特定脑区之一，该脑区的神经免疫调节功能是通过神经源性细胞因子介导实现的。

关键词：神经免疫调节细胞因子脑功能区

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人IgA Fc受体(CD89)的功能部位

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 521-524页

作者：任继辉石敏鹿张伟中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室北京100005

目的确定人 IgA Fc受体（ Fcα R, CD89）结合 IgA的功能部位。方法先采用 PCR及点突变 PCR技术获得不同片段的 Fcα R cDNA，再将各片段分别插入表达质粒 pET30a中，在大肠杆菌中表达出不同片段的受体，用一组能够结合 Fcα R的单克隆... 详细信息

目的确定人 IgA Fc受体（ Fcα R, CD89）结合 IgA的功能部位。方法先采用 PCR及点突变 PCR技术获得不同片段的 Fcα R cDNA，再将各片段分别插入表达质粒 pET30a中，在大肠杆菌中表达出不同片段的受体，用一组能够结合 Fcα R的单克隆抗体通过 Western印迹法鉴别所表达片段是否具有 Fcα R的功能部位。结果表达了 5种不同片段的 Fcα R，能够封闭 Fcα R的中和抗体仅与受体的远膜区（ EC1）结合。结论 Fcα R的功能部位位于 EC1上。

关键词： Fc受体 IgA 点突变

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大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白mRNA在生精周期中的表达

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 287-289页

作者：陈咏梅叶世隽黄玉苓郑文利中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织胚胎教研室北京100005

目的　研究大鼠睾丸支持细胞 (sertoli cell,SC)雄激素结合蛋白 (ABP) m RNA水平与曲细精管上皮周期的相关关系。方法　以地高辛标记的大鼠 ABP c DNA探针在 SD大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交 ,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定... 详细信息

目的　研究大鼠睾丸支持细胞 (sertoli cell,SC)雄激素结合蛋白 (ABP) m RNA水平与曲细精管上皮周期的相关关系。方法　以地高辛标记的大鼠 ABP c DNA探针在 SD大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交 ,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。结果　 ABP m RNA在 - 期维持低水平 ; - 期迅速升高 ,达到高峰 ; - 期骤然下降 ,但仍高于 - 期水平 , - 期又略有回升 ;随后迅速下降至 - 期水平。结论　 SC内 ABPm RNA水平具有明显的生精周期依赖性变化。

关键词：支持细胞雄激素结合蛋白睾丸 mRNA 生精周期

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一种快速简便的血浆脂蛋白分离方法

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中华病理学杂志 2000年第3期29卷 233-234页

作者：谷素敏李汇华佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学研究室北京100005

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基因重组人表皮生长因子在兔体、眼内的分布与排泄实验研究

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中国药理学通报 2000年第3期16卷 352-353页

作者：姜国辉郑连芳唐刚华张云郭彩云王树蕙中国医学科学院.中国协和医科大学北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院.中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所免疫学研究室北京100730

表皮生长因子(ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＥＧＦ)是相对分子量6040的小肽,生物作用极广,具有诱导上皮生长、刺激血管形成、抑制胃酸的分泌、调节内分泌、促进发育、加速伤口及溃疡愈合等作用,它的临床治疗学潜力正在... 详细信息

表皮生长因子(ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＥＧＦ)是相对分子量6040的小肽,生物作用极广,具有诱导上皮生长、刺激血管形成、抑制胃酸的分泌、调节内分泌、促进发育、加速伤口及溃疡愈合等作用,它的临床治疗学潜力正在研究。近年来已通过基因工程在大肠杆菌或酵母中制备大量ＥＧＦ,目前有关ＥＧＦ的基础与临床研究国外报道较多,但有关ＥＧＦ在体内的分布、代谢、排泄及其药代动力学过程研究较少,国内尚未见报道。本文对国产ＥＧＦ在动物体内及眼内的分布、排泄等做了较为系统的研究,为今后的临床应用提供必要的参考资料。1　材料表皮生长因子,批号9605,中国医学科学院基础医学研究所和桂林金科实业总公司北京

关键词：表皮生长因子碘标记分布排泄

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