检索结果-内蒙古大学图书馆

Construction of an inducible nitric-oxide synthase gene transferring vector mediated by retrovirus

Acta Pharmacologica Sinica 1998年第2期 26-32页

作者：刘景生臧梦维彭学贤胡萍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室中国科学院微生物研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的：构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转移载体．方法：应用ＤＮＡ重组和ＰＣＲ扩增技术．结果：通过二步克隆，从质粒ｐＫＳｉＮＯＳ分离编码巨噬细胞ｉＮＯＳ的全长ｃＤＮＡ，亚克隆于中间载体ｐＳＰ７２，... 详细信息

目的：构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转移载体．方法：应用ＤＮＡ重组和ＰＣＲ扩增技术．结果：通过二步克隆，从质粒ｐＫＳｉＮＯＳ分离编码巨噬细胞ｉＮＯＳ的全长ｃＤＮＡ，亚克隆于中间载体ｐＳＰ７２，调整插入片段二端酶切位点；进而构建含ｉＮＯＳ基因、巨细胞病毒启动子和ｎｅｏ抗性基因的逆转录病毒载体ｐＬＮＣＸｉＮＯＳ．限制性酶切分析和ＰＣＲ鉴定证实，重组体ｉＮＯＳ插入片段的大小和方向正确．结论：获得含ｉＮＯＳ基因逆转录病毒表达载体，为建立ｉＮＯＳ基因修饰的神经细胞模型，研究ＮＯ／ＮＯＳ在阿片耐受依赖中的作用奠定基础．

关键词：一氧化氮合酶互补DNA 基因表达调控真核细胞重组DNA 逆转录病毒遗传载体限制性酶切图谱聚合酶链式反应

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利用一种新的DNA操作系统克隆人神经生长因子

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中国医学科学院学报 1998年第2期20卷 126-126页

作者：王欣黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经趋化因子。它对神经细胞具有营养与保护作用,对损伤神经具有调节与修复功能。为大量获得重组人NGF,本研究采用构建杂合克隆因子(hybrid clonemid)进行DNA操作,使NGF基因与pET-16 b载体重组。根据人NG... 详细信息

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经趋化因子。它对神经细胞具有营养与保护作用,对损伤神经具有调节与修复功能。为大量获得重组人NGF,本研究采用构建杂合克隆因子(hybrid clonemid)进行DNA操作,使NGF基因与pET-16 b载体重组。根据人NGF基因序列合成一对PCR引物,并在引物的5’端加上与载体互补的一小段序列(21bp)。用此引物进行PCR扩增,获得NGF基因扩增产物。将载体pET-16b用Nde I酶切使其成为线性载体(为避免克隆过程中载体自身转化的本底,此步酶切要完全)。为使NGF基因位于正确的阅读框架上并与因子Xa特异酶切位点相接,在得到酶切完全的线性载体后,应用T4DNA聚合酶的3’→5’外切酶活性,将3’端AC去除

关键词： DNA 基因神经 NGF 酶切操作系统计算机系统

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双重引物聚合酶链反应同时检测人乳头瘤病毒及沙眼衣原体

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中华微生物学和免疫学杂志 1997年第6期17卷 471-474页

作者：许雪梅司静懿周四方刘世德徐建青宋国兴李昆王家璧刘耀华王宏伟中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物物理室

本研究于国内首次建立了人乳头瘤病毒／沙眼衣原体两对引物ＰＣＲ技术，即ＨＰＶ／ＣＴ双重引物ＰＣＲ。将设计在人乳头瘤病毒（Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６型早期基因Ｅ１保守区的一对共有引物和设计在沙眼衣... 详细信息

本研究于国内首次建立了人乳头瘤病毒／沙眼衣原体两对引物ＰＣＲ技术，即ＨＰＶ／ＣＴ双重引物ＰＣＲ。将设计在人乳头瘤病毒（Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６型早期基因Ｅ１保守区的一对共有引物和设计在沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ，ＣＴ）隐蔽质粒区的一对引物同时加入同一反应体系，一次反应可同时检出泌尿生殖道标本中存在的ＨＰＶ和ＣＴ的单独或混合感染；对设计的两对引物做了敏感度、特异性试验。结果表明，０．１ｆｇＨＩＺＰ－ＨＰＶＤＮＡ及１～２个拷贝的沙眼衣原体即可被检出，且只对ＣＴＬ２ＥＢ血清型及ＨＰＶ６、１１、１６、１８型ＤＮＡ有扩增产物出现，而对人基因组ＤＮＡ、ＨＣＭＶＤＮＡ、ＨＳＶ－２ＤＮＡ、大肠杆菌Ｍ１０９ＤＮＡ、奈瑟氏淋球菌ＡＴＴＣＣ２９４０２ＤＮＡ、解脲支原体Ｔ８ＤＮＡ无扩增产物；并用该方法对２９例临床标本（１８例尖锐湿疣、１１例宫颈癌）中的ＨＰＶ和ＣＴ感染进行了检测，同时用ＨＰＶ多重引物ＰＣＲ对２９例病理确诊后标本中ＨＰＶ感染进行了对比检测；用ＣＴ－ＭＯＭＰ蛋白基因区单重引物ＰＣＲ对１８例尖锐湿疣的ＣＴ感染进行了对比检测。结果表明，ＨＰＶ和ＣＴ相应的两种检测方法的检测?

关键词：人乳头瘤病毒沙眼衣原体聚合酶链反应

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转移性癌细胞对表皮生长因子和层粘连蛋白的反应及其三磷酸肌醇含量的测定

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中华医学杂志 1997年第9期77卷 665-667页

作者：胡新荣高进黎艳霞张德昌中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理研究室

为探讨不同转移性癌细胞（ＭＦＣ和ＣＮＥ－２Ｚ）不同克隆细胞株的三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量、侵袭能力以及这些细胞对表皮生长因子（ＥＧＦ）和层粘连蛋白（ＬＮ）的反应性。方法利用放射性受体竞争结合法和人工基底膜（ｍａｔｒｉｇ... 详细信息

为探讨不同转移性癌细胞（ＭＦＣ和ＣＮＥ－２Ｚ）不同克隆细胞株的三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量、侵袭能力以及这些细胞对表皮生长因子（ＥＧＦ）和层粘连蛋白（ＬＮ）的反应性。方法利用放射性受体竞争结合法和人工基底膜（ｍａｔｒｉｇｅｌ）侵袭试验法进行了测定。结果显示了低转移性癌细胞比高转移性者的ＩＰ３含量高，对ＥＧＦ的反应性更大，但ＭＦＣ高、低转移性克隆细胞对ＬＮ的反应性差别无显著意义。而ＣＮＥ－２Ｚ高转移细胞比低转移者对ＬＮ的反应性更大。结论说明高、低转移性癌细胞在跨膜信息传递方面存在差别，深入研究其具体机制将有重要意义。

关键词：肿瘤转移表皮生成因子层粘连蛋白三磷酸肌醇

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胞内钙释放在胃泌素引起胃平滑肌细胞收缩中的作用

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生理学报 1997年第2期49卷 197-203页

作者：周吕罗洁新 100005 中国协和医科大学基础医学院生理研究室!北京中国医学科学院基础医学研究所!北京

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8... 详细信息

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8～16×10－8mol／L剂量范围内，呈剂量依赖性。（2）丙谷胺或抗胃泌素血清可以阻断G5对胃肌细胞的收缩反应，而阿托品则不影响G5的作用。（3）G5与乙酸胆碱对平滑肌细胞收缩有相加作用。（4）胞内钙释放阻断剂TMB-8可抑制G5对胃肌细胞的收缩作用。（5）G5作用于胃窦平滑肌细胞后胞内游离Ca2+显著上升。上述结果提示：胃泌素通过特异性受体引起胃平滑肌细胞收缩，其收缩作用通过胞内Ca2+释放介导。

关键词：胃平滑肌细胞五肽胃泌素收缩游离钙

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GRP和VIP对E2诱致的垂体催乳素(PRL)瘤细胞PRL基因转录的影响

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生理学报 1997年第1期49卷 79-87页

作者：狄安稞单惠敏黄曼影许荣■ 北京中国医学科学院基础医学研究所!中国协和医科大学基础医学院生理研究室大连医科大学 100005

实验应用雄性SD大鼠，皮下埋植内置10mg雌二醇（E2）硅胶管3个月致垂体催乳素（prolactin，PRL）瘤后，取PRL瘤细胞进行体外原代培养，并应用原位杂交方法，研究不同剂量的胃泌素释放肽（gastrin－releasingpeptide，GRP）和血管活性肠... 详细信息

实验应用雄性SD大鼠，皮下埋植内置10mg雌二醇（E2）硅胶管3个月致垂体催乳素（prolactin，PRL）瘤后，取PRL瘤细胞进行体外原代培养，并应用原位杂交方法，研究不同剂量的胃泌素释放肽（gastrin－releasingpeptide，GRP）和血管活性肠肽（vasoactiveintestinalpolypeptide，VIP）以及E2对离体培养的垂体PRL瘤细胞PRL基因转录的影响。结果如下：GRP，VIP分别与PRL瘤细胞孵育24h后，10－8mol／L，10－7mol／L的GRP均不影响PRL瘤细胞内PRLmRNA水平，但10-6mol／L的GRP可使胞内PRLmRNA水平下降20％（P＜0．05）。在本实验所采用的浓度范围内，VIP均可升高PRL瘤细胞内PRLmRNA水平，10－8mol／L，10－7mol／L，10－6mol／L的VIP分别使胞内PRLmRNA升高为对照组的1．60，2．10，2．21倍（P＜0．05）。三种浓度的E2分别与PRL瘤细胞孵育48h后，10－8mol／LE2不影响胞内PRLmRNA水平，但10－7mol／L，10－6mol／L的E2则分别可使胞内PRLmRNA升高为对照组的2．80，2．92倍（P＜0．05）。上述结果表明：GRP和VIP可能分别抑制和增强由E2诱致的垂体PRL瘤细胞PRL基因的转录；一定浓度的E2可能直接涉及E2诱发垂体PRL瘤时伴高PRL血症。

关键词： GRP VIP E2 PRL瘤细胞培养原位杂交基因转录

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连接介导PCR及其在体内足迹研究中的应用

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生物化学与生物物理进展 1997年第3期24卷 224-227页

作者：纪新军刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接... 详细信息

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接介导聚合酶链反应的敏感性 .

关键词：连接介导PCR 连接子体内足迹法聚合酶链反应

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积极开展遗传病的预防工作

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中华儿科杂志 1997年第12期35卷 619-620页

作者：施惠平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

积极开展遗传病的预防工作施惠平近年来，随着医学的发展、妇幼保健工作的开展、预防接种的普及，我国营养不良性疾病、感染性疾病和传染病的发病率明显下降，遗传性疾病比例上升，预防遗传性疾病发病的问题日益重要。全国统计资料表明... 详细信息

积极开展遗传病的预防工作施惠平近年来，随着医学的发展、妇幼保健工作的开展、预防接种的普及，我国营养不良性疾病、感染性疾病和传染病的发病率明显下降，遗传性疾病比例上升，预防遗传性疾病发病的问题日益重要。全国统计资料表明，目前我国有残疾人约５１００多万，...

关键词：遗传病诊断预防

来源：评论

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猫叫综合征关键区域定位于5p15.2的D5S713-D5S18区域

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中华医学遗传学杂志 1997年第5期14卷 263-267页

作者：但美霞 Niebuhr A 张小晓张秀清李明月戴理高春生贾开亮赵非非宋莉叶珏马绍武施惠平刘国仰黄尚志杨焕明 Udar N Niebuhr E 罗会元中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室

猫叫综合征是由５号染色体短臂缺失引起的染色体缺失综合征。根据染色体综合征“关键区域”的概念，以及近１０年来对１０６例５ｐ缺失病例的临床诊断、细胞遗传学及分子遗传学分析，将猫叫综合征的关键区域定位于５ｐ１５．２，位于Ｄ... 详细信息

猫叫综合征是由５号染色体短臂缺失引起的染色体缺失综合征。根据染色体综合征“关键区域”的概念，以及近１０年来对１０６例５ｐ缺失病例的临床诊断、细胞遗传学及分子遗传学分析，将猫叫综合征的关键区域定位于５ｐ１５．２，位于Ｄ５Ｓ７１３和Ｄ５Ｓ１８两个遗传标记之间的区域。为研究该病提供了遗传学资料。

关键词：猫叫综合征 5p缺失关键区域染色体缺失综合征

来源：评论

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中药仙贞片对气阴两虚肾虚血瘀型糖尿病患者红细胞膜Na^+-K^+-ATP酶等的影响

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中国中西医结合杂志 1997年第1期17卷 13-16页

作者：潘明政郭赛珊梁晓春陈祥银西品香王香定田国庆张克俭申涛中国医学科学院中医科中国协和医科大学中医科北京协和医院中医科中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室中国协和医科大学基础医学研究所

目的：为探讨中药仙贞片改善糖尿病患者Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的作用。方法：观察７２例气阴两虚、肾虚血瘀非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者（中药仙贞片组）治疗前后Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ... 详细信息

目的：为探讨中药仙贞片改善糖尿病患者Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的作用。方法：观察７２例气阴两虚、肾虚血瘀非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者（中药仙贞片组）治疗前后Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶、全血粘度、血糖及临床症状等的变化。结果：治疗组（中药仙贞片组）疗后Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶．Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＩ”酶活性升高，有显著性意义（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），全血粘度和临床症状有一定程度的改善，降低血糖的总有效率为空腹血糖（ＦＢＧ）７７．Ｓ％、餐后２ｈ血糖（２°ＰＢＧ）６９．４％；而对照组（安慰剂组）全血粘度及临床症状元显著改善，降低血糖的总有效率为ＦＢＧ．４１．７％、２°ＰＧＢ３８．９％。结论：仙贞片具有改善患者Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性，改善全血粘度，降低血糖及改善临床症状等作用，为仙贞片治疗气阴两虚、肾虚血瘀ＮＩＤＤＭ患者提供实验依据。

关键词：糖尿病中药仙贞片红细胞膜治疗

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