检索结果-内蒙古大学图书馆

中国新药杂志 2001年第11期10卷 823-825页

作者：刘玉琴高进薛克勋赵雪梅顾蓓李建生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

目的 :观察金龙胶囊 (JLC)对小鼠子宫颈癌U14生长和自发转移的抑制作用。方法 :将U14癌细胞移植于 615小鼠背部腋窝皮下 ,进行金龙胶囊不同剂量治疗效果的观察。结果 :1和 0 .75 g·kg-1体重组抑瘤率相似 ,均在 2 6%～ 2 9%。移植... 详细信息

目的 :观察金龙胶囊 (JLC)对小鼠子宫颈癌U14生长和自发转移的抑制作用。方法 :将U14癌细胞移植于 615小鼠背部腋窝皮下 ,进行金龙胶囊不同剂量治疗效果的观察。结果 :1和 0 .75 g·kg-1体重组抑瘤率相似 ,均在 2 6%～ 2 9%。移植自发转移率 1g·kg-1体重组为 5 3 .8%～ 66.7% ;0 .75g·kg-1体重组为 4 4 .5 %～ 5 8.3 %。结论 :JLC对自发转移有明显抑制作用。

关键词：金龙胶囊子宫颈癌转移

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疟疾DNA疫苗免疫接种方法对小鼠体液免疫应答的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第1期21卷 50-54页

作者：石宁董敏阴彬徐蓓何湘云李晋芳刘宝丰王恒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病原学室北京100005 山西医科大学

目的　探讨DNA疫苗免疫接种方法对抗体水平及辅助性T细胞极化的影响。方法　利用DNA重组技术构建恶性疟原虫红内期多表位DNA疫苗 ,通过基因枪、肌肉注射、皮内注射等接种方法免疫小鼠 ,经ELISA测定该疫苗诱导产生特异性抗体的总量、亚... 详细信息

目的　探讨DNA疫苗免疫接种方法对抗体水平及辅助性T细胞极化的影响。方法　利用DNA重组技术构建恶性疟原虫红内期多表位DNA疫苗 ,通过基因枪、肌肉注射、皮内注射等接种方法免疫小鼠 ,经ELISA测定该疫苗诱导产生特异性抗体的总量、亚型及表位特异性 ,比较不同免疫接种方法对DNA疫苗诱导产生抗体及辅助性T细胞极化的影响。结果　接种DNA疫苗的小鼠经 3次免疫后都产生了较高滴度的抗重组蛋白抗体。基因枪组单位DNA诱导抗体滴度是肌注组的 12 0倍。基因枪组小鼠血清抗体以IgG1升高为主 ,而肌注和皮内注射组小鼠血清抗体均以IgG2a升高为主。各免疫接种组诱导产生的抗表位多肽抗体特异性相同。结论　不同免疫接种方法不但会影响血清总免疫球蛋白水平 ,还能使辅助性T细胞向不同方向极化。肌注和皮内注射诱导产生以IgG2a为主的TH1型免疫应答 ,基因枪接种诱导产生以IgG1为主的TH2型免疫应答。DNA疫苗的摄取方式可明显影响辅助性T细胞的极化。

关键词： DNA疫苗辅助性T细胞抗体亚类基因枪疟疾

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表皮生长因子眼药水的毒理学研究

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 137-140页

作者：叶益新黄秉仁莫冬海中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005 Department of Biochemistry and Molecular Biology Institute of Basic Medicial Sciences Corporation of JinKeLong

目的研究表皮生长因子 (EGF)眼药水的急性、长期毒性及其他副作用。方法按《新药毒理学研究指导原则》的要求和方法进行动物实验。结果经全身或局部，短期或长期用药观察，均未发现 EGF眼药水的毒性和其他副作用。结论符合新药指导... 详细信息

目的研究表皮生长因子 (EGF)眼药水的急性、长期毒性及其他副作用。方法按《新药毒理学研究指导原则》的要求和方法进行动物实验。结果经全身或局部，短期或长期用药观察，均未发现 EGF眼药水的毒性和其他副作用。结论符合新药指导原则，表明 EGF眼药水用于滴眼是安全的。

关键词：表皮生长因子眼药水急性毒性长期毒性副作用毒理学

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网上实验室克隆与鉴定食管癌相关基因ECRG-4

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第3期33卷 257-261页

作者：毕美霞韩卫东陆士新中国人民解放军总医院基础医学研究所分子生物室!北京100853 北京100021 中国医学科学院!中国协和医科大学肿瘤研究所病因室

利用生物信息学 ,探索网上克隆基因与鉴定基因的新方法。以因特网为平台 ,数据库为试验材料 ,各种软件为工具组成网上实验室 ,是人类基因组计划带来的实验技术革命。利用网上实验室以食管癌相关基因E CRG 4的 97bpEST为基础 ,成功克隆... 详细信息

利用生物信息学 ,探索网上克隆基因与鉴定基因的新方法。以因特网为平台 ,数据库为试验材料 ,各种软件为工具组成网上实验室 ,是人类基因组计划带来的实验技术革命。利用网上实验室以食管癌相关基因E CRG 4的 97bpEST为基础 ,成功克隆并鉴定了该基因。结果显示ECRG 4近似cDNA全长序列为 772bp ,其中含有一 44 7bp的完整阅读框 ,编码 148个氨基酸。氨基酸序列相似性分析表明ECRG 4与细胞膜上的免疫球蛋白超家族具有 31%同源性。该基因定位于染色体 2 q14.1～ 14.3。组织分布表明ECRG 4在正常食管、膀胱组织中表达明显高于相应的癌组织。采用辐射杂交细胞系GeneBridge 4RH嵌板作染色体定位进行初步验证 ,所得结果与网上克隆完全一致。研究提示 ,利用网上实验室克隆鉴定基因 ,是一种简便、精确的好方法。ECRG 4可能是一个在细胞癌变过程中具有非常重要意义的基因

关键词：网上实验室基因克隆 ECRG-4

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Reversing drug resistance in the ovarian carcinoma cell line SKOV3/mdr1 in vitro by antisense oligodeoxynucleotides

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Chinese Medical Journal 2001年第9期114卷 33-36,105页

作者：潘凌亚童英金滢周生张毅杨秀玉毛宁中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科北京100730 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学实验室北京100850

Objective　To investigate the effect of multidrug resistance gene 1 (mdr1) antisense oligodeoxynucleotides (ODNs) on reversing multidrug resistance in the drug resistant ovarian carcinoma cell line SKOV3/mdr1. Methods　The ovarian carcinoma cell line SKOV3 transducted with a human multidrug resistance gene (mdr1) served as the drug resistant model (SKOV3/mdr1). The mdr1 antisense ODNs was transfected into SKOV3/mdr1 cells while mediated by lipofectamine. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to measure the expression and the amount of the mdr1 mRNA in the cells. The positive rate and function of the mdr1 gene product P-glycoprotein (Pgp) in the mdr1 antisense ODNs treated SKOV3/mdr1 cells were determined by flow cytometry and rhodamine 123 efflux. Drug resistance in the SKOV3/mdr1 cell line was observed by MTT assay and cell colony culture. Results　The mdr1 mRNA level was decreased to about 60% of that of β-actin after mdr1 antisense ODNs treatment. The Pgp positive rate of mdr1 antisense ODNs treated SKOV3/mdr1 cells decreased from 100% to 52.6% (P<0.01). The intracellular rhodamine 123 retention was increased from 9.1% to 33.8% (P<0.01). The chemoresistance to taxol decreased to 58% of SKOV3/mdr1 with mdr1 antisense ODN treatment. Compared with SKOV3/mdr1 cells in the control group, under a certain range of drug concentrations, the number of drug resistance colonies in mdr1 antisense ODNs treated SKOV3/mdr1 cells for taxol and doxorubicin decreased by 8.6±0.8 fold and 3.1±0.6 fold, respectively. Some non-specific functions during oligodeoxyncleotide treatment was also detected. Conclusion　mdr1 expression in the SKOV1/mdr1 cell line was partially inhibited after mdr1 antisense ODNs treatment at the mRNA and protein level, increasing the chemotherapy sensitivity of this drug resistant ovarian carcinoma cell line.

关键词： oligodeoxynucleotides antisense · ovarian · neoplasma · multiple drug resistance · gene mdr1

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尼古丁对脐静脉内皮细胞蛋白激酶C和Ras蛋白活性及胞浆钙浓度的影响

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基础医学与临床 2001年第5期21卷 428-431页

作者：周卫辉陈祥银中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化 ,用γ 32 P ATP掺入法检测PKC活性 ,用GST RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含... 详细信息

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化 ,用γ 32 P ATP掺入法检测PKC活性 ,用GST RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含量。观察到 (1～ 5 ) 10 - 4 mol L尼古丁使人脐静脉内皮细胞 [Ca2 + ]i 迅速增加 ,峰值约超过基础值 5 0 %～ 2 0 0 % ,钙通道阻滞剂尼莫地平可拮抗尼古丁的此种效应 ;10 - 4 mol L尼古丁作用 1～ 12h后胞浆PKC活性明显降低 ;而胞膜PKC活性则升高。 10 - 4 ～ 10 - 3 mol L尼古丁作用于人脐静脉内皮细胞 10～ 30min可使活化的Ras蛋白含量增加。以上结果提示尼古丁可使人脐静脉内皮细胞 [Ca2 + ]i

关键词：尼古丁钙蛋白激酶C Ras蛋白内皮细胞

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阿尔茨海默病分子病理机制研究进展

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中华老年医学杂志 2001年第2期20卷 151-153页

作者：周礼梁平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理室北京市100005

β-淀粉样肽构成的淀粉样斑块和过度或异常磷酸化的tau蛋白构成的神经纤维病变是阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的主要病理改变，其形成机制至今仍不清楚。近年来,随着分子生物学实验技术的广泛应用,AD分子病理机制的研究也... 详细信息

β-淀粉样肽构成的淀粉样斑块和过度或异常磷酸化的tau蛋白构成的神经纤维病变是阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的主要病理改变，其形成机制至今仍不清楚。近年来,随着分子生物学实验技术的广泛应用,AD分子病理机制的研究也取得了较大进展。

关键词：阿尔茨海墨病分子病理机制淀粉样斑块 β-分泌酶神经纤维病变

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核转录因子NF-κB在血管内皮细胞组织因子表达中的作用

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中国医学科学院学报 2001年第3期23卷 251-254页

作者：高咏梅朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

目的探讨核转录因子NF-κB在肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管内皮细胞组织因子（TF）表达中的作用。方法用发色底物法测定血管内皮细胞表面TF活性。分别采用凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)和Western印迹法检测... 详细信息

目的探讨核转录因子NF-κB在肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管内皮细胞组织因子（TF）表达中的作用。方法用发色底物法测定血管内皮细胞表面TF活性。分别采用凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)和Western印迹法检测血管内皮细胞核转录因子NF-κB的DNA结合活性和含量。结果100 U/ml TNF-α、10-6 mol/l AngⅡ作用下，内皮细胞表面TF 活性明显增高，分别较对照增高1.65 倍和1.61 倍。TNF-α、AngⅡ作用组核抽提物与NF-κB特异DNA序列结合活性分别为正常对照组的2.07倍和3.89倍。TNF-α、AngⅡ处理后细胞核内NF-κB含量明显增加，分别为正常对照组的1.77倍和1.52倍。结论TNF-α、AngⅡ可增强内皮细胞TF活性，这可能与其促进内皮细胞核转录因子NF-κB的核转位和DNA结合活性有关，进一步证实NF-κB在内皮细胞TF诱导表达中的重要作用。

关键词：内皮细胞组织因子核转录因子κB 肿瘤坏死因子α 血管紧张素Ⅱ 动脉粥样硬化

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小鼠红白血病细胞（MEL）沿红系分化过程中一种新的 VL-30 样基因的诱导表达

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中华血液学杂志 2001年第1期22卷 30-33页

作者：陈渝萍刘德培薛社普 100005 北京，中国医学科学院、中国协和医科大学基础医学研究所、国家医学分子生物学重点实验室

目的研究在药物诱导小鼠红白血病细胞系EML沿红系分化过程中基因表达的变化。方法用mRNA差异显示法分析二甲亚砜（DMSO）和血红素（Hemin）诱导MEL细胞分化前后基因表达的改变，并利用改进的cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆其中一... 详细信息

目的研究在药物诱导小鼠红白血病细胞系EML沿红系分化过程中基因表达的变化。方法用mRNA差异显示法分析二甲亚砜（DMSO）和血红素（Hemin）诱导MEL细胞分化前后基因表达的改变，并利用改进的cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆其中一个差示cDNA片段的旁侧序列；以Northern杂交分析检测对应基因的表达改变。结果在差异显示分析中检测到长115bp的转录本在诱导后表达增强。经RACE扩增后产物长达1?883bp，和小鼠BVL-1转座成分的内部序列（1955～4000nt）区段有很高的同源性。Northern杂交表明MEL细胞中该基因至少有3个转录本，在诱导后表达水平均显著增高。结论在MEL细胞红系分化过中发现了一种新的VL-30样基因。

关键词：红白血病细胞红系分化 VL-30成分

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在大肠杆菌中以融合蛋白高效表达基因工程产品人心钠素

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中国医学科学院学报 2001年第6期23卷 573-579页

作者：陈伟京王俊路金芝卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建以融合蛋白形式在大肠杆菌中高效表达心钠素的重组质粒,稳定高效地获得基因工程产品心钠素。方法采用PCR和亚克隆技术构建带有心钠素的融合基因并在大肠杆菌中高效表达融合蛋白,利用操纵子重复克隆提高表达量,以凝血酶切割融合... 详细信息

目的构建以融合蛋白形式在大肠杆菌中高效表达心钠素的重组质粒,稳定高效地获得基因工程产品心钠素。方法采用PCR和亚克隆技术构建带有心钠素的融合基因并在大肠杆菌中高效表达融合蛋白,利用操纵子重复克隆提高表达量,以凝血酶切割融合蛋白释放心钠素小肽并通过柱层析纯化蛋白质,检定产品的各项理化指标和大鼠的体内降压、体内利尿和体外舒张血管等药理活性。结果构建了4个高效表达的心钠素融合蛋白的质粒,分别含1～4个目的基因串联操纵子;通过温度诱导表达后,该系列表达的目的蛋白分别为菌体总蛋白的46%、54.8%、56.1%和60.1%;提取纯化包涵体形式的融合蛋白后,以凝血酶切割释放心钠素,再经纯化分离出心钠素;实验室摇瓶发酵每升培养液可获得3mg以上的纯度大于96%的产品,产品具有利尿、降压和舒张血管的药理活性。结论利用融合基因的克隆与表达成功地研制了人心钠素基因工程产品。

关键词：心钠素大肠杆菌融合蛋白凝血酶基因工程

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