检索结果-内蒙古大学图书馆

科学通报 1999年第18期44卷 1981-1985页

作者：陈雨亭 B. Bardoni 余珉朱宁吴冠芸 J.L. Mandel 沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 IGBMC CNRS-INSERM-ULP 67404 Illkirch France

脆性X智力低下蛋白FMRP表达的缺乏可以导致最常见的遗传性智力低下疾病--脆性X综合征. 用酵母双杂交体系筛选与FMRP相互作用的蛋白质,以期通过相互作用的蛋白质研究与FMRP相关的生化途径. 从小鼠胚胎cDNA文库中得到一个与FMRP特异相互... 详细信息

脆性X智力低下蛋白FMRP表达的缺乏可以导致最常见的遗传性智力低下疾病--脆性X综合征. 用酵母双杂交体系筛选与FMRP相互作用的蛋白质,以期通过相互作用的蛋白质研究与FMRP相关的生化途径. 从小鼠胚胎cDNA文库中得到一个与FMRP特异相互作用蛋白的cDNA ( Genbank号af102875 ). 该cDNA编码的蛋白与人的G/T错配DNA胸腺嘧啶糖苷酶( hTDG )高度同源. 通过多种FMRP选择剪接异构体或缺失体与一系列TDG缺失体间相互作用的研究,确定了FMRP与TDG的相互作用发生在FMRP第13外显子(第397～425氨基酸残基)和TDG第122～346氨基酸残基区域内. 上述结果有助于深入研究FMRP涉及的生化途径.

关键词：脆性X智力低下蛋白质 (FMRP) G/T错配DNA胸腺嘧啶糖苷酶(TDG) 酵母双杂交蛋白质相互作用

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sTRAIL在大肠杆菌中的表达及其诱导细胞凋亡活性的研究

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科学通报 1999年第9期44卷 972-975页

作者：朱迅刘彦信马正宇郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩... 详细信息

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩增了TRAIL胞外功能区(sTRAIL) ,并将其插入原核表达载体 ,转化大肠杆菌后 ,可溶型重组蛋白 (rsTRAIL)获得了高效稳定表达 ,其产量达到菌体总蛋白的 30 %左右 .体外研究表明 ,亲和层析纯化后的重组蛋白在 0 .1～ 1 μg/mL的浓度范围内 ,能显著诱导所试全部 7种肿瘤细胞株细胞凋亡 ,但不能诱导正常鼠成纤维细胞株细胞凋亡 ;进一步研究表明 ,rsTRAIL对贲门癌、乳腺癌和恶性胸腺瘤等原代细胞也具有强烈的杀伤作用 ,但不能杀伤正常人外周血淋巴细胞 .此实验结果为rsTRAIL特异性地诱导肿瘤细胞凋亡的生物学作用提供了新的实验证据 ,具有重要的临床应用价值 .

关键词：肿瘤细胞细胞凋亡 sTRAIL 肿瘤坏死因子

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人GRY-RBP基因的表达及其RNA结合活性的初步鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第6期15卷 866-870页

作者：杜光伟陈建和周严汪俊华黄晓玮袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用．人ＧＲＹ－ＲＢＰ是我们实验室最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ，编码一个ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白．ＧＲＹ－ＲＢＰ的全编码区用ＰＣＲ扩增后，克隆到ｐＥＴ３０ａ＋表达... 详细信息

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用．人ＧＲＹ－ＲＢＰ是我们实验室最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ，编码一个ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白．ＧＲＹ－ＲＢＰ的全编码区用ＰＣＲ扩增后，克隆到ｐＥＴ３０ａ＋表达载体中，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得了高效表达，表达的ＧＲＹ－ＲＢＰ重组蛋白占细菌总蛋白的２１％．利用融合在ＧＲＹ－ＲＢＰＮ端的Ｈｉｓ．Ｔａｇ，采取亲和层析的方法纯化了表达的重组蛋白．为了检测ＧＲＹ－ＲＢＰ的ＲＮＡ结合活性及其所结合的ＲＮＡ性质，将表达的蛋白与ｐｏｌｙ（Ａ）－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ结合，发现ＧＲＹ－ＲＢＰ能与ｐｏｌｙＡ（Ａ）结合，结合活性能被可溶性的ｐｏｌｙ（Ａ）、ｐｏｌｙ（Ｃ）减弱．改变ＮａＣｌ浓度和加入不同浓度的酵母ｔＲＮＡ竞争物后，ｐｏｌｙ（Ａ）结合活性不变．

关键词： RNA结合蛋白 RNA结合活性转录后调控 GRY-RBP

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Dnmt3b cDNA及其在小鼠胚胎组织中选择剪接异构体的克隆

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 339-340页

作者：尹斌陈雨亭朱敏罗一菁朱宁徐世才吴冠芸沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

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家族性原发性高血压与血管紧张素原基因M 235T突变关系的研究

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中国循环杂志 1999年第4期14卷 222-224页

作者：黄诚群张红叶丁金凤黄尚志李莹杨军公茂莲田秀珍中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院流行病学研究室北京市100037 中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院北京市100037 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传中心北京市石景山区慢性病防治所

目的：探讨血管紧张素原基因Ｍ２３５Ｔ突变与家族性原发性高血压（ＥＨ）的关系。　　方法：应用脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）杂交和测序检定方法，对一个典型原发性高血压大家系１００名成员［分直系亲属高血压组（ｎ＝４５）、直系亲属... 详细信息

目的：探讨血管紧张素原基因Ｍ２３５Ｔ突变与家族性原发性高血压（ＥＨ）的关系。　　方法：应用脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）杂交和测序检定方法，对一个典型原发性高血压大家系１００名成员［分直系亲属高血压组（ｎ＝４５）、直系亲属正常血压组（ｎ＝３８）及非直系亲属正常血压组（ｎ＝１７）］和正常血压对照家系直系亲属２１名（为正常对照组）成员按＜３５岁和≥３５岁２个年龄层的Ｍ２３５Ｔ突变进行分析。　　结果：比较４组在＜３５岁和≥３５岁２个年龄层的Ｍ２３５Ｔ分布。表明各年龄层中，４组间Ｍ２３５Ｔ基因型及基因频率分布未见显著不同。　　结论：血管紧张素原基因Ｍ２３５Ｔ突变与该家族性原发性高血压没有显著关联；Ｍ２３５Ｔ突变可能不是该家族性原发性高血压的遗传易感因素。

关键词：高血压遗传血管紧张素原 M235T 基因突变

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人甲状旁腺素(1-34)对新生鼠成骨细胞钙含量及钙化结节形成的影响

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中国骨质疏松杂志 1999年第2期5卷 5-8页

作者：韩志岩程锦轩刘景生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室

目的研究外源性ｈＰＴＨ（１－３４）对新生大鼠成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成的影响。方法新生大鼠成骨细胞原代培养，原子吸收分光光度法测细胞基质钙含量，ｖｏｎＫｏｓｓａ染色鉴定钙化结节。结果１０－１０～１０－７ｍｏｌ... 详细信息

目的研究外源性ｈＰＴＨ（１－３４）对新生大鼠成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成的影响。方法新生大鼠成骨细胞原代培养，原子吸收分光光度法测细胞基质钙含量，ｖｏｎＫｏｓｓａ染色鉴定钙化结节。结果１０－１０～１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ｈＰＴＨ（１－３４）持续作用于细胞，基质钙含量与对照相比显著降低；１０－８ｍｏｌ·Ｌ－１ｈＰＴＨ（１－３４）在以４８小时为一循环的前１２小时给药循环８次时基质钙含量达最高峰，与对照组相比增加５７６％，且形成钙化结节最多。结论ｈＰＴＨ（１－３４）刺激成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成与给药方式及药物浓度有关，低浓度间歇性给与ｈＰＴＨ（１－３４）能提高成骨细胞基质钙及促进钙化结节形成。

关键词：钙化结节 PTH 成骨细胞钙含量新生大鼠新生鼠对照组细胞基质影响

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关于《SS-ARDS-NPE》内在联系与本质差别规律的研究——关于SS与ARDS发病机理假说

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中国急救医学 1999年第2期19卷 67-69页

作者：戴顺龄王一镗凌亦凌孙仁宇周宝桐段金虹陆媛张仪华程锦轩中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学部南京医科大学第一附属医院河北医科大学病理生理教研室中国人民解放军304医院

我们认为败血症休克（ＳＳ）、急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）和神经源性肺水肿（ＮＰＥ）有着密切的内在联系，又有明显的本质差别，澄清了这些联系与差别将可能澄清它们的发病机理。我们对教科书上关于ＳＳ经典理论进行反思并提出质... 详细信息

我们认为败血症休克（ＳＳ）、急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）和神经源性肺水肿（ＮＰＥ）有着密切的内在联系，又有明显的本质差别，澄清了这些联系与差别将可能澄清它们的发病机理。我们对教科书上关于ＳＳ经典理论进行反思并提出质疑，对国际ＡＲＤＳ研究无重大突破的...

关键词：休克败血性休克呼吸窘迫综合征发病机理

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Bcl-2抑制CD3ε分子介导的T淋巴细胞凋亡

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中国医学科学院学报 1999年第6期21卷 421-424页

作者：刘彦信郑德先杨学辉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 河北医科大学生物化学教研室石家庄050017

目的研究Bcl-2过量表达对人Jurkat T淋巴细胞凋亡的影响.方法采用电穿孔法将bcl-2基因表达载体转染CD8ε阳性的人Jurkat T淋巴细胞(TJK),获得稳定表达Bcl-2的细胞株(TJK/Bcl-2)后,用抗CD8单克隆抗体刺激和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果Bc... 详细信息

目的研究Bcl-2过量表达对人Jurkat T淋巴细胞凋亡的影响.方法采用电穿孔法将bcl-2基因表达载体转染CD8ε阳性的人Jurkat T淋巴细胞(TJK),获得稳定表达Bcl-2的细胞株(TJK/Bcl-2)后,用抗CD8单克隆抗体刺激和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果Bcl-2过量表达可显著抑制TJK细胞凋亡.结论Bcl-2参与CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡的调控.

关键词： Bcl-2基因过量表达 CD3εT淋巴细胞凋亡

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重组诱导型一氧化氮合酶在NG108-15细胞中稳定表达及其生物学特性

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实验生物学报 1999年第4期32卷 335-347页

作者：臧梦维汪青沈琦刘景生彭学贤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国科学院微生物研究所北京100080

本文用重组iNOS基因真核表达载体转染NG108-15神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞株,获得G418抗性克隆。在稳定表达iNOS基因2~#克隆中,胞浆相酶活性增加,伴有NO_2^-含量和胞内cGMP水平增高,提示iNOS基因表达参与NO-cGMP信号转导通路,且可... 详细信息

本文用重组iNOS基因真核表达载体转染NG108-15神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞株,获得G418抗性克隆。在稳定表达iNOS基因2~#克隆中,胞浆相酶活性增加,伴有NO_2^-含量和胞内cGMP水平增高,提示iNOS基因表达参与NO-cGMP信号转导通路,且可被L-NNA和MB所阻断。蛋白表达产物的亚细胞定位分析显示功能性iNOS主要位于细胞胞浆中。对转染细胞做外源基因整合、转录和翻译水平鉴定,证实均有较高水平iNOS mR-NA转录和特异性蛋白表达,成功地建立了稳定表达iNOS基因的工程细胞。

关键词： iNOS NG108-15 基因表达基因转移抑制剂

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表达反义单核细胞趋化蛋白-1的重组逆转录病毒对家兔动脉平滑肌单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响

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中国动脉硬化杂志 1999年第4期7卷 283-287页

作者：李福生王宗立许漫乔绘红刘佩毛张华任国锋赵三妹佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学研究室北京100005

为研究反义单核细胞趋化蛋白－１转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用，首先构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－１基因的逆转录病毒重组体，并观察它在培养的细胞中的表达。将家兔单核细胞趋化蛋白－１ｃＤＮＡ反向插入到ｐＬＮ... 详细信息

为研究反义单核细胞趋化蛋白－１转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用，首先构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－１基因的逆转录病毒重组体，并观察它在培养的细胞中的表达。将家兔单核细胞趋化蛋白－１ｃＤＮＡ反向插入到ｐＬＮＣＸ，构成ＬＮＣＸ－ａｎｔｉ－ＭＣＰ－１重组病毒质粒。再将重组质粒转染φ－２细胞，继以φ－２细胞产生的病毒上清感染ＰＡ３１７细胞，取得Ｇ４１８ＰＡ３１７抗细胞克隆。上述细胞经扩增培养，收集病毒上清并感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞后进行检测。结果发现，病毒的滴度为５．６×１０７ＣＦＵＬ，感染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞中有重组病毒的整合。重组病毒感染培养的家兔动脉平滑肌细胞后，用聚合酶链反应检测发现，感染的平滑肌细胞基因组ＤＮＡ中有重组病毒整合；ＲＮＡｓｌｏｔ杂交结果显示，感染的平滑肌细胞中有反义单核细胞趋化蛋白－１的表达，与未感染的平滑肌细胞相比，感染的平滑肌细胞中单核细胞趋化蛋白－１ｍＲＮＡ的表达明显受到抑制。结果提示，反义单核细胞趋化蛋白－１逆转录病毒表达载体在培养的动脉平滑肌中能表达反义基因并抑制靶基因的表达。

关键词：动脉粥样硬化 MCP-1 反义RNA 逆转录病毒

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