检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2000年第5期22卷 444-448页

作者：张雪青陈平黄小东张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究本室合成的异丁酰胺对于μ LCRAγψβδβ MEL稳定转化子中珠蛋白基因表达的影响作用。方法转化子细胞在含不同浓度异丁酰胺的细胞培养基中生长 4 d后，用 RNase保护分析法测定人 Aγ－、β－及鼠α－珠蛋白基因的表达水平... 详细信息

目的研究本室合成的异丁酰胺对于μ LCRAγψβδβ MEL稳定转化子中珠蛋白基因表达的影响作用。方法转化子细胞在含不同浓度异丁酰胺的细胞培养基中生长 4 d后，用 RNase保护分析法测定人 Aγ－、β－及鼠α－珠蛋白基因的表达水平。结果异丁酰胺可诱导人γ－、β－、及鼠α－珠蛋白基因的表达，且有一定的剂量相关性，对人γ－基因的诱导能力显著强于对人β－基因的诱导，在一定的异丁酰胺浓度范围 (2.5～ 5 mmol/L)内，对人γ－基因的诱导作用对比鼠α－珠蛋白基因更为有效。结论异丁酰胺在一定程度上可以选择性诱导人γ－珠蛋白基因转录，这一作用以及异丁酰胺的无毒性和血浆半衰期较长的优点，显示出其在β－地中海贫血和镰刀型贫血的治疗中具有潜在的应用前景。

关键词：异丁酰胺 γ-珠蛋白基因 β-地中海贫血

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应用差异显示法研究低密度脂蛋白诱导内皮细胞差异表达基因

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中华医学杂志 2000年第10期80卷 784-786页

作者：张可满陈保生吴纲薛红曾武威中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　克隆、分离血管内皮细胞在致动脉粥样硬化因素作用下差异表达的基因 ,了解动脉粥样硬化发生的分子机制。方法　培养血管内皮细胞系 (ECV30 4)在低密度脂蛋白 (LDL)的诱导下 ,用改进的差异显示聚合酶链反应 (PCR)技术分析表达水... 详细信息

目的　克隆、分离血管内皮细胞在致动脉粥样硬化因素作用下差异表达的基因 ,了解动脉粥样硬化发生的分子机制。方法　培养血管内皮细胞系 (ECV30 4)在低密度脂蛋白 (LDL)的诱导下 ,用改进的差异显示聚合酶链反应 (PCR)技术分析表达水平明显差异的cDNA。对差异显示基因进行序列测定和同源比较。用NorthernBlot证实差异显示基因片段。结果　LDL诱导ECV30 4细胞出现一些上调和下调表达的cDNA。已知的上调表达基因包括 10 0 0 0蛋白、FGFR1原癌基因伴随蛋白、rTSβ蛋白、FK5 0 6结合蛋白、细胞间粘附分子 1;下调表达的基因有fb19、Apobec 1结合蛋白 1、RBP2。不同的上调或下调基因表达水平变化在 70 %～ 2 0 0 %之间不等。结论　用差异显示 PCR方法证实LDL可诱导ECV30 4细胞许多基因表达水平的变化。高水平LDL作用于内皮细胞可引起炎性反应 ,影响动脉粥样硬化的早期发生。

关键词：基因表达 LDL 内皮细胞差异显示动脉粥样硬化

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人乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 263-265页

作者：屠亚军琦祖和杨鹏潘燕于树玉杜淼李光三中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　建立人乙型肝炎病毒 x(HBx)基因转基因小鼠模型。方法　用显微注射法制备转基因小鼠 ,用分子杂交法鉴定转基因小鼠 HBx的整合与表达。结果　建立了人 HBx基因转基因小鼠模型。经 Southern杂交鉴定得到 17只转基因首建鼠。自肝脏... 详细信息

目的　建立人乙型肝炎病毒 x(HBx)基因转基因小鼠模型。方法　用显微注射法制备转基因小鼠 ,用分子杂交法鉴定转基因小鼠 HBx的整合与表达。结果　建立了人 HBx基因转基因小鼠模型。经 Southern杂交鉴定得到 17只转基因首建鼠。自肝脏提取总 RNA进行 Northern杂交 ,结果显示 17只首建鼠肝脏中均有 HBx表达。结论　为从整体水平研究慢性乙型肝炎患者诱发肝癌的作用机制及 HBx的反式激活作用机制提供了理想的动物模型。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠模型

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饮酒和载脂蛋白AI基因启动子G/A置换多态性对凉山彝汉人血浆载脂蛋白AI水平的影响

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基础医学与临床 2000年第2期20卷 74-77页

作者：赵庆伟申萍张华周梦玲佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室北京100005

研究载脂蛋白ＡＩ启动子－７５ｂｐ处Ｇ／Ａ嘌呤置换以及饮酒对凉山彝族及汉族人群血浆载脂蛋白ＡＩ水平的影响。经现场调查随机抽样７４２名凉山州彝汉健康居民，包括三个人群样本：彝族农民、彝族移民、汉族居民。根据饮用酒精量将... 详细信息

研究载脂蛋白ＡＩ启动子－７５ｂｐ处Ｇ／Ａ嘌呤置换以及饮酒对凉山彝族及汉族人群血浆载脂蛋白ＡＩ水平的影响。经现场调查随机抽样７４２名凉山州彝汉健康居民，包括三个人群样本：彝族农民、彝族移民、汉族居民。根据饮用酒精量将各人群分为四组：不饮酒者、１～２５ｇ／ｄ饮酒者、２６～７５ｇ／ｄ以上饮酒者、７５ｇ／ｄ以上饮酒者。采集清晨空腹血样１０ｍＬ／人。全项血脂和脂蛋白水平测定。从冷冻血凝块中抽提基因组ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增，进行片段长度多态性分析。结果：随着饮酒量的增加，血浆ＨＤＬＣ和ａｐｏＡＩ水平逐渐升高，在彝族农民样本和汉民样本中有非常显著的统计学意义。三人群样本间的Ａ等位基因频率相似。Ａ等位基因携带者与ＧＧ基因型携带者之间的各项血脂水平无显著差异。但在不饮酒者中，Ａ等位基因携带者的ａｐｏＡＩ水平明显高于ＧＧ基因型携带者；而饮酒者中，Ａ等位基因携带者的ａｐｏＡＩ和ＨＤＬＣ水平明显低于ＧＧ基因型携带者，上述差异在城镇人群中显示出统计学意义（Ｐ＜０．０５）。不饮酒者中，Ｇ／Ａ置换可以解释１８％的个体间ａｐｏＡＩ水平变异（Ｆ＝８．９４，Ｐ＜０．０１）。结论；适量饮酒和ａｐｏＡＩ基因－７５处Ｇ／Ａ置换多态性均可使?

关键词：酒精载脂蛋白AI 启动子多态性彝族汉族

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反义大鼠凝血酶受体基因的构建及其对主动脉血管平滑肌细胞增生的影响

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 47-51页

作者：任国锋王宗立李拥军许漫赵三妹刘佩毛张华佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室北京100005

凝血酶激活凝血酶受体引起的一系列细胞事件和内源性PDGF-A，bFGF的产生可能是血管病变发生发展过程中平滑肌细胞增生的重要因素。为进一步阐明血管损伤后平滑肌细胞增生的机理及探索有效治疗途径，针对凝血酶受体基因中一段包括转录起... 详细信息

凝血酶激活凝血酶受体引起的一系列细胞事件和内源性PDGF-A，bFGF的产生可能是血管病变发生发展过程中平滑肌细胞增生的重要因素。为进一步阐明血管损伤后平滑肌细胞增生的机理及探索有效治疗途径，针对凝血酶受体基因中一段包括转录起始点，翻译起始点，凝血酶结合和切割位点的序列作为靶序列，构建了凝血酶受体反义RNA重组表达载体pLXSN／ATR，并将其导入凝血酶刺激的动脉平滑肌细胞。结果表明重组基因转染能抑制凝血酶对大鼠平滑肌细胞DNA合成的刺激作用。提示序列特异的凝血酶受体反义重组基因的表达可以抑制凝血酶受体介导的血管平滑肌细胞增生。

关键词：凝血酶受体反义RNA 再狭窄平滑肌细胞增生 PCR

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血管紧张素转换酶基因缺失纯合型与糖尿病肾病相关联

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基础医学与临床 2000年第5期20卷 27-29页

作者：陈素杰周哲陈孟芝徐茜董瑞琴杨晓娟邱长春中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院分子生物学室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院分子生物学室

应用PCR 扩增方法检测203 例NIDDM 患者和165 例正常对照者血管紧张素(ACE)基因的16 内含子中287bp 片段缺失/插入多态性。结果显示，糖尿病肾病患者组ACE 基因缺失纯合型(DD)频率明显高于非肾病组和正常对照组，P<0.001；DD 缺失纯... 详细信息

应用PCR 扩增方法检测203 例NIDDM 患者和165 例正常对照者血管紧张素(ACE)基因的16 内含子中287bp 片段缺失/插入多态性。结果显示，糖尿病肾病患者组ACE 基因缺失纯合型(DD)频率明显高于非肾病组和正常对照组，P<0.001；DD 缺失纯合型患者肾病进展速度明显快于缺失/插入(DI)杂合型及插入/插入(II)纯合型糖尿病患者，P<0.01。表明ACE 基因缺失纯合型是糖尿病肾病的独立危险因素之一，并可作为NIDDM 肾病发生发展的有效预测指标。

关键词：血管紧张素转换酶基因多态性糖尿病肾病

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表达人载脂蛋白AI小鼠主动脉平滑肌细胞的培养及意义

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基础医学与临床 2000年第1期20卷 38-40页

作者：谷素敏李汇华佘铭鹏中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所病理室北京100005

培养表达人ａｐｏＡＩ转基因小鼠主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）。从具有可诱导，高效，多组织表达人ａｐｏＡＩ转基因小鼠分离主动脉，用改良贴块法培养血管ＳＭＣ。细胞经相差显微镜和免疫细胞化学证实具有ＳＭＣ特征。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ... 详细信息

培养表达人ａｐｏＡＩ转基因小鼠主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）。从具有可诱导，高效，多组织表达人ａｐｏＡＩ转基因小鼠分离主动脉，用改良贴块法培养血管ＳＭＣ。细胞经相差显微镜和免疫细胞化学证实具有ＳＭＣ特征。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ表明转基因鼠主动脉平滑肌细胞中有人ａｐｏＡＩｍＲＮＡ表达，而正常鼠则未检测出，为在体外从细胞和分子水平研究ａｎＯＡＩ基因表达在胆固醇代谢及动脉粥样硬化发生中的作用提供了较理想的细胞模型。

关键词：载脂蛋白AI 转基因小鼠平滑肌细胞细胞培养

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嗜水气单胞菌hec毒素溶血试验诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中华血液学杂志 2000年第10期21卷 517-520页

作者：刘海丽许彩民吕照江陆承平潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院南京农业大学

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素... 详细信息

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素。粗提毒素作用于PNH和其他贫血患者及正常人的红细胞 ,采用 96孔板在波长 6 30nm酶标仪比色 ;同时用CD59单抗和FITC标记的羊抗鼠IgG标记红细胞 ,以流式细胞仪分析毒素作用前后CD59标记率。结果　对 15例PNH患者、15名正常人、15例非PNH贫血患者的红细胞 ,进行hec毒素试验 ,发现毒素在 0 .12 5g/L、37℃作用 2 0min后 ,正常人和非PNH贫血患者的红细胞完全溶解 ,而PNH患者存留红细胞的百分率与CD59标记率成反比。毒素作用前后流式细胞仪检测结果表明 ,毒素可以特异地作用于CD59阳性细胞。结论　PNH患者的红细胞比其他非PNH贫血患者及正常人的红细胞有明显的抗毒素溶破作用 ,且毒素作用后存留细胞的百分数反映CD59标记率 ,故可作为PNH诊断的敏感、特异、简便可行的新诊断方法。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿嗜水气单胞菌 hec毒素

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人泛素结合酶cDNA的分离与克隆

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 306-311页

作者：吕鸿雁李光涛周严金鉴蒋科艺彭小忠袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　分离、克隆人泛素结合酶基因 ,并初步研究其组织表达谱。方法　根据与鼠泛素结合酶有较高一致性的人表达序列标签 (EST)设计筛库引物 ,筛选人胎脑 c DNA文库 ,采用生物信息学方法分析筛选到的阳性克隆 ;设计探针 ,应用人多组织杂... 详细信息

目的　分离、克隆人泛素结合酶基因 ,并初步研究其组织表达谱。方法　根据与鼠泛素结合酶有较高一致性的人表达序列标签 (EST)设计筛库引物 ,筛选人胎脑 c DNA文库 ,采用生物信息学方法分析筛选到的阳性克隆 ;设计探针 ,应用人多组织杂交膜分析该基因的组织表达谱。结果　从文库中筛选到两个互为剪接异构体的长度分别为 1471和 1315 bp的 c DNA克隆 ,其开放读码框分别编码 147和 10 9个氨基酸 ,与鼠、果蝇、线虫等生物的泛素结合酶均高度同源 ,含泛素结合结构域 ,Gen Bank登录号分别为 AF12 5 0 44和 AF12 5 0 45。Northern杂交显示 ,该基因在成人心脏、胎盘、胰腺等组织中呈特异表达 ,而在脑、肝、肺、肾和骨胳肌中基本不表达。结论　泛素结合酶基因在人体中的表达受到时间和空间的双重调控。

关键词：泛素泛素结合酶 cDNA 分离克隆

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我国人类疾病基因控制工程基础研究的近期进展

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 205-207页

作者：方福德 *** 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

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