检索结果-内蒙古大学图书馆

生理科学进展 2011年第2期42卷 95-99页

作者：崔健陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

维生素D受体(vitam in D receptor,VDR)是一种核转录因子,通过与配体特异结合,调控多种基因的表达,从而调节多种生命活动的进行。本文总结了近年来VDR的研究进展,主要包括VDR的作用机制、VDR行使功能所需共激活子及共抑制子、VDR在生长... 详细信息

维生素D受体(vitam in D receptor,VDR)是一种核转录因子,通过与配体特异结合,调控多种基因的表达,从而调节多种生命活动的进行。本文总结了近年来VDR的研究进展,主要包括VDR的作用机制、VDR行使功能所需共激活子及共抑制子、VDR在生长分化、免疫调节和抑制肿瘤等方面的作用及VDR配体类似物在药物开发研究领域的最新进展。

关键词：维生素D受体维生素D 共激活子共抑制子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

β-catenin在内侧颞叶癫痫发病机制中的作用

引用

中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 659-662,I0015-I0016页

作者：幸小亮沙龙泽张丹沈岩吴立文许琪中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经内科北京100730

目的探讨β-catenin与内侧颞叶癫痫发病机制之间的关系。方法以海人酸诱导建立内侧颞叶癫痫小鼠模型,采用Western blot检测正常鼠和模型鼠海马中β-catenin表达是否存在差异,免疫组织化学和免疫荧光技术检测非海马硬化内侧颞叶癫痫与海... 详细信息

目的探讨β-catenin与内侧颞叶癫痫发病机制之间的关系。方法以海人酸诱导建立内侧颞叶癫痫小鼠模型,采用Western blot检测正常鼠和模型鼠海马中β-catenin表达是否存在差异,免疫组织化学和免疫荧光技术检测非海马硬化内侧颞叶癫痫与海马硬化颞叶癫痫患者海马中β-catenin表达量是否存在差异。结果模型鼠海马硬化与内侧颞叶癫痫海马硬化相似,模型建立成功。Western blot检测结果显示,正常鼠与模型鼠海马的β-catenin表达无差异。免疫组织化学和免疫荧光检测结果发现,海马硬化患者的星型胶质细胞明显增多,β-catenin的表达量在非海马硬化颞叶癫痫和海马硬化颞叶癫痫患者间不存在差异。结论β-catenin可能未参与内侧颞叶癫痫海马硬化的形成过程。

关键词：内侧颞叶癫痫海马硬化 β-catenin 海人酸 C57BL/6小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

心肌锚定重复序列蛋白基因心脏特异敲除小鼠模型构建与鉴定

引用

基础医学与临床 2011年第11期31卷 1217-1222页

作者：许家林李艳凤朱大海中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建心肌锚定重复序列蛋白(CARP)基因心脏特异敲除小鼠模型,为研究CARP基因与心脏疾病的关系奠定基础。方法构建CARP基因条件打靶载体pL253-CARP-LoxP电转入小鼠胚胎干细胞(ES)细胞,G418和GANC药物筛选阳性细胞克隆,Southern blot确... 详细信息

目的构建心肌锚定重复序列蛋白(CARP)基因心脏特异敲除小鼠模型,为研究CARP基因与心脏疾病的关系奠定基础。方法构建CARP基因条件打靶载体pL253-CARP-LoxP电转入小鼠胚胎干细胞(ES)细胞,G418和GANC药物筛选阳性细胞克隆,Southern blot确定CARP基因条件打靶载体转染成功。胚胎注射ES细胞入小鼠囊胚,获得嵌合体小鼠与心脏特异启动子Cre小鼠(α-MHC-Cre)杂交。结果得到6只嵌合体小鼠,与α-MHC-Cre小鼠杂交获得CARP基因心脏特异敲除小鼠(CARP-KO),半定量RT-PCR和Western blot确定CARP基因在CARP-KO小鼠心脏缺失。该小鼠早期胚胎发育和个体生长、心脏发育正常,但心肌肥厚标志基因β-MHC和ANF显著升高(分别为2.25±0.04和1.45±0.03)(P<0.05)。结论成功构建CARP基因心脏特异敲除小鼠,CARP基因缺失对小鼠胚胎发育、个体生长和心脏发育没有显著影响。

关键词：心肌锚定重复序列蛋白基因打靶心肌肥厚

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠脑皮质神经干细胞体外培养及miRNAs影响其分化能力

引用

基础医学与临床 2011年第6期31卷 630-635页

作者：赵祥宇舒鹏程张靖阴彬彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的系统建立小鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)体外培养的技术平台,并探索一组microRNA对NSCs分化能力的影响。方法胎鼠(E14)脑皮质分离NSCs进行体外培养;免疫荧光法检测NSCs向神经元和星型胶质细胞的自然分化;Real-time定量PCR筛选一组分化... 详细信息

目的系统建立小鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)体外培养的技术平台,并探索一组microRNA对NSCs分化能力的影响。方法胎鼠(E14)脑皮质分离NSCs进行体外培养;免疫荧光法检测NSCs向神经元和星型胶质细胞的自然分化;Real-time定量PCR筛选一组分化前后表达水平有显著性差异的microRNA;应用新一代脂质体高效转染NSCs,将该组microRNA或其抑制物导入NSCs;Western blot检测导入的RNA序列对NSCs分化能力的影响。结果基于小鼠NSCs体外培养模型,筛选出一组NSCs分化前后表达水平存在显著性差异的microRNA(miR-124,137,128)。Western blot结果显示miR-124的反义链能够明显下调β-tubulinⅢ的表达(P<0.01),过表达miR-137和miR-128后β-tubulinⅢ的表达量有所升高。结论脂质体转染技术能够将miRNAs高效导入NSCs中;microRNA-124,137,128能够影响NSCs的分化。

关键词：神经干细胞神经元 miRNA 脂质体转染分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种用作阴性对照的siRNA可诱导人K562细胞向红系分化

引用

中国生物化学与分子生物学报 2011年第4期27卷 330-336页

作者：范翠青朱宁沈岩陈梅红中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

我们发现,一种在RNA干扰实验中用作阴性对照的商业化siRNA具有明显的诱导人慢性髓性白血病K562细胞系向红系方向分化的作用.它表现为K562细胞瞬时转染该siRNA后,红系分化的特异表面标志CD235及ε-、γ-和β-珠蛋白的表达升高,GATA-2的... 详细信息

我们发现,一种在RNA干扰实验中用作阴性对照的商业化siRNA具有明显的诱导人慢性髓性白血病K562细胞系向红系方向分化的作用.它表现为K562细胞瞬时转染该siRNA后,红系分化的特异表面标志CD235及ε-、γ-和β-珠蛋白的表达升高,GATA-2的表达降低,细胞增殖速度减慢,软琼脂克隆形成率降低,并且此过程不伴随细胞凋亡.而生物信息学分析显示,该siRNA序列与目前所有已知人类基因均无明显同源性.研究结果提示,该siRNA不适于用作红系分化实验中的阴性对照.siRNA的作用远比人们目前所知的要复杂得多,siRNA的脱靶效应应当引起研究者的足够重视,在RNA干扰实验中阴性对照siRNA的选择会极大地影响对实验结果的判读.

关键词： siRNA K562细胞红系分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PGC1α协同PPARγ调节CIDEC基因在小鼠脂肪细胞系中表达

引用

基础医学与临床 2011年第5期31卷 480-484页

作者：牛栋王瑞方福德常永生中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的鉴定CIDEC的表达能够被PPARγ和PGC1α共激活,检测其在脂肪代谢中的重要调控作用。方法构建5′删切和顺式原件突变的启动子,运用HepG2细胞中双荧光报告基因实验检测PPARγ和PGC1α对CIDEC的共激活作用并确定顺式作用元件。运用PPAR... 详细信息

目的鉴定CIDEC的表达能够被PPARγ和PGC1α共激活,检测其在脂肪代谢中的重要调控作用。方法构建5′删切和顺式原件突变的启动子,运用HepG2细胞中双荧光报告基因实验检测PPARγ和PGC1α对CIDEC的共激活作用并确定顺式作用元件。运用PPARγ特异激动剂pioglitazone刺激3T3-L1细胞检测CIDEC的mRNA水平。在3T3-L1细胞系中过表达CIDEC,检测脂肪合成及能量代谢相关基因的mRNA水平。通过腺病毒感染在小鼠肝原代细胞中过表达CIDEC,检测肝脏细胞中脂肪变化。结果 PPARγ和PGC1α能够显著激活CIDEC的启动子。过表达CIDEC后,脂肪细胞中脂类合成相关基因FAS上调(3.47±0.17)倍(P<0.05),ACC上调(3.95±0.57)倍(P<0.05),在肝原代细胞中CIDEC促进脂滴的生成。结论 CIDEC过表达能够被PPARγ促进并且被PGC1α共激活,在体内起到促进脂肪积累的作用。

关键词： PPAR γPGC1α CIDEC 转录调控

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

埃博拉病毒包膜蛋白GP基因DNA疫苗诱导小鼠产生高滴度中和抗体

引用

基础医学与临床 2011年第6期31卷 667-671页

作者：张桂根郎建社王洪亮刘康泰蒋澄宇中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨埃扎伊尔-埃博拉病毒(Zaire Ebolavirus)包膜蛋白(GP)DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的特性及研制埃博拉病毒DNA疫苗的可行性。方法构建埃博拉病毒包膜蛋白GP真核表达质粒Peak13CD5LGP,采用100μg剂量的质粒免疫小鼠,以纯化的埃... 详细信息

目的探讨埃扎伊尔-埃博拉病毒(Zaire Ebolavirus)包膜蛋白(GP)DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的特性及研制埃博拉病毒DNA疫苗的可行性。方法构建埃博拉病毒包膜蛋白GP真核表达质粒Peak13CD5LGP,采用100μg剂量的质粒免疫小鼠,以纯化的埃博拉病毒包膜蛋白亚单位融合蛋白(GP1-Fc)作为抗原,通过ELISA检测及Western blot验证测定血清抗体滴度及特异性。结果 100μg质粒免疫小鼠3次后,小鼠血清中GP中和抗体滴度达到1∶2 000。结论编码埃博拉病毒包膜蛋白GP的DNA疫苗(pEAK13CD5LGP)能够诱导小鼠产生高滴度和持久的中和抗体,作为埃博拉病毒疫苗具有潜在的应用价值。

关键词：埃博拉病毒包膜蛋白 DNA疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PNPLA3基因表达以及干扰腺病毒的构建及鉴定

引用

基础医学与临床 2011年第5期31卷 485-489页

作者：乔爱君方福德常永生中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建糖脂代谢和脂肪肝相关基因PNPLA3过表达以及干扰腺病毒载体并加以鉴定。方法根据PNPLA3基因序列设计过表达以及干扰序列引物,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV的BglⅡ和XhoⅠ位点,干扰序列克隆入pAdTrack-U6穿梭载体,PmeⅠ酶切... 详细信息

目的构建糖脂代谢和脂肪肝相关基因PNPLA3过表达以及干扰腺病毒载体并加以鉴定。方法根据PNPLA3基因序列设计过表达以及干扰序列引物,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV的BglⅡ和XhoⅠ位点,干扰序列克隆入pAdTrack-U6穿梭载体,PmeⅠ酶切线性化穿梭质粒与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共转化***5183感受态细菌产生重组腺病毒载体,用PacⅠ酶切线性化的回收质粒转染293A细胞包装腺病毒颗粒,在倒置荧光显微镜下观察293A细胞绿色荧光蛋白的表达,并初步观察其感染小鼠原代细胞的效率。结果测序、酶切鉴定证实,构建出了PNPLA3基因过表达及干扰腺病毒载体。包装的腺病毒浓缩悬液滴度为1.5×1011VP/mL。以120感染复数感染小鼠肝脏原代细胞,感染效率可达到90%以上,干扰效率超过80%以上。结论成功构建了PNPLA3基因的过表达以及干扰腺病毒载体。

关键词： PNPLA3 过表达干扰腺病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组EpoAB-NGF模拟肽的神经营养功能

引用

中国生物工程杂志 2011年第1期31卷 1-5页

作者：潘勇昭陈虹王欣马晓骊黄秉仁中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的:研究重组融合蛋白红细胞生成素AB肽-神经生长因子模拟肽(EpoAB-NGF9和EpoAB-NGF/12)的神经营养作用。方法:构建pET-42a-EpoAB-NGF9/12原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白,显微镜观察PC12细... 详细信息

目的:研究重组融合蛋白红细胞生成素AB肽-神经生长因子模拟肽(EpoAB-NGF9和EpoAB-NGF/12)的神经营养作用。方法:构建pET-42a-EpoAB-NGF9/12原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白,显微镜观察PC12细胞诱导分化,流式细胞仪检测凋亡细胞。结果:大肠杆菌表达的重组融合蛋白GST-EpoAB-NGF9/12分子量约为30kDa,抗GST抗体免疫印迹反应呈阳性。融合蛋白可以诱导PC12细胞分化,促进轴突生长。R2L1细胞去血清培养,凋亡细胞占(31.7±0.60)%,去血清后加入融合蛋白GST-EpoAB-NGF9/12,细胞凋亡率分别为(25.2±3.52)%、(25.7±1.46)%,呈现一定程度的抑制细胞凋亡的活性。结论:重组EpoAB-NGF模拟肽融合蛋白具有与NGF类似的神经营养作用。

关键词： EpoAB-NGF模拟肽原核表达神经营养

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TRAIL对CIA小鼠脾细胞表达Th1/Th2细胞因子的影响

引用

基础医学与临床 2011年第12期31卷 1330-1334页

作者：刁智娟朱洁卿史娟郑德先中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠的治疗效果,探讨TRAIL治疗类风湿性关节炎(RA)的可能机制。方法牛Ⅱ型胶原蛋白加弗氏完全佐剂免疫DBA/1J小鼠建立CIA模型,采用重组腺相关病毒AAV-TRAIL关节腔... 详细信息

目的观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠的治疗效果,探讨TRAIL治疗类风湿性关节炎(RA)的可能机制。方法牛Ⅱ型胶原蛋白加弗氏完全佐剂免疫DBA/1J小鼠建立CIA模型,采用重组腺相关病毒AAV-TRAIL关节腔内注射进行治疗。CBA和流式细胞术检测Th1/Th2细胞因子的分泌。结果 AAV-TRAIL可改善CIA小鼠的病情,减轻关节红肿。体外研究其机制发现Ⅱ型胶原可以增加Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2和Th2型细胞因子IL-4、IL-5的分泌,其中Th1型细胞因子的增加更为明显。而TRAIL则可显著抑制Ⅱ型胶原引起的Th1型细胞因子的上调,而对Th2型细胞因子的分泌没有影响。结论 TRAIL对CIA小鼠的治疗作用可能和TRAIL抑制Th1型细胞因子分泌相关。

关键词：类风湿性关节炎 CIA小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 Th1细胞因子 Th2细胞因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：