检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2005年第1期21卷 17-21页

作者：程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的 :研究Bcl 2家族成员在 5 氟尿嘧啶 (5 FU)和CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡中的作用 ,阐述T淋巴细胞凋亡的分子机制 ,为相关肿瘤的治疗提供依据。方法 :用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 5 FU(2 5 μg/ml)单独或联合刺激JK... 详细信息

目的 :研究Bcl 2家族成员在 5 氟尿嘧啶 (5 FU)和CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡中的作用 ,阐述T淋巴细胞凋亡的分子机制 ,为相关肿瘤的治疗提供依据。方法 :用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 5 FU(2 5 μg/ml)单独或联合刺激JK、TJK和T3JK细胞 ,诱导细胞凋亡 ,用MTS比色法检测细胞死亡率 ,用Westernblot检测Bid的表达和活化。用脂质体的方法转染细胞。结果 :CD3ε特异的单克隆抗体和 5 FU分别单独处理TJK细胞 ,都能诱导其凋亡并伴随Bid的活化 ,二者联合使用能显著增加TJK细胞凋亡和Bid的活化。Bcl 2过表达可明显降低TJK细胞对 5 FU的敏感性。结论 :Bcl 2家族成员参与CD3ε和 5 FU诱导的T淋巴细胞凋亡的调节 ,Bcl 2过表达能显著抑制T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。

关键词： CD3ε 5-FU Bid Bcl-2 细胞凋亡

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用RACE结合cDNA文库筛选的方法获取新的锌指蛋白基因

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遗传 2002年第3期24卷 329-331页

作者：杜占文刘立仁张俊武中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

大多数有重要功能的蛋白质都含相应的由保守氨基酸顺序组成的功能结构域。本文首先根据蛋白质功能结构域保守氨基酸序列设计简并引物 ,用PCR方法扩增出基因EST序列 ,再利用改进的快速扩增cDNA末端(RACE)方法从cDNA文库中扩增出基因非同... 详细信息

大多数有重要功能的蛋白质都含相应的由保守氨基酸顺序组成的功能结构域。本文首先根据蛋白质功能结构域保守氨基酸序列设计简并引物 ,用PCR方法扩增出基因EST序列 ,再利用改进的快速扩增cDNA末端(RACE)方法从cDNA文库中扩增出基因非同源部位 ,然后以非同源序列为探针 ,筛选cDNA文库。利用此方法成功地从人骨髓cDNA文库中克隆到几个编码锌指蛋白并代表原有EST的新的全长cDNA。这一策略也应适用于筛选编码具有其他序列保守性功能结构域蛋白的基因。

关键词： RACE cDNA文库筛选锌指蛋白基因非同源DNA序列新基因

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改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列

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生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 600-602页

作者：李竹红刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对传统的反向ＰＣＲ技术作了一些改进：用巢式ＰＣＲ扩增含量极少的靶序列；ＰＣＲ反应体系中加入５％的甲酰胺以减少非特异性扩增．结果表明，改进的反向ＰＣＲ体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．

关键词：反向PCR 旁侧序列转移基因

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DIFF33H参与TRAIL诱导的人Jurkat T淋巴细胞白血病细胞凋亡调控

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中国免疫学杂志 2004年第12期20卷 809-812页

作者：邹耀中刘彦信(指导) 郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的 :研究DIFF33H在人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡中的表达规律及其生物学功能。方法 :采用PCR扩增DIFF33HcDNA ,Northernblot分析DIFF33H的mRNA表达 ,MTT法测定细胞凋亡。结果 :在重组可溶性TRAIL诱导的人T淋巴细胞白血病细胞Jurka... 详细信息

目的 :研究DIFF33H在人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡中的表达规律及其生物学功能。方法 :采用PCR扩增DIFF33HcDNA ,Northernblot分析DIFF33H的mRNA表达 ,MTT法测定细胞凋亡。结果 :在重组可溶性TRAIL诱导的人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡过程中 ,DIFF33HmRNA的表达水平随着Jurkat细胞的凋亡而下降 ,并对重组可溶性TRAIL的作用具有浓度和时间的依赖性。在抗肿瘤药物 5 FU诱导肿瘤细胞凋亡过程中 ,DIFF33H的mRNA表达水平也显著下降。结论 :DIFF33H参与人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡的调控。

关键词： DIFF33H TRAIL 5-FU T淋巴细胞白血病细胞 Jurkat细胞凋亡

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人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗

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解剖学报 2004年第3期35卷 282-286页

作者：孟雁苏牧中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　探讨人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗效果。　方法　将构建的 7.1kb含有鸡 β肌动蛋白启动子的人正常ATP7BcDNA ,经显微注射法导入人Wilson病动物模型LEC(long EvansCinnamon)大鼠受精卵 ,建立转基因功能... 详细信息

目的　探讨人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗效果。　方法　将构建的 7.1kb含有鸡 β肌动蛋白启动子的人正常ATP7BcDNA ,经显微注射法导入人Wilson病动物模型LEC(long EvansCinnamon)大鼠受精卵 ,建立转基因功能恢复大鼠模型。以Westernbolt检测人ATP7B在转基因大鼠肝内的表达 ,用同窝无转基因大鼠及正常野生型LEA大鼠作对照 ,对 6～ 16周龄的转基因大鼠的血清AST、ALT和总胆红素水平进行连续测定 ,同时取 13周龄转基因大鼠的肝组织进行病理学和组织化学分析。　结果　人ATP7B基因在转基因大鼠的肝组织中获得正确和完整的表达 :12周龄前后 ,与同窝无转基因大鼠相比 ,转基因大鼠的血清AST、ALT和总胆红素水平明显降低 ,肝组织的炎性病变显著减轻 ,肝细胞内铜的蓄积减少 ;至 16周龄 ,转基因大鼠的临床表型未见异常 ,存活率达 10 0 %。说明人ATP7B的导入 ,成功地抑制了Wilson病动物模型LEC大鼠的暴发性肝炎的发生。结论　Wilson病肝炎的发生与ATP7B基因功能缺陷引起的铜蓄积有直接关系。基因转移有可能是一种有效的治疗Wilson病的方法。

关键词：人ATP7B基因基因治疗暴发性肝炎 LEC大鼠

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甲状腺激素受体在调节靶基因转录中的激活和抑制作用

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生命的化学 2009年第3期29卷 370-373页

作者：裘佳陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家医学分子生物学重点实验室北京100005

甲状腺激素((TH)在个体发育、维持内环境稳定、细胞增殖和分化方面均有广泛的作用。TH结合甲状腺激素受体(TR),包括TRα和TRβ。TR属于核激素受体超家族,调节正向和负向基因转录。在缺少配体时,TR结合特异DNA序列,通过和共抑制子相互作... 详细信息

甲状腺激素((TH)在个体发育、维持内环境稳定、细胞增殖和分化方面均有广泛的作用。TH结合甲状腺激素受体(TR),包括TRα和TRβ。TR属于核激素受体超家族,调节正向和负向基因转录。在缺少配体时,TR结合特异DNA序列,通过和共抑制子相互作用主动抑制转录。配体的结合导致TR结构改变,释放共抑制子并招募共激活子而激活转录。

关键词：甲状腺素甲状腺素受体转录共激活子共抑制子

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免疫细胞死亡受体的信号传导途径及其调节

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中国免疫学杂志 2003年第8期19卷 519-523页

作者：郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

死亡受体(Death Receptor)是肿瘤坏死因子受体(TNFR,Tumor Necrosis Factor Receptor)基因超家族的成员,具有富含Cys的胞外结构域[1]和胞内死亡结构域(DD,Death Domain).死亡结构域具有诱导细胞凋亡的功能,有时也可抑制细胞凋亡或介导... 详细信息

死亡受体(Death Receptor)是肿瘤坏死因子受体(TNFR,Tumor Necrosis Factor Receptor)基因超家族的成员,具有富含Cys的胞外结构域[1]和胞内死亡结构域(DD,Death Domain).死亡结构域具有诱导细胞凋亡的功能,有时也可抑制细胞凋亡或介导其它生物学功能.死亡受体包括:CD95(也称Fas或Apol)、TNFR1(也称p55或CD120a)[1,2]、DR3(Death Receptor 3)(Apo3,WSL-1,TRAMP,LARD)[3]、DR4[4]和DR5(也称Apo2-R,TRAIL-R2,TRICK 2,或KILLER)[5]、p75神经生长因子受体(NGFR)[6]和禽源的CAR1[7]等.它们的配体依次分别是:CD95、TNFR1、DR3,DR4和DR5的配体分别是CD95L、TNF、淋巴毒素α、Apo3L(也称TWEAK)、Apo2L/TRAIL(TNF-related Apoptosis Inducing Ligand).CAR1的配体至今还没有发现.……

关键词：免疫细胞死亡受体信号传导调节

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自然反义转录物Lmo4as对神经系统重要编码基因Lmo4的调节作用

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基础医学与临床 2014年第6期34卷 819-823页

作者：张靖吴朝朱丽媛阴彬侯琳彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院神经科学中心北京100005

目的探索小鼠神经系统重要编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对该编码基因的表达调控功能。方法 1)使用c DNA末端快速扩增(RACE)与RT-PCR技术,验证Lmo4as是否具有多聚腺苷酸(poly A)尾,克隆Lmo4as的全长序列;2)使用实时定量... 详细信息

目的探索小鼠神经系统重要编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对该编码基因的表达调控功能。方法 1)使用c DNA末端快速扩增(RACE)与RT-PCR技术,验证Lmo4as是否具有多聚腺苷酸(poly A)尾,克隆Lmo4as的全长序列;2)使用实时定量PCR和原位杂交技术确定Lmo4as及相应编码基因的时空表达谱;3)使用荧光素酶报告基因实验在体外验证Lmo4as对Lmo4是否具有调控作用。结果 1)Lmo4as是一个具有多聚腺苷酸(poly A)尾的非编码RNA转录本,获得其RNA全长信息;2)Lmo4as与相应编码基因转录Lmo4的丰度在时间上具有协同性,而在空间表达上具有明显不同的分布;3)Lmo4as对Lmo4在转录后水平具有负性调节作用,另外miR-124也能够抑制Lmo4的表达。结论编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对其转录后水平的负性调节与microRNA的调节共同发挥作用。

关键词：小鼠大脑发育 Lmo4 自然反义转录物原位杂交转录后调控

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一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆

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科学通报 1999年第12期44卷 1307-1310页

作者：周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读... 详细信息

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .

关键词：差异显示硫氧化还原蛋白胎脑基因克隆

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利用PCR构建多拷贝HIV-1 TAR序列的串联体

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基础医学与临床 2001年第1期21卷 85-87页

作者：阴彬白龙川袁建刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

建立“自身引物—模板”PCR方法 ,并应用此方法成功地扩增了多拷贝HIV 1TAR片段的同向串联体。此方法简便 ,省力 ,可用于多拷贝基因探针、多拷贝反义基因片段、多拷贝抗原表位的扩增和克隆。

关键词：自身引物-模板串联板聚合梅链反应 HIV-1TAR 多拷贝基因探针

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