检索结果-内蒙古大学图书馆

多聚TAR-CoreRNA诱饵对人免疫缺陷病毒1型Tat蛋白活性的抑制作用

中国生物化学与分子生物学报 1998年第5期14卷 628-631页

作者：白龙川袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室

为了抑制Ｔａｔ蛋白的反式激活作用，在细胞内大量表达外源ＴＡＲＲＮＡ使其与Ｔａｔ蛋白结合，从而竞争性抑制其与ＨＩＶ－１ＬＴＲ的ＴＡＲＲＮＡ元件结合．构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲＹＬ１５８（－１５８～＋１８０）为启动子，分别... 详细信息

为了抑制Ｔａｔ蛋白的反式激活作用，在细胞内大量表达外源ＴＡＲＲＮＡ使其与Ｔａｔ蛋白结合，从而竞争性抑制其与ＨＩＶ－１ＬＴＲ的ＴＡＲＲＮＡ元件结合．构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲＹＬ１５８（－１５８～＋１８０）为启动子，分别含有４，８和１５个拷贝的ＴＡＲ－ＣｏｒｅＲＮＡ诱饵（ｄｅｃｏｙ）表达质粒；以荧光酶基因为报告基因，检测了瞬时共转染体系中含不同拷贝数的ＴＡＲ－ＣｏｒｅＤＮＡ转录产物对Ｔａｔ蛋白反式激活作用的影响．结果证明，ＴＡＲ－ＣｏｒｅＲＮＡ诱饵对Ｔａｔ蛋白活性具有很强的抑制作用，其抑制程度与ＴＡＲ－ＣｏｒｅＤＮＡ串联体的拷贝数有关．

关键词：人免疫缺陷病毒 Tat TAR-Core RNA 诱饵

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脊椎动物中枢神经系统发育相关基因的级联调控

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基础医学与临床 1998年第5期18卷 77-80页

作者：金虎林袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

脊椎动物的中枢神经系统是一系列在组成上高度复杂的细胞构成的。它的形成经历了一个极其复杂的发育分化过程。这一过程受到了多种基因的级联调控（ＣａｓｃａｄｅＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ）。参与这一级联调控网络的基因不仅包括了同源... 详细信息

脊椎动物的中枢神经系统是一系列在组成上高度复杂的细胞构成的。它的形成经历了一个极其复杂的发育分化过程。这一过程受到了多种基因的级联调控（ＣａｓｃａｄｅＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ）。参与这一级联调控网络的基因不仅包括了同源盒基因等编码转录因子的基因，其它一...

关键词：脊椎动物中枢神经系统发育相关基因级联调控

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利用DDRT-PCR技术分析神经生长因子低亲和力受体诱导的细胞凋亡过程中基因表达的差异

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第5期14卷 610-616页

作者：顾继杰黄秉仁蔡良琬中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１... 详细信息

转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞与有血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞以及去血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｐ细胞基因表达的差异．克隆了数个特异或差异表达的短ｃＤＮＡ片段，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实其中两个片段ＬＩＡＲＥＳＴ－１和ＬＩＡＲＥＳＴ－２表达量在凋亡细胞中显著高于不发生凋亡的细胞中，ＧｅｎＢａｎｋ检索表明此二片段为新的ｃＤＮＡ序列并给予登录号Ｕ４７３１５和Ｕ４７３１６．另有一个ｃＤＮＡ片段ＬＩＡＲＣＤ－３在凋亡细胞中受到了明显的抑制，经检索为一已知的与前强啡肽原上游调控区结合的ＤＮＡ结合蛋白ｃＤＮＡ编码区的一部分。

关键词：神经生长因子低亲和力受体细胞凋亡差示PCR

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人工合成表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中的高效表达

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第5期14卷 512-517页

作者：黄秉仁蔡良琬廖洪涛唐申秀周海涛中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型... 详细信息

选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型酵母株ＧＳ１１５后筛选出整合型ＭｕｔＳＨｉｓ＋基因型菌株．高密度培养及诱导表达后该株可分泌具完好生物活性和正确物理化学性质的人表皮生长因子，产量达１００ｍｇ／Ｌ，经３次柱层析纯度达９５％以上。

关键词：人表皮生长因子甲基营养型酵母高效表达

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单项乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性意义的研究

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中国公共卫生 1998年第9期14卷 515-516页

作者：刘蓬勃梁争论乌正赉祈自柏徐慧文钟熙王学良曾宪嘉李辉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室卫生部药品生物制品鉴定所西安医科大学流行病学教研室

对１５名单项抗－ＨＢｃ阳性者按０、１、６方案接种３针１０μｇ血源性乙肝疫苗，１５．４％出现回忆反应，提示这部分人为过去感染已获得免疫；２６．７％产生原发性反应，这部分人可能是血清学假阳性结果；６０．０％对疫苗无、弱应... 详细信息

对１５名单项抗－ＨＢｃ阳性者按０、１、６方案接种３针１０μｇ血源性乙肝疫苗，１５．４％出现回忆反应，提示这部分人为过去感染已获得免疫；２６．７％产生原发性反应，这部分人可能是血清学假阳性结果；６０．０％对疫苗无、弱应答，可能代表“低水平”ＨＢｓＡｇ携带者。对经ＥＬＩＳＡ和ＲＩＡ两种方法确定的７０例单项抗－ＨＢｃ阳性者用ＰＣＲ方法检测ＨＢＶＤＮＡ，阳性率为１２．９％，说明单项抗－ＨＢｃ阳性是与ＨＢＶ携带有关的指标。

关键词：乙型肝炎核心抗体阳性 DNA

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连二亚硫酸钠致PC12和NG108-15细胞拟缺血损伤研究

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中国药理学通报 1998年第6期14卷 525-525页

作者：刘娜左萍萍周帆张放刘景生任民峰中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室

目的利用稳定的细胞模型进行药物机制研究，对探讨药物等对缺血的影响十分重要。方法结合形态学和受体功能研究方法，利用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基质缺糖导致拟缺血细胞，并对其细胞功能和缺血机制进行了探讨。结果这种... 详细信息

目的利用稳定的细胞模型进行药物机制研究，对探讨药物等对缺血的影响十分重要。方法结合形态学和受体功能研究方法，利用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基质缺糖导致拟缺血细胞，并对其细胞功能和缺血机制进行了探讨。结果这种拟缺血模型造成了体外培养细胞上类似与体内细胞缺血的变化，细胞肿胀变性甚至坏死，细胞膜上兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）的Ｎ甲基Ｄ天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体活性增强，伴随其他功能性受体如胆碱能（Ｍ、Ｎ）受体活性降低。经ＮＭＤＡ受体特异性拮抗剂———２氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）作用后，ＮＭＤＡ受体激活明显被抑制，细胞所受缺血损伤也有减轻。同时将ＮＧ细胞与ＰＣ细胞的胆碱能受体活性变化进行了比较，发现ＮＧ活性变化与连二亚硫酸钠剂量变化关系更为稳定。结论提示利用连二亚硫酸钠可模拟体内缺血机制。

关键词：连二亚硫酸钠胆碱能受体缺血损伤

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心血管疾病中5-羟色胺2A受体及其信息转导的变化

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国外医学（老年医学分册） 1998年第4期19卷 152-158页

作者：庞懿许澍淮中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理研究室100005

5-羟色胺使较大的动脉收缩,血管平滑肌和成纤维细胞增殖,血小板聚集,对其它血管收缩剂、血小板聚集剂以及生长因子的作用存在放大效应。5-羟色胺的这些效应一般为5-羟色胺2A受体调节。本文综述了心血管疾病中,血管平滑肌和血小板对5-羟... 详细信息

5-羟色胺使较大的动脉收缩,血管平滑肌和成纤维细胞增殖,血小板聚集,对其它血管收缩剂、血小板聚集剂以及生长因子的作用存在放大效应。5-羟色胺的这些效应一般为5-羟色胺2A受体调节。本文综述了心血管疾病中,血管平滑肌和血小板对5-羟色胺反应性、5-羟色胺2A受体以及信息转导变化的研究进展。目的为探讨心血管疾病中,血管平滑肌和血小板对5-羟色胺反应性增高机理,以及从阻断受体和影响受体——效应器偶联反应入手,为寻求治疗心血管疾病新药提供信息。

关键词：受体血管平滑肌信息传导血清素

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混合样品中微量SRY基因的毛细管电泳检测

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中华医学检验杂志 1998年第2期21卷 92-95页

作者：许琪韩富天范钰林秉承沈岩吴冠芸中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国科学院化学物理研究所

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结... 详细信息

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结果毛细管电泳可检测到２０ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于３～４个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／６００，琼脂糖凝胶电泳可检测到７４ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于１３个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／３。毛细管电泳检测微量目的基因扩增产物的综合灵敏度是琼脂糖凝胶电泳的７５０倍。结论毛细管电泳灵敏度高、重现性好，与ＰＣＲ技术结合可广泛用于各种混合样品中微量核酸分子的检测。

关键词：聚合酶链反庆 SRY基因毛细管电泳基因诊断

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大鼠运端直肠肛管一氧化氮能神经元组织化学染色的观察

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中国神经免疫学和神经病学杂志 1998年第3期5卷 172-175页

作者：李莉李勇波谭会兵万选才林嘉友中国医学科学院基础医学研究所免疫研究室中国医学科学院中国协和医科大学北京基础医学研究解剖教研室北京100730

目的观察一氧化氮能（NO-ergic）神经元在大鼠肛管直肠壁的分布。方法用Wistar成年大鼠，取肛管直肠1．5cm长。剥离粘膜，将直肠肌层进行一氧化氮合酶（NOsynthase，NOS）组织化学染色（NADPH－diaphorase，NADPH－d）。结果距动物肛门0... 详细信息

目的观察一氧化氮能（NO-ergic）神经元在大鼠肛管直肠壁的分布。方法用Wistar成年大鼠，取肛管直肠1．5cm长。剥离粘膜，将直肠肌层进行一氧化氮合酶（NOsynthase，NOS）组织化学染色（NADPH－diaphorase，NADPH－d）。结果距动物肛门0．5cm的直肠肛管肌层存在一定数目的NOS阳性神经元，和与血管伴行的NO能神经纤维，而结肠的远侧段（直肠肛管的吻侧）存在由神经节和神经纤维构成的规则的像蜂房样的典型的肠神经丛。结论在直肠肛管的NO能神经元分布呈现两型区带，即近侧部的规则网状区和远侧部的不规则散在区。

关键词：直肠肛管一氧化氮合酶 NO能神经元大鼠

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小鼠红细胞分化相关因子cDNA全序列的克隆和结构特征分析

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解剖学杂志 1998年第6期21卷 206-207页

作者：章正琰刘世广章静波薛社普中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室 100005

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