检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学（C辑） 2000年第6期30卷 621-626页

作者：郑勇邱长春周文郁侯淑琴朱席琳郑华清赵立娟李国江中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京市房山区第一医院北京102400

原发性高血压（ｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＥＨ）被认为是多基因、多因素相互作用引起的复杂疾病。过去１０年中，高血压相关基因研究虽然已取得令人高兴的进展，但究竟有多少基因参与发病，及其之间的相互作用仍... 详细信息

原发性高血压（ｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＥＨ）被认为是多基因、多因素相互作用引起的复杂疾病。过去１０年中，高血压相关基因研究虽然已取得令人高兴的进展，但究竟有多少基因参与发病，及其之间的相互作用仍不清楚。以北京房山区高血压群体及家系为研究对象，应用全基因组扫描技术，通过病例－对照相关研究和９８对受累同胞对连锁分析，筛查鉴定与汉族原发性高血压相关联的新基因位点。病例－对照群体分析结果表明，位于１号染色体长臂１ｑ３２区的Ｄ１Ｓ２４９微卫星多态性位点与汉族原发性高血压相关联，χ＾２＝１４．６，Ｐ＝０．００２。该位点存在１２种等位基因，Ａ９等位基因（１８１ｂｐ）频率在高血压组较对照组明显升高，两组间频率为１３．６％ｖ．ｓ２．７％，χ＾２＝６．３０，Ｐ＝０．０１（ＯＲ＝４．５７，９５％ＣＩ＝１．

关键词：原发性高血压全基因组扫描 D1S249位点

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srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第4期16卷 443-447页

作者：罗寿青郑德先刘彦信李董饶青吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9... 详细信息

从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9.经过 2轮筛选 ,获得了纯化的重组病毒 ,再用重组病毒感染昆虫细胞 ,Western印迹检测证明 srh M- CSFR得到了表达 ,它是分泌到上清液中的糖基化蛋白 .Western印迹分析了不同时间点的 srh M- CSFR表达情况 ,结果表明 srh M- CSFR的表达在 96～ 1 2 0 h时达到最大 .srh M- CSFR的产量约为 1 mg/L,EIA法进行配基结合活性分析表明 ,srh M- CSFR与 M- CSF结合的解离常数为 5nmol/L.

关键词： srhM-CSFR 杆状病毒表达系统配基综合活性

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肿瘤坏死因子α和轻度氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞PAI-1活性的影响及机制

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 122-122页

作者：李晓冬朱广瑾祖淑玉中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所!北京100005

目的和方法:自本世纪八十年代以来,纤维蛋白原及纤维蛋白形成和降解都参与动脉粥样硬化的发生、发展已逐渐为人们认识.在血管系统中,纤维蛋白的降解过程主要由纤溶酶原激活物(t-PA)启动.纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)是t-PA的生理性抑制... 详细信息

目的和方法:自本世纪八十年代以来,纤维蛋白原及纤维蛋白形成和降解都参与动脉粥样硬化的发生、发展已逐渐为人们认识.在血管系统中,纤维蛋白的降解过程主要由纤溶酶原激活物(t-PA)启动.纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)是t-PA的生理性抑制剂,和t-PA结合后可抑制其活性,是纤溶系统功能活性的重要调节因子.体内外实验均表明,在炎症及动脉粥样硬化相关致病因子的作用下,PAI-1活性及浓度显著增高.PAI-1活性增高影响了血浆凝血和纤溶系统的平衡,易形成血栓.动脉硬化致病因子致PAI-1浓度及活性增高可能是动脉粥样硬化发生发展的重要环节.本试验采用肿瘤坏死因子α(TNFα)和轻度氧化低密度脂蛋白(mmLDL)作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并用PKC抑制剂(H7和Staurosporine)和MAPKK抑制剂(PD98059)进行阻断,用发色底物显色法检测PAI-1的活性.结果:观察到在无刺激物时PAI-1活性很低,但加入TNFα和mmLDL后PAI-1活性显著增高,并呈现一定的时间、剂量依赖特性.PKC抑制剂H7不能抑制mmLDL的刺激作用,Staurosporine能部分抑制TNFα的刺激作用.PD98059几乎能完全抑制PAI-1的基础活性,并能够完全抑制TNFα导致的人脐静脉内皮细胞分必的PAI-1活性增高.结论:不同的刺激物作用于内皮细胞,导致的PAI-1活性增高,其信号传导途径不尽相同.MAPK活化可能是内皮细胞合成PAI-1的最后一个关键步骤,为动脉粥样硬化发生、发展及防治提供了理论基础和新的思路.

关键词：人脐静脉内皮细胞氧化低密度脂蛋白 PAI-1 肿瘤坏死因子α

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发展中的酵母杂交体系

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生命科学 2000年第1期12卷 34-36页

作者：张树民陈英碚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京１００００５

酵母杂交体系包括双杂交、反向双杂交和三杂交等体系。双杂交作为一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用的方法；已经得到了广泛的应用。而反向双杂交和三杂交系统是在双杂交基础上发展起来的两种新技术。反向双杂交除了筛选突变株，以... 详细信息

酵母杂交体系包括双杂交、反向双杂交和三杂交等体系。双杂交作为一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用的方法；已经得到了广泛的应用。而反向双杂交和三杂交系统是在双杂交基础上发展起来的两种新技术。反向双杂交除了筛选突变株，以获取蛋白质结合的信息外，还能发现可导致已知蛋白质间特异相互作用发生解离的肽类或其他小分子物质，进一步分析蛋白质间作用位点、调控。三杂交系统则在蛋白质与小分子配基之间以及多种蛋白质之间相互作用中具有重要的应用价值。

关键词：双杂交系统反向双杂交系统三杂交系统蛋白质相互作用

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合成的GPI-Pr基因及其与PNH的关系

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国外医学（分子生物学分册） 2000年第2期22卷 109-111页

作者：刘海丽中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最... 详细信息

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最新研究进展。

关键词： GPI-锚 GPI-Pr PNH 血红蛋白系统

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化学趋化因子受体在HIV感染中的作用及其在AIDS治疗中的应用价值

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生命科学 2000年第2期12卷 76-79页

作者：洪梅北京100005 中国医学科学院基础医学研究所!中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

化学趋化因子受体作为协同受体，为人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）进入细胞所必需。其中ＣＸＣＲ４被亲Ｔ细胞的病毒株利用，而ＣＣＲ５被亲巨噬细胞的病毒株利用，它们是大多数病毒株利用的协同受体。协同受体和ＣＤ４一起形成复合受体... 详细信息

化学趋化因子受体作为协同受体，为人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）进入细胞所必需。其中ＣＸＣＲ４被亲Ｔ细胞的病毒株利用，而ＣＣＲ５被亲巨噬细胞的病毒株利用，它们是大多数病毒株利用的协同受体。协同受体和ＣＤ４一起形成复合受体，ｇｐ１２０与之结合后发生构象改变，使ｇｐ４１暴露出来；引起膜的融合。ＨＩＶ协同受体的发现为治疗艾滋病开辟了新的途径。利用趋化因子拮抗剂、单克隆抗体和天然配体封闭趋化因子受体可阻止ＨＩＶ的感染；化学趋化因子受体可以用作靶向蛋白将杀伤性基因导入ＨＩＶ－１感染的细胞；有ＨＩＶ抗性的ＣＣＲ５等位基因可以通过ｅｘｖｉｖｏ法在体内表达；此外，通过基因操作阻止趋化因子受体的表达；也能抑制ＨＩＶ的感染。

关键词：化学趋化因子 HIV-1 治疗 AIDS

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TNFα、LPS诱导EA、hy926细胞一氧化氮合酶基因的转录

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 99-99页

作者：斯勤王小明邱劲李素敏李健郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

一氧化氮(NO)由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成.诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是NOS三种亚型中催化产生NO较多的一种,可被多种炎症因子诱导,而诱导环节多在基因转录水平.目的:观察肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)对内皮细胞系***92... 详细信息

一氧化氮(NO)由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成.诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是NOS三种亚型中催化产生NO较多的一种,可被多种炎症因子诱导,而诱导环节多在基因转录水平.目的:观察肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)对内皮细胞系***926细胞iNOS基因转录的影响,并探讨蛋白激酶C(PKC)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的作用. 方法:传代培养的***926细胞用TNFα,LPS处理18小时,并同时加入或不加蛋白激酶C抑制剂H-7、Calphostin和丝裂素原活化蛋白激酶抑制剂PD098059;人iNOS(hiNOS)基因表达以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测.结果:200 IU/mL TNFα、100 ng/mL LPS均明显诱导***926细胞hiNOS基因的表达;H-7、Calphostin和PD098059可抑制TNFα诱导的hiNOS基因的表达.但PKC和MAPK抑制剂对LPS诱导的抑制效应均不显著.结论:TNFα诱导hiNOS基因的表达需要PKC和MAPK的活化,而LPS诱导hiNOS基因的表达可能还涉及其它蛋白激酶的途径.

关键词：细胞基因转录 EA LPS TNF hy926

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HMGI高表达促进单核细胞PDGF-B链基因转录

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 98-98页

作者：王小明邱劲李素敏李健沈传陆斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

血管内皮细胞与循环血细胞,如单核细胞之间的相互作用,在动脉粥样硬化等重要心血管疾病发生和发展过程中具有极其重要的意义.众多的动脉粥样硬化相关因素也同时作用于这些细胞.我们曾发现高迁移率蛋白Ⅰ(HMGⅠ)能促进ECV304细胞核转录因... 详细信息

血管内皮细胞与循环血细胞,如单核细胞之间的相互作用,在动脉粥样硬化等重要心血管疾病发生和发展过程中具有极其重要的意义.众多的动脉粥样硬化相关因素也同时作用于这些细胞.我们曾发现高迁移率蛋白Ⅰ(HMGⅠ)能促进ECV304细胞核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合.

关键词：高表达 PDGF-B 基因转录 HMGI

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AngⅡ、mm-LDL和TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因转录调控的影响

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 100-100页

作者：李健王小明斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

目的:从基因转录水平探讨AngⅡ、mm-LDL及TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因表达的影响.方法:(1)以GAPDH为内参照,用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测10-6 mol/L AngⅡ、100 μg/mL mm-LDL及200 U/mL TNFα作用于ECV304细胞18 h后各实... 详细信息

目的:从基因转录水平探讨AngⅡ、mm-LDL及TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因表达的影响.方法:(1)以GAPDH为内参照,用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测10-6 mol/L AngⅡ、100 μg/mL mm-LDL及200 U/mL TNFα作用于ECV304细胞18 h后各实验组PDGF-B链基因mRNA水平,分别为对照组的1.5倍、2.0倍和1.3倍,提示AngⅡ、mm-LDL及TNFα在转录水平对ECV304细胞PDGF-B链基因的表达有促进作用.

关键词：细胞荧光素酶表达量报告基因质粒 PDGF-B TNF mm-LDL Ang ECV304 基因转录

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PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合A-T丰富区的初步分离和鉴定

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 98-98页

作者：王小明邱劲李健沈传陆李素敏斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合... 详细信息

一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合,影响多种基因的转录.目的:分离和鉴定PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合的A-T丰富区,并初步分析其功能.方法:DNA重组技术和凝胶迁移率改变法(EMSA).结果:重组人HMGI蛋白(rHMGI)可与PDGF-B链基因上游序列结合.在-1758/+43 bp片段内至少存在两个与HMGI结合的A-T丰富区,其中一个位于-190/+43 bp片段内,可能是涉及TATA盒在内的TTTATAAA,另一个位于-1304/-990 bp内,该区有两个TTTATAAA序列.被蛋白激酶C和CDC2激酶磷酸化的rHMGI与-1304/990 bp片段内A-T丰富区的结合活性明显减低,但未观察到PKC磷酸化明显减弱rHMGI与-190/+43 bp片段的结合.在肿瘤坏死因子α(TNFα),弱氧化低密度脂蛋白(mmLDL)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的ECV304核抽提物中,加入低剂量的rHMGI显著增强核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合,并呈一定的剂量依赖性.结论:高迁移率蛋白Ⅰ可与PDGF-B链基因上游一个或数个A-T丰富区结合,促进转录因子NF-κB与SSRE的相互作用,并可能受蛋白激酶C和CDC2激酶的磷酸化调节.这对深入阐明致动脉粥样硬化相关因素诱导PDGF-B链基因转录的机制具有重要意义.

关键词：上游序列基因 HMGI PDGF-B A-T

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