检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2013年第6期33卷 685-689页

作者：于淼吕宏娟尹洪超中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系北京100005

目的探讨氧化低密度脂蛋白对培养血管内皮细胞表达基因Rictor的影响。方法分离并培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度(10、20、40和80 mg/L)氧化低密度脂蛋白作用24 h后,用RT-PCR及Western blot检测Rictor的表达情况,并检测转染Rictor后,... 详细信息

目的探讨氧化低密度脂蛋白对培养血管内皮细胞表达基因Rictor的影响。方法分离并培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度(10、20、40和80 mg/L)氧化低密度脂蛋白作用24 h后,用RT-PCR及Western blot检测Rictor的表达情况,并检测转染Rictor后,蛋白激酶Akt及eNOS磷酸化的变化,用硝酸还原酶还原法测定NO释放量。结果氧化低密度脂蛋白显著降低Rictor的mRNA及蛋白的表达量(P<0.01),使Rictor-mTOR复合物形成减少。转染Rictor后,不仅Rictor表达增加而且使蛋白激酶Akt及eNOS磷酸化增加;内皮细胞NO释放量增多(P<0.05)。结论影响内皮细胞表达Rictor,是氧化低密度脂蛋白诱发血管内皮细胞功能不良的重要机制之一。

关键词：血管内皮细胞氧化低密度脂蛋白 Rictor eNOS

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DNA损伤与神经源性肿瘤

DNA损伤与神经源性肿瘤

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全国肿瘤病因学和肿瘤流行病学学术会议

作者：张琪牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院病理学系

目的：髓母细胞瘤是一种发生于小脑的恶性侵袭性胚胎性肿瘤,好发于儿童,伴明显的神经元分化,易通过脑脊液途径播散.虽然Shh和Wnt通路与髓母细胞瘤的发生相关(Ptc,Sufu,Apc等基因突变),仍有部分肿瘤的病因尚不清楚.多聚ADP核糖聚合酶(Pol...

目的：髓母细胞瘤是一种发生于小脑的恶性侵袭性胚胎性肿瘤,好发于儿童,伴明显的神经元分化,易通过脑脊液途径播散.虽然Shh和Wnt通路与髓母细胞瘤的发生相关(Ptc,Sufu,Apc等基因突变),仍有部分肿瘤的病因尚不清楚.多聚ADP核糖聚合酶(Poly-(ADP-ribose) polymerase-1, PARP-1)是DNA末端结合蛋白,在DNA损伤应答反应中通过催化靶蛋白多聚ADP核糖基化参与损伤DNA的重组修复、细胞凋亡、增殖以及维持基因组稳定性.方法：前期实验结果表明敲除PARP-1基因在细胞周期检验点缺陷的条件下可引起小鼠小脑髓母细胞瘤的发生,该肿瘤具备人类小脑髓母细胞瘤的一些典型特征,因此PARP-1敲除的模式动物为我们提供了理想的模型.结果：为进一步研究PARP-1在小鼠髓母细胞瘤发生中的机制,我们发现肿瘤发生早期的细胞有明显的DNA损伤聚集,并且同源重组修复(HR)途径的某些基因在肿瘤形成期都有再激活现象,并且其表达受细胞周期调控的影响,提示HR途径与FARP-1缺失的髓母细胞瘤发生密切相关.为探讨PARP-1在人髓母细胞瘤发生中的作用,我们进一步通过测序法分析了25例髓母细胞瘤患者PARP-1.结论：虽然目前进行在小样本分析中基因突变的机率很低,但PARP-1蛋白在髓母细胞瘤中的表达具有明显的异质性,提示PARP-1在人髓母细胞瘤发生中的可能作用.

关键词：

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多核巨细胞在小鼠黑色素瘤细胞转移中的作用机制研究

引用

中华临床医师杂志（电子版） 2013年第14期7卷 133-135页

作者：米蕊芳刘福生金贵善北京市神经外科研究所首都医科大学附属北京天坛医院神经外科 100050 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系

目的研究多核巨细胞在黑色素瘤转移中的作用及其相应分子机制。方法用聚乙二醇细胞融合法体外获取黑色素瘤多核巨细胞,通过流式分选黑色素瘤多核巨细胞。小鼠皮下及尾静脉注射黑色素瘤多核巨细胞并用游标卡尺测量皮下肿瘤体积,电子天平... 详细信息

目的研究多核巨细胞在黑色素瘤转移中的作用及其相应分子机制。方法用聚乙二醇细胞融合法体外获取黑色素瘤多核巨细胞,通过流式分选黑色素瘤多核巨细胞。小鼠皮下及尾静脉注射黑色素瘤多核巨细胞并用游标卡尺测量皮下肿瘤体积,电子天平称重荷瘤肺组织以定量肿瘤转移能力。Affymatrix基因芯片分析差异表达的基因,Ingenuity Pathways Analysis(IPA)软件进行基因功能分析。结果细胞融合并流式分选成功获得黑色素瘤多核巨细胞。黑色素瘤多核巨细胞皮下生长速度减慢但肺转移能力明显增强。黑色素瘤多核巨细胞与转移相关的β-Tubulin组基因表达明显升高。黑色素瘤多核巨细胞的染色体呈现稳定性。结论黑色素瘤多核巨细胞促进黑色素瘤细胞转移能力,黑色素瘤多核巨细胞与转移相关的β-Tubulin组基因表达升高。

关键词：巨细胞黑色素瘤肿瘤转移小鼠

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囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用

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中国肿瘤临床 2012年第12期29卷 817-821页

作者：赵文晶杨振丽顾蓓冯海凉张敏刘艳艳李占稳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院病理学系北京市100005

目的：探讨囊泡膜蛋白相关蛋白（VAP33）过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移的影响。方法：反转录获得VAP33cDNA，利用基因重组技术构建VAP33-GFP融合基因慢病毒表达载体（pWPXL-VAP33），在脂质体Lipofectamine2000介导下与... 详细信息

目的：探讨囊泡膜蛋白相关蛋白（VAP33）过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移的影响。方法：反转录获得VAP33cDNA，利用基因重组技术构建VAP33-GFP融合基因慢病毒表达载体（pWPXL-VAP33），在脂质体Lipofectamine2000介导下与辅助质粒（PsPAx2、MD2G）共转染293T细胞包装生产重组慢病毒。取病毒上清感染内源性低表达VAP33的DG6细胞，通过荧光显微镜挑选、Western-blot鉴定获得VAP33稳定过表达的阳性单克隆细胞株（DG6-VAP33）。M1vr法检测细胞增殖情况，Transwell和集落形成检测肿瘤细胞体外侵袭、成瘤能力。同时建立小鼠皮下移植瘤模型，连续6周观察VAP33过表达对活体内肿瘤细胞生长、成瘤、转移能力的影响。结果：重组慢病毒表达载体pWPXL-VAP33构建成功，包装滴度达6×10^3IU／mL，感染DG6细胞后筛选到VAP33稳定过表达细胞株（DG6-VAP33）。与DG6细胞相比，DG6-VAP33细胞体外增殖减慢，每孔集落数分别为（52±8）个和（36±5）个（P〈0．05）；Transwell方法观察到，DG6-VAP33细胞体外侵袭能力显著下降，穿膜细胞数（14＋11）个少于DG6（36±17）个（P〈0．01）。通过6周的连续观察，DG6-VAP33组肿瘤生长速度显著慢于DG6组，成瘤率50％（5／10）、肺转移率（0）也明显降低（DG6组成瘤率100％、肺转移率80％）。结论：VAP33过表达可抑制肿瘤细胞的增殖、成瘤及侵袭转移能力。

关键词：树突状肉瘤细胞株囊泡膜蛋白相关蛋白增殖侵袭转移

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K—ras基因突变相关的肿瘤靶向治疗进展

引用

中华病理学杂志 2012年第1期41卷 59-62页

作者：李占稳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

肿瘤的临床靶向治疗是近年来研究的热点，决定了肿瘤个体化治疗的发展方向。目前针对肿瘤中高突变基因的靶向药物取得了显著的临床效果，但是在发展过程中也不断地碰到各种困难。本文以人类肿瘤中高突变的K—ras基因为对象，总结了近年... 详细信息

肿瘤的临床靶向治疗是近年来研究的热点，决定了肿瘤个体化治疗的发展方向。目前针对肿瘤中高突变基因的靶向药物取得了显著的临床效果，但是在发展过程中也不断地碰到各种困难。本文以人类肿瘤中高突变的K—ras基因为对象，总结了近年来K—ras基因突变相关靶向药物在临床上应用的研究成果和发展前景。

关键词： ras基因突变人类肿瘤靶向治疗临床效果靶向药物个体化治疗突变基因

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多克隆同步筛选及验证胰腺癌肺转移细胞亚群

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中国老年学杂志 2012年第10期32卷 2122-2123页

作者：田文嘉杜洪震卞晓翠李开龙中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

目的利用混合多克隆细胞亚群筛选和验证分析具有肺转移能力细胞亚群和基因。方法混合多克隆细胞亚群,分别尾静脉接种于喂饮强力霉素和对照两组裸小鼠,取小鼠肺原代培养得到具有肺转移能力的胰腺癌细胞亚群;提取基因组DNA进行PCR分析,比... 详细信息

目的利用混合多克隆细胞亚群筛选和验证分析具有肺转移能力细胞亚群和基因。方法混合多克隆细胞亚群,分别尾静脉接种于喂饮强力霉素和对照两组裸小鼠,取小鼠肺原代培养得到具有肺转移能力的胰腺癌细胞亚群;提取基因组DNA进行PCR分析,比较两组小鼠特异基因检测率。结果体内筛选肺癌转移显示不加强力霉素组裸鼠出现肺转移症状早和严重。肺原代培养成功得到具有转移能力的胰腺癌细胞亚群,基因组DNA PCR分析表明75.0%没有喂饮强力霉素小鼠肺转移检测到SQSTM1基因,而在喂饮强力霉素小鼠只有37.5%肺转移检测到SQSTM1基因。PCR分析其他候选基因,包括sema4b,ube2k和gna13,均未检测到。证实强力霉素介导的SQSTM1基因表达导致胰腺癌细胞不同肺转移能力。结论多克隆混合同步筛选可验证得到胰腺癌肺转移细胞亚群和与其关联的基因。

关键词：多克隆同步筛选胰腺癌肿瘤转移 SQSTMI

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细胞融合通过PI3K-AKT通路降低黑色素瘤细胞增殖能力

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基础医学与临床 2012年第6期32卷 682-686页

作者：米蕊芳潘春晓卞晓翠田文嘉宋利强中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系北京100005

目的研究细胞融合在黑色素瘤细胞增殖中的作用及其分子机制。方法用聚乙二醇细胞融合方法融合黑色素瘤细胞,通过流式分选获得稳定的融合细胞。体外培养及细胞计数检测融合细胞的增殖速度。Affymatrix基因芯片分析差异表达的基因,IPA软... 详细信息

目的研究细胞融合在黑色素瘤细胞增殖中的作用及其分子机制。方法用聚乙二醇细胞融合方法融合黑色素瘤细胞,通过流式分选获得稳定的融合细胞。体外培养及细胞计数检测融合细胞的增殖速度。Affymatrix基因芯片分析差异表达的基因,IPA软件进行基因功能分析。Western blot检测细胞蛋白。结果 PEG化学融合法成功获得稳定的黑色素瘤融合细胞,其体外增殖速度明显减慢(P<0.01)。黑色素瘤融合细胞与增殖相关的PI3K-AKT通路明显下调(P<0.01)。融合细胞phospho-S6蛋白表达明显降低。结论细胞融合通过PI3K-AKT通路降低黑色素瘤细胞增殖能力。

关键词：细胞融合黑色素瘤增殖

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囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用

囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用

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中国病理生理学会第十三届肿瘤、第十四届免疫专业委员会学术会议

作者：赵文晶杨振丽顾蓓冯海凉张敏刘艳艳李占稳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系

目的:探讨囊泡膜蛋白相关蛋白(VAP33)过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移相关生物学特性的影响。方法:反转录获得VAP33cDNA,构建与GFP融合基因慢病毒表达载体。用病毒感染DG6细胞,荧光显微镜挑选,WB鉴定获得VAP33稳定过表达... 详细信息

目的:探讨囊泡膜蛋白相关蛋白(VAP33)过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移相关生物学特性的影响。方法:反转录获得VAP33cDNA,构建与GFP融合基因慢病毒表达载体。用病毒感染DG6细胞,荧光显微镜挑选,WB鉴定获得VAP33稳定过表达细胞株(DG6-VAP33)。MTT法检测细胞体外增殖情况的变化;Transwell和集落形成测定体外侵袭、成瘤能力的变化。体内移植观察成瘤及转移情况。以DG6细胞作对照。结果:重组慢病毒表达载体pWPXL-VAP33包装滴度达6×1 07IU/ml。与DG6相比,DG6-VAP33细胞体外增殖减慢,集落数分别为(52±8个/孔VS(36±5)个/孔,P<0.05)穿膜细胞数减少[(36±1 7 VS 14±11,P<0.01]。体内DG6-VAP33组成瘤率5/10明显低于DG6组(10/10,P<0.05)肿瘤的肺转移率也明显降低(0 VS 80%)。结论:VAP33过表达降低肿瘤细胞的增殖、成瘤及侵袭转移能力。

关键词：树突状肉瘤细胞株囊泡膜蛋白相关蛋白增殖侵袭转移

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筋脉通对糖尿病大鼠背根神经节氧化应激的影响

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协和医学杂志 2012年第4期3卷 441-447页

作者：张倩梁晓春孙青王普艳黄文智李伯武张彦东高云周中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院中医科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系北京100730

目的探讨中药复方筋脉通对糖尿病大鼠背根神经节尼氏染色及NADPH氧化酶、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法 70只雄性Sprague Dawley大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型后,随机分为模... 详细信息

目的探讨中药复方筋脉通对糖尿病大鼠背根神经节尼氏染色及NADPH氧化酶、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法 70只雄性Sprague Dawley大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型后,随机分为模型组、筋脉通大、中、小剂量组和维生素C对照组,每组14只,同时设正常对照组(n=10);筋脉通大、中、小剂量组分别按成人剂量20倍、10倍、5倍、维生素C组按成人剂量10倍灌胃给药,模型组和正常对照组予等量蒸馏水灌胃;16周后对各组背根神经节切片行尼氏染色,免疫组化法检测NADPH氧化酶p22phox亚基和iNOS的表达。结果模型组神经元胞体中尼氏体缺失,筋脉通大、中剂量组尼氏体改变明显轻于模型组;筋脉通各剂量组NADPH氧化酶p22phox亚基、iNOS表达均明显低于模型组(P<0.05)。结论糖尿病大鼠周围感觉神经节存在氧化应激反应,筋脉通可减轻氧化应激损伤,保护神经元。

关键词：活性氧 NADPH氧化酶糖尿病糖尿病周围神经病氧化应激一氧化氮合酶

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囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用

囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用

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第十三届全国诊断病理暨头颈部及内分泌系统疾病学术研讨会

作者：赵文晶杨振丽顾蓓冯海凉张敏刘艳艳李占稳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

本文选用内源性低表达囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33且肺转移率低的DCS亚克隆细胞株DG6细胞作为研究对象。利用慢病毒包装系统，成功制备了带有VAP33-GFP融合基因的重组慢病毒，将其感染目的细胞，获得了VAP33稳定过表达的单克隆细胞株DG6-VA... 详细信息

本文选用内源性低表达囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33且肺转移率低的DCS亚克隆细胞株DG6细胞作为研究对象。利用慢病毒包装系统，成功制备了带有VAP33-GFP融合基因的重组慢病毒，将其感染目的细胞，获得了VAP33稳定过表达的单克隆细胞株DG6-VAP33。探讨了VAP33在恶性肿瘤侵袭和转移中的作用。结果表明：VAP33在DG6细胞的恶性行为发生的过程中可能发挥着重要的负性调节作用。

关键词：树突状细胞肉瘤肿瘤抑制基因囊泡膜蛋白亚克隆细胞株

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