检索结果-内蒙古大学图书馆

藏药二十六味余甘子丸和藏红花粗提物对缺氧大鼠肺动脉高压和血液流变学的影响

中国病理生理杂志 1999年第4期15卷 292-295页

作者：柴旦薛全福张叔伦苗会庄逢源中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理研究室中日友好医院血液流变室西藏大学医学专科学校首都儿科研究所生理室

目的：观察二十六味余甘子丸和藏红花粗提物对缺氧大鼠肺动脉压及血液流变学的作用。方法：１０％常压缺氧３～５周，同时用上述两种药物灌胃，右心导管测肺动脉压，毛细血管离心法测红细胞压积，旋转粘度计测血液粘度，荧光偏振法测红... 详细信息

目的：观察二十六味余甘子丸和藏红花粗提物对缺氧大鼠肺动脉压及血液流变学的作用。方法：１０％常压缺氧３～５周，同时用上述两种药物灌胃，右心导管测肺动脉压，毛细血管离心法测红细胞压积，旋转粘度计测血液粘度，荧光偏振法测红细胞膜流动性，微孔滤法测红细胞变形性。结果：所用两种药物均可以降低缺氧引起的肺动脉高压和减轻右心室肥厚。但对红细胞压积、全血粘度、红细胞膜流动性和红细胞变形性无明显影响。结论：这两种药物的降缺氧大鼠肺动脉高压作用，是主要通过改善肺循环而实现的。

关键词：肺动脉高压血液动力学缺氧中医药疗法

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维持细胞内铜离子浓度稳定的分子机制

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生物工程进展 1999年第6期19卷 22-27,31页

作者：罗文琴陈建和袁建刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对生命而言，铜是一种必须的微量元素，它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联，超氧化物歧化酶清除胞内自由基，细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白，酪氨酸酶参与色素形成途径，多... 详细信息

对生命而言，铜是一种必须的微量元素，它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联，超氧化物歧化酶清除胞内自由基，细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白，酪氨酸酶参与色素形成途径，多巴胺β羟化酶则与神经传导有关。细胞内铜离子浓度过低会影响这些酶的活性及相应的生理代谢途径，影响细胞的生存。但细胞内铜离子浓度超过生理需求也会引起严重的问题。铜离子能氧化蛋白，脂类和ＤＮＡ，同时促进形成自由基，引起细胞死亡［１］。人体很多疾病都是由于铜离子代谢异常引起的，其中最著名的就是Ｗｉｌｓｏｎ［２］和Ｍｅｎｋｓ［３］病，它们分别是由过多铜离子在细胞内堆积和细胞内铜离子浓度过低导致的。另外，铜离子缺乏还会引起心脏疾病［４］。所以，将细胞内铜离子浓度维持在一稳定水平对细胞生存至关重要。生理性铜离子浓度的维持主要在于四个环节：铜离子进入胞内（ｕｐｔａｋｅ）、胞内运送（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）、合成金属蛋白（ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）及清除过多铜离子（ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ）［５］。对于过高或过低的铜离子浓度，细胞主要是通过改变流入量（ｉｎｆｌｕｘ）和流出量（ｅｆｆｌｕｘ）来应答。另外，金属硫蛋白可?

关键词：细胞铜离子浓度细菌酵母调控铜离子代谢

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人外周血及脐血树突状细胞的体外分离培养

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基础医学与临床 1999年第4期19卷 92-96页

作者：苏华郑秋红何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学室北京10005 福建省肿瘤医院福州350014

取正常人外周血或脐血，经淋巴细胞分离液分离，取中间白膜层，培养板中进行粘附，粘附细胞加培养液和细胞因子（外周血加GM－CSF和IL－4，脐血加GM－CSF和TNF－α）培养，对其形态、表型和功能分别进行鉴定和测定。结果表明约经过1周... 详细信息

取正常人外周血或脐血，经淋巴细胞分离液分离，取中间白膜层，培养板中进行粘附，粘附细胞加培养液和细胞因子（外周血加GM－CSF和IL－4，脐血加GM－CSF和TNF－α）培养，对其形态、表型和功能分别进行鉴定和测定。结果表明约经过1周左右培养，悬浮细胞表现为典型的DC形态，带有毛刺样凸起，经DC单克隆抗体染色后用流式细胞仪测定脐血72％为DC，外周血93％为DC，并且可以刺激同种异体淋巴细胞的增殖反应。所以通过这样的不同细胞因子组合可以从人外周血和脐血中诱导培养出大量的DC细胞，为其进一步的研究奠定了基础。

关键词：树突状细胞单个核细胞外周血白细胞介素-4

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一种与不育有关的人精子蛋白质的组织特异性及表达

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 166-169页

作者：张梅林周雪峰曹登峰缪时英吴燕婉邢志军宗书东王琳芳中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室国家计划生育委员会科学技术研究所

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该... 详细信息

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该ｃＤＮＡ只在人和大鼠睾丸组织中表达；在人睾丸曲细精管的精原细胞、精母细胞和精子细胞中均有转录。结论ＢＳＤ－２．４ｃＤＮＡ编码蛋白具有睾丸组织特异性，并在精子发生的各个阶段均有不同程度的表达。

关键词：人精子蛋白质组织特异性组织原位杂交

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中国人2型糖尿病的基因分型和定位

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解剖学报 1999年第4期30卷 289-292页

作者：赵进英王姮左瑾李玉秀孙琦黄薇陈竺蔡有余方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院上海第二医科大学瑞金医院中国医学科学院实验动物研究所

目的　对中国人２型糖尿病即非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）家系基因组ＤＮＡ进行基因分型及基因定位。　方法　采用分布于１～２２号染色体及Ｘ染色体上的３５８对荧光标记的微卫星引物，进行多重ＰＣＲ，ＰＣＲ扩增产物用聚... 详细信息

目的　对中国人２型糖尿病即非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）家系基因组ＤＮＡ进行基因分型及基因定位。　方法　采用分布于１～２２号染色体及Ｘ染色体上的３５８对荧光标记的微卫星引物，进行多重ＰＣＲ，ＰＣＲ扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分离，然后进行电泳图谱及信息收集。应用ＧｅｎｅｓｃａｎＴＭ３．０软件和Ｇｅｎｏ－ｔｙｐｅＴＭ２．１软件进行基因分型和基因定位。　结果　在３５个家系中共有１９３个微卫星标志能准确进行基因分型。共得４１４９５个基因型。经过多点连锁分析和患病同胞对分析，初步确定在１，１０，１２，１８，２０号染色体上存在ＮＩＤＤＭ相关基因位点。　结论　用全基因组扫描技术可以对中国人２型糖尿病相关基因位点进行基因分型和基因定位。

关键词：糖尿病 Ⅱ型基因分型基因定位

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重组人甲胎蛋白基因顺式调控元件功能的研究

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基础医学与临床 1999年第1期19卷 38-42页

作者：全硕潘国宗刘东远鲁重美左瑾方福德中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化内科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

将６种含有人甲胎蛋白（ＡＦＰ）基因启动子、增强了和／或沉寂子不同组合的荧光素酶报告基因真核表达载体分别转染３种人肝癌细胞系及１种肺腺癌细胞系，测定瞬时表达的荧光素酶活性。结果显示６种重组人ＡＦＰ基因顺式作用元件在ＡＦ... 详细信息

将６种含有人甲胎蛋白（ＡＦＰ）基因启动子、增强了和／或沉寂子不同组合的荧光素酶报告基因真核表达载体分别转染３种人肝癌细胞系及１种肺腺癌细胞系，测定瞬时表达的荧光素酶活性。结果显示６种重组人ＡＦＰ基因顺式作用元件在ＡＦＰ阳性肝癌细胞均具有特异启动活性，而在ＡＦＰ阴性的肝癌细胞和非肝癌细胞无启动活性。在这６种重组人ＡＦＰ顺式元件中，以２．２ｋｂ的调控元件（去除了ＡＦＰ基因沉寂子。保留其启动子和增强子序列）启动活性最高，从而为下一步的靶向性肝癌基因治疗提供了较理想的肝癌细胞特异性启动元件。

关键词：肝癌甲胎蛋白转录调控元件

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重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在啤酒酵母中的表达和分泌

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基础医学与临床 1999年第1期19卷 43-48页

作者：李旌军黄秉仁蔡良琬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

利用啤酒酵母α－因子启动子和前导肽区与中国人ＧＭ－ＣＳＦ基因编码区正确融合后能产生具有正确Ｎ－端的分泌型表达载体，ＧＭ－ＣＳＦ基因在啤酒酵母细胞中得到表达和分泌。Ｗｅｓｔｅｍ印迹杂交和染糖结果表明酵母细胞能识别ｈＧＭ... 详细信息

利用啤酒酵母α－因子启动子和前导肽区与中国人ＧＭ－ＣＳＦ基因编码区正确融合后能产生具有正确Ｎ－端的分泌型表达载体，ＧＭ－ＣＳＦ基因在啤酒酵母细胞中得到表达和分泌。Ｗｅｓｔｅｍ印迹杂交和染糖结果表明酵母细胞能识别ｈＧＭ－ＣＳＦ中潜在的糖化位点。表达的ｈＧＭ－ＣＳＦ以不同程度的糖化形式存在。体外生物学活性测定表明，培养上肩能刺激骨髓干细胞的增殖，形成集落，其生物学活性为１．２５ｘ１０４Ｕ／ｍＬ。

关键词： GM-CSF 啤酒酵母表达分泌糖化

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一个人类α-甘露糖苷酶全长cDNA的分子克隆

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基础医学与临床 1999年第5期19卷 25-31页

作者：李波马凤蓉史耕先赵方萄李景李琳汪燚蔡有余朱立平中国药品生物制品检定所北京100050 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005 中国医学科学院实验动物研究所北京100050

用我们以往克隆到的1358bp6A8cDNA片段作探针，籍southernblot从一个人扁桃体细胞λgtllCDNA文库筛选，再用RACE方法，克隆到了一个长3300bp的6A8全长CDNA。此CDNA内有一长3188hp（57～3245hp）的开放阅读框架，编码1064个氨基酸的蛋白... 详细信息

用我们以往克隆到的1358bp6A8cDNA片段作探针，籍southernblot从一个人扁桃体细胞λgtllCDNA文库筛选，再用RACE方法，克隆到了一个长3300bp的6A8全长CDNA。此CDNA内有一长3188hp（57～3245hp）的开放阅读框架，编码1064个氨基酸的蛋白质。此蛋白质的氨基酸序列与大鼠一个ER－α－甘露糖苦酶（1040个氨基酸）的相同性和相似性高达78％和82％，与一个酵母－α－甘露糖着酶（1083个氨基酸）的相同性和相似性亦达33％和47％。另外，值得注意的是其260～432位氨基酸序列与人类、猪、大鼠和小鼠的多种α－甘露糖甘醇的相应氨基酸序列的相同性均高于20％，提示这段保守序列与α－甘露糖着酶的功能可能有关。

关键词： cDNA克隆序列分析 α-甘露糖苷酶

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西藏地区一个家族性痉挛性截瘫家系的连锁分析

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中华医学遗传学杂志 1999年第1期16卷 5-8页

作者：李辉黄尚志祝玉拉布白珠穆莹罗会元中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础学院医学遗传室西藏那曲地区妇幼保健院西藏自治区第二医院北京市人民医院

目的对西藏地区的一个常染色体显性遗传的家族性痉挛性截瘫家系的致病基因进行定位研究。方法用常染色体显性遗传痉挛性截瘫的３个基因区域内的９个微卫星位点：Ｄ１４Ｓ２６４、Ｄ１４Ｓ７５、Ｄ１４Ｓ６９、Ｄ１４Ｓ２６６、Ｄ１４Ｓ... 详细信息

目的对西藏地区的一个常染色体显性遗传的家族性痉挛性截瘫家系的致病基因进行定位研究。方法用常染色体显性遗传痉挛性截瘫的３个基因区域内的９个微卫星位点：Ｄ１４Ｓ２６４、Ｄ１４Ｓ７５、Ｄ１４Ｓ６９、Ｄ１４Ｓ２６６、Ｄ１４Ｓ６６、Ｄ２Ｓ２３４７、Ｄ２Ｓ２２５５、Ｄ１５Ｓ１２８和ＧＡＢＲＢ３对该家系进行连锁分析。结果各位点最大Ｌｏｄ值分别为：Ｄ１４Ｓ２６４：０．５１６３（θ＝０．０５）；Ｄ１４Ｓ７５：２．１０７２（θ＝０）；Ｄ１４Ｓ６９：０．２８４０（θ＝０．１０）；Ｄ１４Ｓ２６６：０．９３１１（θ＝０）；Ｄ１４Ｓ６６：０．７９９１（θ＝０）；ＧＡＢＲＢ３：０（θ＝０．４０）；Ｄ１５Ｓ１２８：０（θ＝０．４０）；Ｄ２Ｓ２２５５：０（θ＝０．４０）；Ｄ２Ｓ２３４７：０（θ＝０．４０）。结论本家系中的致病基因与ＳＰＧ３基因区域的Ｄ１４Ｓ７５位点连锁（θ＝０，最大Ｌｏｄ值为２．１０）。

关键词：遗传性痉挛性截瘫多态性连锁分析 PCR

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人胰岛素样生长因子Ⅱ在甲醇营养型酵母***中的表达、分泌和性质研究

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第6期15卷 893-898页

作者：李旌军黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷... 详细信息

为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷型菌株后，筛选到有ＩＧＦ－Ⅱ表达和分泌的阳性转化子；进一步优化表达、培养条件后，ＩＧＦ－Ⅱ在高密度发酵上清中的产量可达６０ｍｇ／Ｌ．对Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ产生的ｒｈＩＧＦ－Ⅱ的性质分析表明，其具有正确的分子量，Ｎ端和较好的生物活性．

关键词：甲醇营养型酵母分泌 IGF-Ⅱ 表达性质

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