检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2002年第3期24卷 238-241页

作者：刘彦信胡欢开郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的分离鉴定重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(rsTRAIL)在诱导JurkatT淋巴细胞白血病细胞凋亡过程中差异表达的基因。方法采用抑制性差减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)及PCR技术筛选差异表达的基因。采用... 详细信息

目的分离鉴定重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(rsTRAIL)在诱导JurkatT淋巴细胞白血病细胞凋亡过程中差异表达的基因。方法采用抑制性差减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)及PCR技术筛选差异表达的基因。采用狭缝杂交和Northern印迹技术鉴定差异基因片段;以DNA自动序列分析仪测定所获cDNA核苷酸顺序。结果获得了6个差异表达的基因片段,4个在TRAIL诱导的白血病细胞凋亡过程中被抑制,2个被激活;其中,A14、X1、D1、A23和C5等5个基因片段为新基因,其GeneBank登记号分别为AW731601、AW731602、AW731603、AW731604和BE239235。Northern印迹显示,基因D1在Jurkat和MCF-7中的表达明显高于其它肿瘤细胞,提示该基因可能具有肿瘤特异性。结论TRAIL诱导的细胞凋亡过程,涉及多种基因表达的改变。

关键词：白血病细胞凋亡肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体白血病细胞差异表达基因

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小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 628-630页

作者：孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼... 详细信息

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果　阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论　小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。

关键词：亚硒酸钠全反式维甲酸细胞凋亡细胞分化 NB4细胞株急性白血病

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热休克蛋白的产生提高大鼠离体皮瓣的成活

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基础医学与临床 2002年第6期22卷 566-569页

作者：叶菜英 Bethodtle H.Wang Rabelt Udelsman 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005 美国霍普金斯大学医学院

观察热休克蛋白对离体皮瓣成活的影响。雄性大鼠分对照组 ,全身加热组 ,局部加热组。加热组分别全身或局部 4 2℃作用 30min ,离体皮瓣取自大腿内收缩肌条一块 (2cm× 6cm) ,植入同侧腹股沟。手术 3d后处死动物 ,用硝基蓝四氮唑染... 详细信息

观察热休克蛋白对离体皮瓣成活的影响。雄性大鼠分对照组 ,全身加热组 ,局部加热组。加热组分别全身或局部 4 2℃作用 30min ,离体皮瓣取自大腿内收缩肌条一块 (2cm× 6cm) ,植入同侧腹股沟。手术 3d后处死动物 ,用硝基蓝四氮唑染色判定皮肤损失面积 (cm2 )及肌肉运动性 ,皮瓣上皮肤和肌肉用定量Norther和Wester分析HSP72 的变化及离体皮瓣存活率。局部和全身预热的大鼠皮肤成活率明显提高 2 3% ,HSP72 的表达升高 ,与对照组相比P <0 0 5。实验结果表明热诱导热休克蛋白的产生有利于皮肤移植后皮瓣的成活。

关键词：成活热休克蛋白离体皮瓣

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心肌细胞吞噬聚乳酸—乙醇酸纳米粒子的形态学实验

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解剖学杂志 2002年第4期25卷 301-304页

作者：张晓东王冬杨菁李若凡程效东韩晔华周梦玲宋存先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学解剖组胚学系电镜室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所

目的　探讨心肌细胞吞噬聚乳酸—乙醇酸 ( polylactic polyglycolicacid ,PLGA)纳米粒子的形态学机理 ,制备组织细胞吞噬纳米粒子的相关模型 ,为纳米粒子作为包载各类药物或基因载体提供实验形态学依据。方法 :将制备的PLGA纳米粒子加... 详细信息

目的　探讨心肌细胞吞噬聚乳酸—乙醇酸 ( polylactic polyglycolicacid ,PLGA)纳米粒子的形态学机理 ,制备组织细胞吞噬纳米粒子的相关模型 ,为纳米粒子作为包载各类药物或基因载体提供实验形态学依据。方法 :将制备的PLGA纳米粒子加入生理盐水中 ,超声振荡成注射用纳米粒子悬浮液后 ,注射至活体家兔心肌组织内 ,4 8小时后取材切片、电镜下观察。结果 :心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子 ,并且出现了PLGA纳米粒子被吸收、降解的迹象。结论 :心肌细胞完全可以通过吞噬方式大量摄取 ;PLGA纳米粒子 ,将PLGA纳米粒子作为向心肌细胞内转运某种药物或基因的载体是完全可行的。

关键词：形态学实验心肌细胞纳米粒子聚乳酸-乙醇酸共聚物吞噬

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短暂激活c-jun N-terminal激酶抑制胆红素诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2002年第5期22卷 473-476页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京10005

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4±... 详细信息

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2 ) %降低到 (12 6± 2 6 ) %。为了进一步证实JNK的作用 ,在SH SY5Y细胞经H2 O2 预处理前 ,先经 2 0 μmol LJNK c jun AP1抑制剂curcumin作用 12h以抑制H2 O2 对JNK的激活 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞增高到 (42 8± 4 4 ) % ,curcumin完全抑制了短暂激活JNK所提供的保护作用。结果表明短暂激活JNK可能在胆红素诱导的SH SY5Y细胞凋亡中提供抗凋亡信号。

关键词：细胞凋亡胆红素 JNK 人神经母细胞瘤细胞

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P38激酶介导胆红素诱导的SHSY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2002年第1期22卷 45-46页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样... 详细信息

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ;用P38激酶抑制剂SB2 0 3580预处理细胞后 ,在倒置光显微镜下观察胆红素作用不同时间细胞形态的变化及存活情况 ;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。结果显示SHSY5Y细胞经胆红素作用后细胞核出现典型的凋亡样改变 ;细胞经SB2 0 3580预处理 1h ,胆红素作用 3h后凋亡率为 (1 2 1± 2 4) % ,对照组为(1 9 4± 2 7) % ;4h后凋亡率为 (39 3± 4 8) % ,对照组为 (66 2± 5 2 ) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。

关键词：胆红素 P38激酶凋亡人神经母细胞瘤细胞系

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北京鸭卵磷脂胆固醇酰基转移酶的cDNA和蛋白质的结构分析

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第1期18卷 64-69页

作者：曾武威张坚陈保生吴钢张可满薛红中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为获得不易感动脉粥样硬化动物北京鸭卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT)的cDNA和蛋白质序列 ,分析其结构特点 .以从北京鸭肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了北京鸭LCAT的cDNA序列 ,推导出其蛋白质氨基酸序... 详细信息

为获得不易感动脉粥样硬化动物北京鸭卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT)的cDNA和蛋白质序列 ,分析其结构特点 .以从北京鸭肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了北京鸭LCAT的cDNA序列 ,推导出其蛋白质氨基酸序列 ,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较 .北京鸭LCATcDNA (在GenBank中的注册号为AF32 4 887)全长 195 3bp ,其中开放阅读框架 135 6bp ,编码 4 5 1个氨基酸 ,包括一个由 2 3个氨基酸构成的疏水性信号肽和一个由 4 2 8个氨基酸组成的成熟蛋白 .该成熟蛋白比人LCAT在C端多 12个氨基酸 ,其与鸡、人、家兔的同源性依次为 98%、83%和 82 % .与其它种属LCAT蛋白序列的比较结果表明 ,北京鸭LCAT蛋白质序列虽然在长度上和结构上与其它种属有一定的差异。

关键词：北京鸭卵磷脂胆固醇酰基转移酶 cDNA 蛋白质结构

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遗传性乳光牙本质家系致病基因的染色体定位

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中华口腔医学杂志 2002年第6期37卷 408-411页

作者：赵军吴丽更贾智张青松邢晓艳张晓海天津医科大学口腔医院牙体牙髓科 300070 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

目的　研究一个在天津塘沽地区发现的遗传性乳光牙本质回族家系致病基因是否与染色体 4q2 1连锁。方法　提取该家系 1 3名成员的外周血DNA ,选择染色体 4q2 1上的 8个短串联重复序列多态性标记 (shorttandemrepeatpolymorphisms ,STRPs... 详细信息

目的　研究一个在天津塘沽地区发现的遗传性乳光牙本质回族家系致病基因是否与染色体 4q2 1连锁。方法　提取该家系 1 3名成员的外周血DNA ,选择染色体 4q2 1上的 8个短串联重复序列多态性标记 (shorttandemrepeatpolymorphisms ,STRPs)做荧光标记PCR等位片段分析 ,用lod连锁分析法分析该家系致病基因位点与上述 8个STRPs的连锁关系。结果　得到 1 3名个体 8个位点的基因型和单体型 ,连锁分析结果显示 :8个STRPs的最大lod值均大于 0 ,其中 5个STRPs的lod值大于 1。结论　该家系致病基因定位在染色体 4q2 1上 ,表明中国回族人和报道的欧美人的DGI

关键词：遗传性乳光牙本质染色体定位牙本质生成不全遗传学串联重复序列多态性标记家系调查致病基因

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人肾素转基因小鼠的建立

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生物化学与生物物理进展 2002年第3期29卷 483-486页

作者：陈兰英姜立群刘嘉莉苏雪峰方福德陈永福中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院北京100037 中国医学科学院基础医学研究所北京100005 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100094

为研究人肾素基因在体内的功能和建立其药物干预实验的动物模型 ,采用显微注射法 ,将纯化的人肾素基因导入小鼠受精卵 ,再培育成转基因小鼠 .通过DIGDNA印迹和PCR分析 ,进行转基因整合检测 .在出生的 13只子代鼠中 ,得到一只转基因阳性... 详细信息

为研究人肾素基因在体内的功能和建立其药物干预实验的动物模型 ,采用显微注射法 ,将纯化的人肾素基因导入小鼠受精卵 ,再培育成转基因小鼠 .通过DIGDNA印迹和PCR分析 ,进行转基因整合检测 .在出生的 13只子代鼠中 ,得到一只转基因阳性鼠 .整合率为 7 7% ,有效率 0 3% ,转基因已稳定传代 .RT PCR显示转基因阳性鼠的肾、心和肺组织中有肾素基因表达 ,而在肝脏与骨骼肌中则未检测到 .阳性鼠血浆肾素活性较对照鼠明显升高 ,而肾与心脏组织的肾素活性则无明显变化 .

关键词：逆转录-聚合酶链反应地高辛 DNA印迹显微注射高血压动物模型人肾素转基因小鼠

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基因工程乳腺癌特异性人单链抗体的表达与特性

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基础医学与临床 2002年第4期22卷 324-327,329页

作者：张云王树蕙郭彩云李文辉扬帆中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物及病原学室北京100005

研究解决分泌人单抗的杂交瘤细胞系难于稳定持久分泌抗体的难题 ,制备单链抗体 ,使单抗分子小型化 ,为进一步研究其在肿瘤诊断和治疗中的应用作准备。从分泌抗乳腺癌人单抗的杂交瘤细胞CM 1总RNA中 ,利用RT PCR技术分别扩增出人单抗重... 详细信息

研究解决分泌人单抗的杂交瘤细胞系难于稳定持久分泌抗体的难题 ,制备单链抗体 ,使单抗分子小型化 ,为进一步研究其在肿瘤诊断和治疗中的应用作准备。从分泌抗乳腺癌人单抗的杂交瘤细胞CM 1总RNA中 ,利用RT PCR技术分别扩增出人单抗重链可变区VH 基因和轻链可变区VL 基因 ,将扩增产物纯化后克隆于pGEM T载体中 ,进行DNA测序和序列比较分析后 ,将两者共克隆于表达载体中诱导表达 ,利用斑点免疫印迹及竞争抑制法检测表达产物的抗原性。所克隆的CM 1人单抗重链可变区和轻链可变区基因片段 ,分别属于人免疫球蛋白IgMⅢ亚群 ,和鼠κ轻链V亚群 ,ⅩⅦ家族 ,用斑点免疫印迹法检测可见表达产物能与人乳腺癌细胞特异结合 ;人CM 1单克隆抗体对此单链抗体与人乳腺癌细胞的结合有竞争性抑制作用 ,抑制率为 75 7%。结论成功地制备了可特异结合乳腺癌细胞的CM

关键词：基因工程乳腺癌人单克隆抗体CM-1 单链抗体斑点免疫印迹竞争抑制法

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