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AngⅡ、mm-LDL和TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因转录调控的影响

中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 100-100页

作者：李健王小明斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

目的:从基因转录水平探讨AngⅡ、mm-LDL及TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因表达的影响.方法:(1)以GAPDH为内参照,用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测10-6 mol/L AngⅡ、100 μg/mL mm-LDL及200 U/mL TNFα作用于ECV304细胞18 h后各实... 详细信息

目的:从基因转录水平探讨AngⅡ、mm-LDL及TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因表达的影响.方法:(1)以GAPDH为内参照,用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测10-6 mol/L AngⅡ、100 μg/mL mm-LDL及200 U/mL TNFα作用于ECV304细胞18 h后各实验组PDGF-B链基因mRNA水平,分别为对照组的1.5倍、2.0倍和1.3倍,提示AngⅡ、mm-LDL及TNFα在转录水平对ECV304细胞PDGF-B链基因的表达有促进作用.

关键词：细胞荧光素酶表达量报告基因质粒 PDGF-B TNF mm-LDL Ang ECV304 基因转录

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PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合A-T丰富区的初步分离和鉴定

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 98-98页

作者：王小明邱劲李健沈传陆李素敏斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合... 详细信息

一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合,影响多种基因的转录.目的:分离和鉴定PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合的A-T丰富区,并初步分析其功能.方法:DNA重组技术和凝胶迁移率改变法(EMSA).结果:重组人HMGI蛋白(rHMGI)可与PDGF-B链基因上游序列结合.在-1758/+43 bp片段内至少存在两个与HMGI结合的A-T丰富区,其中一个位于-190/+43 bp片段内,可能是涉及TATA盒在内的TTTATAAA,另一个位于-1304/-990 bp内,该区有两个TTTATAAA序列.被蛋白激酶C和CDC2激酶磷酸化的rHMGI与-1304/990 bp片段内A-T丰富区的结合活性明显减低,但未观察到PKC磷酸化明显减弱rHMGI与-190/+43 bp片段的结合.在肿瘤坏死因子α(TNFα),弱氧化低密度脂蛋白(mmLDL)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的ECV304核抽提物中,加入低剂量的rHMGI显著增强核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合,并呈一定的剂量依赖性.结论:高迁移率蛋白Ⅰ可与PDGF-B链基因上游一个或数个A-T丰富区结合,促进转录因子NF-κB与SSRE的相互作用,并可能受蛋白激酶C和CDC2激酶的磷酸化调节.这对深入阐明致动脉粥样硬化相关因素诱导PDGF-B链基因转录的机制具有重要意义.

关键词：上游序列基因 HMGI PDGF-B A-T

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吸入一氧化氮对胎粪吸入综合征新生猪一氧化氮合酶的影响

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中华围产医学杂志 2000年第4期3卷 244-247页

作者：华子瑜王丹华张宏孙仁宇徐景蓁重庆医科大学附属儿童医院新生儿科 400001 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室

目的　观察吸入一氧化氮 (NO)治疗胎粪吸入综合征 (MAS)的疗效 ,对 MAS新生猪肺组织一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响。　方法　建立新生猪重症 MAS动物模型 ,观察氧合 -循环变化 ,测定肺组织匀浆单磷酸环鸟苷酸 (c GMP)含量、NOS活性 ,肺... 详细信息

目的　观察吸入一氧化氮 (NO)治疗胎粪吸入综合征 (MAS)的疗效 ,对 MAS新生猪肺组织一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响。　方法　建立新生猪重症 MAS动物模型 ,观察氧合 -循环变化 ,测定肺组织匀浆单磷酸环鸟苷酸 (c GMP)含量、NOS活性 ,肺组织切片原位杂交观察诱生型一氧化氮合酶 (i NOS)基因表达的变化。　结果　吸入 NO治疗使重症 MAS时的氧合 -循环障碍迅速改善 ,终止吸入 NO后肺动脉压回升至治疗前水平。MAS组肺组织原生型一氧化氮合酶 (c NOS)活性较对照组升高 (P>0 .0 5 ) ,i NOS活性较对照组显著升高 ,分别为 (16 .9± 3.1) fmol/ (m g Pro.m in)与 (11.6± 2 .7) fmol/ (mg Pro.m in) ,(P<0 .0 5 ) ,i NOS基因表达明显增强 ;吸入 NO抑制 c NOS活性 (P<0 .0 5 ) ,不能迅速 (2 h内 )抑制 i NOS的基因表达及其活性 (P>0 .0 5 )。　结论　采用逐步减量方式终止吸入 NO治疗 ,以便 c NOS活性恢复 ,避免“肺动脉压反跳现象”;及早采用包括吸入 NO在内的综合治疗措施 ,才能迅速抑制重症 MAS的肺实质炎症及 i

关键词：一氧化氮胎粪吸入综合征基因表达 iNOS

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TNF-α和mmLDL对人脐静脉内皮细胞PAI-1活性的作用及其机制

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 311-311页

作者：李晓冬朱广瑾祖淑玉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室!北京100005

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天智颗粒的脑保护机制研究

天智颗粒的脑保护机制研究

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2000中国药学会学术年会

作者：曹春雨杜贵友左萍萍王秀荣中国中医研究院中药研究所(北京) 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室(北京)

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大鼠Calbindin-D28K样阳性脊髓投射神经元亚群分布方式

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2000年第2期7卷 94-99页

作者：谭会兵石葛明陈幽婷刘树峰万选才中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所解剖学教研室北京100005 河北医科大学解剖学教研室石家庄050017 徐州医学院解剖学教研室徐州221000

目的　研究大鼠红核脊髓投射神经元Calbindin D2 8K样免疫反应 (CaBP LI)表现形式及其分布特点。方法　采用霍乱毒素B亚单位结合胶体金 (CB Au)逆行标认神经元复合免疫细胞化学反应的非荧光双标方法。结果　红核脊髓投射神经元表现... 详细信息

目的　研究大鼠红核脊髓投射神经元Calbindin D2 8K样免疫反应 (CaBP LI)表现形式及其分布特点。方法　采用霍乱毒素B亚单位结合胶体金 (CB Au)逆行标认神经元复合免疫细胞化学反应的非荧光双标方法。结果　红核脊髓投射神经元表现为两种亚型 :一种为CaBP LI阴性神经元 ;另一种为CaBP LI阳性神经元。两种神经元在红核具有特殊的分布方式 ,头侧水平CB Au标认的红核脊髓投射神经元均呈CaBP LI阴性 ,向尾侧CaBP LI阳性神经元数目逐渐增多。脑室注射L型钙离子通道激动剂BayK86 4 4仅引起CaBP LI免疫反应强度增加 ,并未改变两种神经元的分布方式 ,头侧CB Au标认的红核脊髓投射神经元仍表现CaBP LI阴性。结论　大鼠红核脊髓投射神经元的CaBP LI阳性和CaBP LI阴性两种亚型及其分布特点说明 ,这些神经元的性质并非均一 ,并可能与红核脊髓投射神经元对钙超载具有不同的耐受性有关。

关键词：免疫细胞化学红核脊髓束 Calbindin-D28K

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T淋巴细胞生与死的决定

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：郑德先刘彦信中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋... 详细信息

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋巴细胞的生存与死亡起不同的调节作用,其中任何一个或两个酪氨酸同时突变为苯丙氨酸均可影响T淋巴细胞激活,并阻断T细胞死亡的信号传递.T细胞接受抗CD3抗体刺激后,CD3ε-ITAM的Y170可募集Lck、3-磷酸肌醇激酶的P85α亚基和Shc,而Y181可募集ZAP70与其结合,从而介导不同的信号极联,决定细胞生(激活)或死(凋亡)的不同命运.方法和结果:在CD3ε介导的细胞凋亡过程中,凋亡基因Fas及其配体FasL的表达增加.进一步的研究发现,核转录因子Nur77在细胞激活时表达上调,在细胞接受持续刺激并出现凋亡时,Nur77的表达进一步增加.为阐明Fas、FasL和Nur77三者表达的相关性,建立了稳定表达Nur77的T细胞株,构建了Fas及FasL启动子驱动的荧光素酶报告基因表达载体并转染该细胞株,研究Nur77过量表达对Fas及FasL转录的影响,结果表明Nur77可以上调Fas的表达,但对FasL的表达没有影响.Nur77上调Fas的表达,从而增加了Fas+细胞和细胞凋亡.结论:Nur77具有决定细胞'生'(细胞激活)或'死'(细胞凋亡)的关键作用.

关键词：细胞凋亡信号传递

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重组可溶性TRAIL在大肠杆菌中的表达、分离纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：刘彦信史娟郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的... 详细信息

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的30%左右,亲和层析纯化后,重组融合蛋白的纯度可达95%以上.其表现分子量约为22 kD,等电点为6.29,N-末端的氨基酸顺序与理论值相同.该融合蛋白在浓度为0.1～1 μg/mL时,能显著诱导所试全部7种肿瘤细胞株细胞凋亡,不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡;对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用,但不杀伤正常人外周血淋巴细胞;动物实验研究表明,能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长,而对正常小鼠无任何毒性.结论:该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡,具有重要临床应用前景.

关键词：肿瘤细胞凋亡分离纯化 TRAIL 大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属

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人c-Kit受体编码区全长cDNA的克隆(简报)

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中国医学科学院学报 2000年第2期22卷 105-105页

作者：熊安琪陈松森刘深基狄旭中国医学科学院!中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

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“生命科学发展战略”报告完成

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中国医学科学院学报 2000年第5期22卷 415-415页

作者：方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室!北京 100005

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