检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2009年第2期29卷 139-143页

作者：朱镜羲阳洪波于晓霞郝维鲍光宏曹济民龚燕华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系北京100005

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜... 详细信息

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜片钳技术检测SH-SY5Y细胞全细胞电位。结果h-DTD具有体外脱酰酶活性,并在脑组织中高表达。在h-DTD蛋白存在的情况下,游离的D-氨基酸及L谷-氨酸能激活谷氨酸敏感的非选择性阳离子通道,导致细胞膜通透性增加。结论在神经系统,h-DTD蛋白可能通过维持游离D-氨基酸的浓度来影响非选择性阳离子通道的功能。

关键词：人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶表达谱非选择性阳离子通道

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细胞外信号激酶蛋白5在卵泡刺激素介导的卵泡颗粒细胞甾体激素生成中的作用

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 615-619,I0010页

作者：高小博姚楠马旭陆彩玲杨伯清彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家人口计生委科学技术研究所遗传室北京100081 中国医学科学院北京协和医学院医学信息研究所基层卫生与妇幼保健研究室北京100020

目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用。方法采用Western blot检测在卵泡刺激素(FSH)刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况,荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位,腺病毒技术观... 详细信息

目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用。方法采用Western blot检测在卵泡刺激素(FSH)刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况,荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位,腺病毒技术观察活化型ERK5和显性负性ERK5对颗粒细胞甾体激素生成的影响。结果 Western blot检测结果表明,FSH处理颗粒细胞后ERK5的表达随处理时间延长而下调,而ERK5活性形式的表达随处理时间延长而逐渐上升。荧光共聚焦技术分析结果显示,FSH的处理并没有明显影响ERK5在颗粒细胞中的定位。腺病毒技术观察结果发现,在细胞中联合感染活化型MEK5重组腺病毒和野生型ERK5重组腺病毒能促进FSH引起的细胞内StAR的表达升高和孕酮分泌,而显性负性ERK5重组腺病毒感染细胞则出现相反的效应。结论 ERK5可能促进了FSH介导的颗粒细胞甾体激素生成。

关键词：细胞外信号激酶蛋白5 卵泡刺激素颗粒细胞甾体激素孕酮

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miR-16促进Neuro2a细胞的凋亡

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基础医学与临床 2011年第7期31卷 762-766页

作者：刘畅刘伟王明阴彬袁建刚中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医学院基础学院解剖与组织胚胎学系北京100005

目的检测过表达miR-16对小鼠Neuro2a细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-16在肿瘤发病过程中的可能机制。方法构建能够在细胞中过表达miR-16的真核表达载体pcDNA3.1-miR-16,利用Real-time PCR验证了表达载体的过表达效应。应用pcDNA3.1-miR... 详细信息

目的检测过表达miR-16对小鼠Neuro2a细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-16在肿瘤发病过程中的可能机制。方法构建能够在细胞中过表达miR-16的真核表达载体pcDNA3.1-miR-16,利用Real-time PCR验证了表达载体的过表达效应。应用pcDNA3.1-miR-16载体转染Neuro2a细胞,利用流式细胞术和TUNEL法检测Neuro2a细胞周期及凋亡改变情况。结果转染过表达pcDNA3.1-miR-16载体后,成熟的miR-16表达与对照组相比明显升高(P<0.05)。在Neuro2a细胞中过表达miR-16后,用流式细胞术检测发现,Neuro2a细胞周期未见明显改变,与对照组相比,凋亡细胞数量有显著增加;进一步通过TUNEL法验证,发现miR-16的过表达能够促进Neuro2a的细胞凋亡。结论过表达miR-16能够显著促进Neuro2a细胞凋亡而对细胞周期并无影响,提示miR-16可能对肿瘤治疗起作用。

关键词： miR-16 Neuro2a细胞细胞周期凋亡肿瘤

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抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体死亡受体5嵌合抗体的构建及其真核表达

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中国医学科学院学报 2008年第6期30卷 690-695页

作者：陈凤郭雅彬刘士廉郑德先刘彦信中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所北京肿瘤分子生物学实验室北京100142

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳... 详细信息

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株。采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性。结果获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%。结论抗DR5嵌合抗体anti-DR5mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础。

关键词：抗死亡受体5嵌合抗体中国仓鼠卵巢细胞人IgG轻链人IgG重链

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HSD1蛋白在精子发生过程中的空间特异性表达

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基础医学与临床 2013年第3期33卷 325-329页

作者：宋伟陈迎春缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的研究HSD1蛋白在各级生精细胞中的空间特异性表达及其在细胞中的核质穿梭特性。方法分离小鼠生精细胞,用免疫荧光法观察HSD1蛋白的内源定位。构建pEGFP-C1-HSD1融合表达质粒并转染CHO细胞,用激光共聚焦和电镜观察HSD1融合蛋白的定位... 详细信息

目的研究HSD1蛋白在各级生精细胞中的空间特异性表达及其在细胞中的核质穿梭特性。方法分离小鼠生精细胞,用免疫荧光法观察HSD1蛋白的内源定位。构建pEGFP-C1-HSD1融合表达质粒并转染CHO细胞,用激光共聚焦和电镜观察HSD1融合蛋白的定位及其核质分布情况。结果 HSD1蛋白在初级精母细胞和圆形精子细胞的胞质中表达;在成熟精子细胞中主要表达于顶体和尾部。HSD1蛋白在CHO细胞中存在3种分布形式:细胞核型、细胞质型和核质分布型。进一步研究发现该蛋白在细胞中呈动态分布,存在细胞核-质间的穿梭特性。结论HSD1蛋白在生精细胞中呈空间特异性表达并且具有核质穿梭能力。

关键词： HSD1 精子发生免疫荧光核质穿梭

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睾丸高表达蛋白质HSD13调节CHO细胞系周期进程

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基础医学与临床 2013年第2期33卷 179-183页

作者：宋伟胡廷徽缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的研究HSD13蛋白的组织表达定位及其对细胞周期的影响。方法利用王琳芳教授实验室构建的人睾丸特异ESTs文库,通过电子克隆方法获得一新基因命名为HSD13。通过Northern和Western印迹方法检测HSD13蛋白在不同组织中的表达,并用免疫组化... 详细信息

目的研究HSD13蛋白的组织表达定位及其对细胞周期的影响。方法利用王琳芳教授实验室构建的人睾丸特异ESTs文库,通过电子克隆方法获得一新基因命名为HSD13。通过Northern和Western印迹方法检测HSD13蛋白在不同组织中的表达,并用免疫组化观察其在小鼠睾丸组织中的表达定位。通过构建HSD13过表达的CHO稳定细胞系,用双胸苷阻断法并结合流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果电子克隆获得HSD13基因。HSD13蛋白在睾丸组织中高表达,主要定位于生精细胞中的精原细胞和初级精母细胞。成功构建HSD13过表达和对照的CHO稳定细胞系,过表达HSD13蛋白可以显著加快细胞G2/M期进程。结论 HSD13蛋白于睾丸中精子发生早期表达,其过表达能够加速细胞周期进程。

关键词： HSD13 精子发生细胞周期流式细胞术

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受体型蛋白酪氨酸磷酸酶R基因多态性与重性抑郁障碍的关联分析

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 663-669页

作者：石翠娟张克让许琪中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 山西医科大学第一医院精神卫生科太原030001

目的探讨受体型蛋白酪氨酸磷酸酶R（PTPRR）基因多态性与重性抑郁障碍（MDD）及其内表型的关联性。方法收集中国北方汉族MDD患者517例（MDD组）和健康志愿者455人（对照组）,采用时间飞行质谱技术检测研究对象PTPRR基因的11个单核苷酸... 详细信息

目的探讨受体型蛋白酪氨酸磷酸酶R（PTPRR）基因多态性与重性抑郁障碍（MDD）及其内表型的关联性。方法收集中国北方汉族MDD患者517例（MDD组）和健康志愿者455人（对照组）,采用时间飞行质谱技术检测研究对象PTPRR基因的11个单核苷酸多态性（SNPs）位点的多态性,采用UNPHASED软件进行等位基因、基因型、单倍型及数量性状分析。结果单位点分析显示,等位基因频率和基因型分布在MDD组和对照组间差异无统计学意义（校正后P〉0.05）;单倍型分析显示,三位点单倍型rs1398599（C）-rs2175711（A）-rs4489789（T）（P=0.0023,OR=1.334,95%CI=1.104~1.612）和四位点单倍型rs11178391（C）-rs1398599（C）-rs2175711（A）-rs4489789（T）（P=0.0063,OR=1.281,95%CI=1.059~1.549）均显著增加MDD发病风险;数量性状分析显示,SNP rs2203231的等位基因和基因型分别与韦氏记忆量表（WMS-R）的心智原始分（P=0.0038,P=0.0024）和心智量表分（P=0.0057,P=0.0038）以及图片原始分（P=0.0027,P=0.0015）和图片量表分（P=0.0035,P=0.002）显著相关。结论 PTPRR基因rs2203231多态性可能与MDD患者的长时记忆和短时记忆功能障碍相关联。

关键词：重性抑郁障碍受体型蛋白酪氨酸磷酸酶R基因单核苷酸多态性关联分析内表型

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γδT细胞在病毒感染中的免疫学作用

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国际免疫学杂志 2011年第2期34卷 85-90页

作者：卢燕来朱于莉何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系医学分子生物学国家重点实验室100005

γδT细胞属于固有免疫细胞，主要位于皮肤、小肠等黏膜及皮下组织和外周血中。γδT细胞的功能包括抗感染、抗肿瘤、免疫监视、免疫调节和维持免疫耐受等作用。在病毒入侵机体的过程中，γδT细胞表型和功能发生变化，搭建了固有免疫... 详细信息

γδT细胞属于固有免疫细胞，主要位于皮肤、小肠等黏膜及皮下组织和外周血中。γδT细胞的功能包括抗感染、抗肿瘤、免疫监视、免疫调节和维持免疫耐受等作用。在病毒入侵机体的过程中，γδT细胞表型和功能发生变化，搭建了固有免疫细胞及免疫细胞的桥梁，除了起到直接的细胞毒杀伤作用，还作为免疫调节细胞和抗原递呈细胞发挥了抗感染的免疫功能。

关键词： γδT细胞病毒细胞毒免疫调节抗原递呈

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N-糖基化位点突变的人IFN-λ1在毕赤酵母中的表达、纯化及表征(英文)

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生物工程学报 2018年第4期34卷 613-624页

作者：惠希武陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司河北石家庄050035

IFN-λ1是Ⅲ型干扰素家族的一个成员,具有与Ⅰ型干扰素相似的功能。此前,我们已经从毕赤酵母表达获得了可溶性重组人干扰素-λ1。然而,毕赤酵母表达中的高糖基化带来了免疫原性,影响了蛋白质的生产纯化效率。为了克服这个缺点,文中构建... 详细信息

IFN-λ1是Ⅲ型干扰素家族的一个成员,具有与Ⅰ型干扰素相似的功能。此前,我们已经从毕赤酵母表达获得了可溶性重组人干扰素-λ1。然而,毕赤酵母表达中的高糖基化带来了免疫原性,影响了蛋白质的生产纯化效率。为了克服这个缺点,文中构建了一种干扰素突变体(rhIFN-λ1-Nm),定点突变潜在糖基化位点。AOX1启动子与α因子信号序列存在的情况下,用甲醇诱导成功地实现了rhIFN-λ1-Nm在毕赤酵母GS115胞外分泌表达。对rhIFN-λ1-Nm进行纯化,获得了纯度>98%的产品,并对糖化水平、分子量、二级结构、N末端序列等理化性质和生物活性进行了研究。研究结果表明,rhIFN-λ1-Nm糖基化水平明显降低,蛋白质生产纯化收率显著提高,而对结构和生物活性无影响;糖基化位点突变rhIFN-λ1可以被开发为IFN-λ1的替代品,有望发展成为未来的生物免疫制剂。

关键词：人干扰素-λ1 N-糖基化突变毕赤酵母

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带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达

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中华医学杂志 1998年第1期78卷 66-67页

作者：李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权β４１／４２是印度次大陆、东南亚及我国南方常见的一种血红蛋白病，纯合子呈严重的β－地中海贫血。本实验旨在建立带红系，增强子... 详细信息

带红系增强子的人β珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权β４１／４２是印度次大陆、东南亚及我国南方常见的一种血红蛋白病，纯合子呈严重的β－地中海贫血。本实验旨在建立带红系，增强子５′ＨＳ２的人β４１／４２珠蛋白基...

关键词：地中海贫血 β珠蛋白期转基因小鼠病理学

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