检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2003年第6期25卷 650-654页

作者：李文辉张云王树惠刘力杨帆中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原室北京100005

目的构建表达狂犬病毒CVS-N2C毒株糖蛋白(GP)基因的复制缺陷型重组腺病毒,作为筛选狂犬病毒基因工程疫苗的基础。方法用大肠杆菌细胞内同源重组技术构建重组病毒;NorthernblotWesternblot和免疫荧光抗体等方法鉴定重组病毒。结果重组病... 详细信息

目的构建表达狂犬病毒CVS-N2C毒株糖蛋白(GP)基因的复制缺陷型重组腺病毒,作为筛选狂犬病毒基因工程疫苗的基础。方法用大肠杆菌细胞内同源重组技术构建重组病毒;NorthernblotWesternblot和免疫荧光抗体等方法鉴定重组病毒。结果重组病毒具有典型的病毒形态;病毒基因组稳定;GP基因可被转录;重组病毒表达的GP蛋白相对分子质量为66000,与天然GP相对分子质量相符表达的GP蛋白可被兔抗狂犬病毒免疫血清特异性识别;小鼠免疫-攻击试验可保护87.5%～100%动物。结论成功地构建了表达狂犬病毒CVS-N2C毒株GP基因的复制缺陷型重组腺病毒,并表现了良好的免疫效果。

关键词：重组腺病毒狂犬病毒 CVS-N2C 复制缺陷型

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阿尔茨海默病患者血清中巨噬细胞集落刺激因子

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中国医学科学院学报 2002年第3期24卷 298-301页

作者：孔庆利张建民张振馨葛平江徐亚君秘汝顺赵玉华隋延萍何维中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室北京100005

目的寻找阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)患者早期诊断和监视病情动态变化的血清检测指标。方法检测70例AD患者、52例年龄匹配的健康人(对照组)和22例血管性痴呆(VAD)对照患者血清中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的水平,以及32例AD... 详细信息

目的寻找阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)患者早期诊断和监视病情动态变化的血清检测指标。方法检测70例AD患者、52例年龄匹配的健康人(对照组)和22例血管性痴呆(VAD)对照患者血清中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的水平,以及32例AD患者和20例年龄匹配的健康人(对照组)血清中IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并结合AD患者的病情进行分析对比。结果AD患者组血清中M-CSF水平显著高于对照组(P<0.01)和VAD患者组(P<0.05);血清M-CSF水平主要在AD早期(轻、中度痴呆阶段)升高,在AD晚期(重度痴呆)则处于正常水平。AD患者组血清中IL-1β水平明显高于对照组(P<0.05),但血清中TNF-α和IL-6处于正常水平。结论血清M-CSF水平的检测是一种方便、敏感的方法,可望作为AD患者早期诊断的生物学标志。

关键词：阿尔茨海默病巨噬细胞集落刺激因子早期诊断 AD

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一种新的红细胞源性降压因子的作用机制

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科学通报 2000年第7期45卷 743-751页

作者：张晓春文允镒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理室北京100005

研究了一种来自红细胞的新的内源性降压因子（ＥＤＤＦ）的降压机制，重点探讨其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞浆游离钙离子及核内钙离子转运的影响，以ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋荧光探针，采用激光扫描共聚焦显微镜观察人脐... 详细信息

研究了一种来自红细胞的新的内源性降压因子（ＥＤＤＦ）的降压机制，重点探讨其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞浆游离钙离子及核内钙离子转运的影响，以ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋荧光探针，采用激光扫描共聚焦显微镜观察人脐静脉ＶＳＭＣ（ＨＵＶ），钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）和正常对照Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜培养的ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）「Ｃａ＆２＋」ｉ及（「Ｃａ＾２＿」ｎ）的变化；

关键词：红细胞降压因子 VSMC 钙离子内源性降压因子

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硒及维生素E抑制补体-中性粒细胞活化反馈机制参与炎症应答的调控

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中国医学科学院学报 2000年第6期22卷 580-584页

作者：侯健存吴元德凌允礼中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理室北京100005

笔者发现并验证补体介导炎症损伤的机制是补体活化激活中性粒细胞（ PMN）呼吸爆发所释放的活性氧自由基（ ROS）能再次活化补体，在补体- PMN- ROS之间形成的这一相互反馈活化、增强炎症应答的辅助机制有其特殊的参与调节炎症应答的作... 详细信息

笔者发现并验证补体介导炎症损伤的机制是补体活化激活中性粒细胞（ PMN）呼吸爆发所释放的活性氧自由基（ ROS）能再次活化补体，在补体- PMN- ROS之间形成的这一相互反馈活化、增强炎症应答的辅助机制有其特殊的参与调节炎症应答的作用，即补体活化的抑制或 ROS的清除皆能阻滞此活化反馈机制而下调炎症应答。为验证此设想，笔者选择补体活化抑制剂亚硒酸钠（ SS）、抗氧化剂维生素 E（ VitE）与甘草类黄酮（ GF）抑制补体- PMN- ROS活化反馈机制，在试管实验中利用化学发光技术，在 PMN及补体混合培养液中以佛波酯（ TPA）或菊糖单独活化 PMN或补体后检测活性氧的产生量及补体的活化程度；并在小鼠体内实验中观察肺、肝及皮肤血管炎模型的发生率。结果证实此活化反馈上调炎症应答机制的存在；补体活化的抑制或 ROS的清除皆能抑制上调炎症应答，防止血管炎的发生，其发生率可从不服药组的 100％降至各剂量服药组的 20％～ 57％。本研究不但为阐明炎症反应的发生和调控机制提供了新的证据，而且进一步提示 PMN呼吸爆发产生 ROS是炎症反应组织损伤的生理及病理过程中的关键，因此有可能使用营养素抗氧化剂（ nutrient antioxidants）来调节生物炎症反应。以往在一次流行性出血热疫区选择 80例患者仅以亚?

关键词：补体活化反馈炎症应答调控亚硒酸钠维生素E

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积极开展遗传病的预防工作

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中华儿科杂志 1997年第12期35卷 619-620页

作者：施惠平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

积极开展遗传病的预防工作施惠平近年来，随着医学的发展、妇幼保健工作的开展、预防接种的普及，我国营养不良性疾病、感染性疾病和传染病的发病率明显下降，遗传性疾病比例上升，预防遗传性疾病发病的问题日益重要。全国统计资料表明... 详细信息

积极开展遗传病的预防工作施惠平近年来，随着医学的发展、妇幼保健工作的开展、预防接种的普及，我国营养不良性疾病、感染性疾病和传染病的发病率明显下降，遗传性疾病比例上升，预防遗传性疾病发病的问题日益重要。全国统计资料表明，目前我国有残疾人约５１００多万，...

关键词：遗传病诊断预防

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同时显示杂交信号和荧光R带的FISH技术

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中华医学遗传学杂志 1998年第2期15卷 108-110页

作者：赵非非高春生刘国仰杨焕明程在玉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

目的建立直接将ＤＮＡ探针定位于显示Ｒ带染色体上的简便方法。方法正常人外周血淋巴细胞培养６７小时，同时加入Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８和ＢＵｄＲ继续培养５～６小时，常规方法制片。标本浸于２×ＳＳＣ中，在距其１０ｃＭ的２... 详细信息

目的建立直接将ＤＮＡ探针定位于显示Ｒ带染色体上的简便方法。方法正常人外周血淋巴细胞培养６７小时，同时加入Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８和ＢＵｄＲ继续培养５～６小时，常规方法制片。标本浸于２×ＳＳＣ中，在距其１０ｃＭ的２０Ｗ紫外灯下７５℃照射２０分钟。此标本以生物素标记的ｃｏｓｍｉｄ和ＹＡＣ克隆以及ｐＢａｍＸ７进行原位杂交，Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ和Ａｎｔｉａｖｉｄｉｎ进行信号的检测与放大，ＰＩ复染。于Ｏ１ｙｍｐｕｓＢＸ６０型荧光显微镜下，通过ＷＩＢ滤光镜同时观察显示Ｒ带的染色体和杂交信号。结果在显微镜下，黄绿色杂交信号直接定位于红色并显示Ｒ带的染色体上。

关键词：荧光原位杂交荧光R带染色体定位医学遗传学

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用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘

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中华医学遗传学杂志 1995年第5期12卷 295-297页

作者：曾瑄赵蓥高春生赵非非刘国仰杨焕明程在玉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘曾瑄，赵蓥，高春生，赵非非，刘国仰，杨焕明，程在玉荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｔｉｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前广泛应用的一种非同位素原位杂交技术，在... 详细信息

用人鼠杂交细胞株探针进行染色体描绘曾瑄，赵蓥，高春生，赵非非，刘国仰，杨焕明，程在玉荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｔｉｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前广泛应用的一种非同位素原位杂交技术，在基因定位、标记染色体的识别、染色体...

关键词：染色体描绘人鼠杂交细胞株探针

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利用外显子捕获技术从基因组片段中分离表达序列

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中华医学遗传学杂志 1996年第5期13卷 280-283页

作者：张秀清虞方宋莉贾开亮曲晓燕叶珏张小晓李明月戴理但美霞刘国仰黄尚志杨焕明罗会元中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

本实验旨在以外显子捕获（ｅｘｏｎ－ｔｒａｐｐｉｎｇ）技术从人类５号染色体短臂（５ｐ）＂猫叫综合征＂区域分离表达序列。将来自５ｐ的基因组片段克隆进ｐＳＰＬ３剪接载体，用以转染ＣＯＳ－７细胞。经ＲＴ－ＰＣＲ扩增后，以ＵＤ... 详细信息

本实验旨在以外显子捕获（ｅｘｏｎ－ｔｒａｐｐｉｎｇ）技术从人类５号染色体短臂（５ｐ）＂猫叫综合征＂区域分离表达序列。将来自５ｐ的基因组片段克隆进ｐＳＰＬ３剪接载体，用以转染ＣＯＳ－７细胞。经ＲＴ－ＰＣＲ扩增后，以ＵＤＧ法克隆剪接产物，并进行基因组来源、组织表达特异性及序列分析等鉴定。结果表明，基因组片段在实验系统中能被有效剪接，并得到了确为５ｐ来源的表达序列。证明外显子捕获技术能有效用于表达序列的筛选，但现有的剪接载体仍有较为严重的隐含剪接问题。

关键词：外显子捕获剪接载体表达序列

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恶性疟原虫新的PDZ包含蛋白编码区基因的分离与克隆

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中国医学科学院学报 2001年第5期23卷 458-461页

作者：李会良王恒中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原学室

目的分离、克隆一种新的恶性疟原虫PDZ结构域包含蛋白(PfPCP)编码区基因,并初步研究其红内期表达。方法分析恶性疟原虫基因组3号染色体数据库,设计特异的引物,利用RT-PCR从恶性疟原虫海南株红内期mRNA扩增PfPCP编码区基因利用生物信... 详细信息

目的分离、克隆一种新的恶性疟原虫PDZ结构域包含蛋白(PfPCP)编码区基因,并初步研究其红内期表达。方法分析恶性疟原虫基因组3号染色体数据库,设计特异的引物,利用RT-PCR从恶性疟原虫海南株红内期mRNA扩增PfPCP编码区基因利用生物信息学相关软件分析所扩增的基因;利用Western印迹法分析PfPCP在红内期的表达。结果从恶性疟原虫mRNA扩增到的PfPCP编码区基因长度为2076bpcDNA克隆,编码蛋白长为691氨基酸,具有典型的PDZ结构域。Western印迹显示,该基因在红内期裂殖体期特异性表达。结论获得新的恶性疟原虫PfPCP编码区基因,该基因在恶性疟原虫红内期裂殖体期特异性表达。

关键词：恶性疟原虫 PDZ结构域包含蛋白分离克隆

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染色质纤维荧光原位杂交

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中华医学遗传学杂志 1996年第6期13卷 366-367页

作者：赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

染色质纤维荧光原位杂交曾赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｅｃｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前最重要的基因物理定位方法之一。但是其分辨率受到分裂期染色体高度... 详细信息

染色质纤维荧光原位杂交曾赵非非苏光高春生邹颖刘国仰黄尚志杨焕明荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｅｃｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是目前最重要的基因物理定位方法之一。但是其分辨率受到分裂期染色体高度凝聚的限制，最高分辨率约为１Ｍｂ［...

关键词：染色质纤维荧光原位杂交

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