检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生化药物杂志 2016年第5期36卷 1-4,221页

作者：朱丽媛彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系/医学分子生物学国家重点实验室北京100005

天然反义转录物(natural antisense transcripts,NATs)被定义为在自然状态下生物体内产生的内源性RNA,其通常是通过与靶分子进行序列互补而形成天然的正义-反义转录物配对的双链RNA。NATs普遍存在于原核和真核生物中,可以在转录水平、... 详细信息

天然反义转录物(natural antisense transcripts,NATs)被定义为在自然状态下生物体内产生的内源性RNA,其通常是通过与靶分子进行序列互补而形成天然的正义-反义转录物配对的双链RNA。NATs普遍存在于原核和真核生物中,可以在转录水平、转录后水平、翻译水平等多个层次经由不同机制调节基因的表达。此外,NATs也与恶性肿瘤的发生发展密切相关,一些NATs在正常组织与神经胶质瘤组织中的表达存在显著差异。NATs可能成为神经胶质瘤诊断、预后以及治疗效果的一种新的标志物,同时NATs也是潜在的新的胶质瘤基因治疗的靶点。本文对NATs的分类及其在神经胶质瘤中的功能及可能的机制做具体阐述。

关键词：天然反义转录物(NATs) 神经胶质瘤癌症

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Zika病毒NS3具有依赖于ATP水解的dsDNA解链活性

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基础医学与临床 2018年第5期38卷 674-678页

作者：徐杉王蕾杰石磊中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究Zika病毒NS3蛋白是否具有依赖于ATP水解的ds DNA解链活性。方法构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21菌株中表达带有His标签的Zika NS3蛋白,并用Ni琼脂糖珠进行纯化;利用ATPase检测试剂盒对NS3的ATP水解活性进行检测;利用荧光共振... 详细信息

目的研究Zika病毒NS3蛋白是否具有依赖于ATP水解的ds DNA解链活性。方法构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21菌株中表达带有His标签的Zika NS3蛋白,并用Ni琼脂糖珠进行纯化;利用ATPase检测试剂盒对NS3的ATP水解活性进行检测;利用荧光共振能量转移(FRET)原理,对NS3的ds DNA解链活性进行实时动力学检测;利用定点突变方法将NS3蛋白的第198位甘氨酸(G)突变为丙氨酸(A),得到G198A突变体,检测其是否影响NS3解旋酶活性。结果 Zika NS3蛋白在体外可以水解ATP,酶解最大反应速率为2.76μmol/(L·min),Km值为0.11 mmol/L;Zika NS3蛋白在体外可以解链ds DNA;G198A突变体与野生型相比,ATP水解速率和ds DNA的解链速率均明显减弱。结论 Zika NS3蛋白在体外具有ATP水解活性以及ds DNA解链活性,且第198位甘氨酸对于NS3酶活性至关重要。

关键词： Zika病毒 NS3蛋白 ATP dsDNA 解旋酶

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恒河猴增龄过程中miR-16-5p及靶基因在外周血白细胞中的表达变化

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基础医学与临床 2019年第7期39卷 995-1000页

作者：胡婧雯李艳艳刘伟焦丽杨晶杨云和占龙彭小忠鲁帅尧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650107 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的明确衰老相关microRNA与恒河猴增龄的相关性。方法将猴群参照人类增龄划分为幼年、成年、老年和长寿,提取外周血白细胞的总RNA;用real-time PCR检测外周血白细胞中的microRNA及VEGFA、GHR、TBP、INSR、CLOCK、IKBKB、PIK3R1、LRP2、... 详细信息

目的明确衰老相关microRNA与恒河猴增龄的相关性。方法将猴群参照人类增龄划分为幼年、成年、老年和长寿,提取外周血白细胞的总RNA;用real-time PCR检测外周血白细胞中的microRNA及VEGFA、GHR、TBP、INSR、CLOCK、IKBKB、PIK3R1、LRP2、SSTR3、IGF1R、BCL2、PPM1D、IRS1、MAPK8、ADCY5、APP、NFE2L1、BDNF和PEX5的表达;利用microRNA靶基因预测网站miRwalk、TargetSan、miRecords、miRDB预测miR-16-5p的靶基因,并与人类衰老基因库(http://***/)对接。结果在增龄过程中,恒河猴外周血白细胞中miR-16-5p的表达量随年龄增长而增加(P<0.001);多个网站对miR-16-5p靶基因预测得到539个潜在的靶基因,与人类衰老基因组库对接后有19个基因重合;有10个基因的mRNA在恒河猴增龄过程中存在差异表达,其中,IKBKB、PIK3R1、IRS1的表达随着年龄的增加逐渐下降。结论在自然衰老恒河猴的外周血白细胞中,miR-16-5p及其靶基因IKBKB、PIK3R1、IRS1能作为外周血衰老候选标志物。

关键词：衰老恒河猴 miR-16-5p 标志物

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长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育中的表达及功能

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基础医学与临床 2017年第11期37卷 1513-1518页

作者：李嘉宁周俊洁刘伟彭小忠舒鹏程中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005

目的检测长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中的表达及作用。方法 1)通过UCSC基因组浏览器获取其基因组座位,利用Coding Potential Calculator工具对其编码能力进行预测;2)原位杂交及免疫荧光技术确定其在大脑皮质发育过程... 详细信息

目的检测长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中的表达及作用。方法 1)通过UCSC基因组浏览器获取其基因组座位,利用Coding Potential Calculator工具对其编码能力进行预测;2)原位杂交及免疫荧光技术确定其在大脑皮质发育过程中的表达谱;3)TALEN技术构建AK046999完全敲除小鼠,并且在DNA及RNA水平对其进行敲除鉴定;4)免疫荧光及TUNEL技术对敲除小鼠大脑皮质在发育过程的功能进行检测。结果 1)AK046999可认为是非编码RNA(Coding Potential Score<-1);2)AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中,前体区相对高表达;3)成功构建了AK046999敲除小鼠;4)与对照相比,AK046999敲除小鼠中表达PAX6、TBR2和NEUROD2的细胞数量无明显改变,并且在这两组小鼠中凋亡细胞的数量无明显改变。结论 AK046999在发育期的小鼠大脑皮质表达,但敲除后不影响小鼠大脑皮质中神经祖细胞的增殖、分化和细胞凋亡过程。

关键词： AK046999 长链非编码RNA 时空表达谱大脑皮质发育

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寨卡病毒NS4A蛋白影响小鼠大脑皮质神经元的迁移

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 988-993页

作者：韦智钟阴彬彭小忠刘伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005

目的在体研究寨卡病毒(Zika virus)NS3和NS4A蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响。方法通过c DNA末端快速扩增技术(RACE)及反转录PCR测定Zika病毒SZ01株基因组的开放阅读框,确定NS3和NS4A蛋白编码序列,构建融合Flag标签的p CIG蛋白表达载... 详细信息

目的在体研究寨卡病毒(Zika virus)NS3和NS4A蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响。方法通过c DNA末端快速扩增技术(RACE)及反转录PCR测定Zika病毒SZ01株基因组的开放阅读框,确定NS3和NS4A蛋白编码序列,构建融合Flag标签的p CIG蛋白表达载体。通过子宫内电转技术在E13.5 d小鼠的大脑皮质的神经前体细胞中表达病毒蛋白。免疫组化检测Flag标签、TBR1与e GFP,观察表达NS3和NS4A蛋白的细胞在E18.5 d大脑皮质中的分布,评估Zika病毒蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响。结果 1)NS4A的氨基酸序列与NCBI数据库一致,NS3存在1处氨基酸位点突变。2)Flag标签荧光信号与e GFP荧光共定位,提示e GFP可以指示病毒蛋白在皮质中的表达。3)TBR1荧光显示在体表达NS4A后,神经元的分布与p CIG对照组及表达NS3相比有显著差异(P<0.001)。结论在体表达Zika病毒的NS4A蛋白可能影响神经元迁移。

关键词：寨卡病毒 NS4A蛋白子宫内电转神经元迁移

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海马内注射鸢尾素缓解小鼠抑郁样行为

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基础医学与临床 2022年第12期42卷 1850-1854页

作者：李晶黄炳轩许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005 北京市第一六六中学北京100006

目的探讨鸢尾素对抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分成模型组和健康组,模型组采用开放空间强迫游泳(OSFS)方法建立抑郁小鼠模型,造模成功后将造模组随机分成“模型-对照”组和“模型-鸢尾素”组。健康野生小鼠... 详细信息

目的探讨鸢尾素对抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分成模型组和健康组,模型组采用开放空间强迫游泳(OSFS)方法建立抑郁小鼠模型,造模成功后将造模组随机分成“模型-对照”组和“模型-鸢尾素”组。健康野生小鼠正常饲养,同样随机分为“健康-对照”组和“健康-鸢尾素”组。所有鸢尾素组小鼠通过脑立体定位注射向两侧海马分别注射77 pmol鸢尾素,对照组注射同体积的溶剂(PBS)。利用强迫游泳及悬尾检测等实验对其抑郁样行为进行检测。结果与健康组比较,抑郁模型组小鼠在强迫游泳测试(P<0.01)及悬尾测试(P<0.05)中的不动时间显著延长,证明成功模拟了抑郁症患者的绝望样行为,模型构建成功。与“模型-对照”组相比,鸢尾素可显著缩短“模型-鸢尾素”组小鼠在强迫游泳实验(P<0.001)及悬尾实验(P<0.05)中的不动时间。结论鸢尾素可显著改善开放空间强迫游泳抑郁模型小鼠的抑郁样行为。

关键词：鸢尾素抑郁症体育运动抗抑郁

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三胸家族核心成员DPY30与ASH2L的表达相关性分析

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基础医学与临床 2020年第8期40卷 1047-1052页

作者：文畅李梁舒鹏程强伯勤彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005 中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的探究三胸家族(TrxG)核心成员DPY30与ASH2L表达是否具有相关性。方法Northern blot检测DPY30与ASH2L在多种人体组织中的表达及佛波醇肉豆蔻酸酯(PMA)诱导人慢性髓源白血病(K562)细胞分化过程中的DPY30与ASH2L表达变化;Western blot与... 详细信息

目的探究三胸家族(TrxG)核心成员DPY30与ASH2L表达是否具有相关性。方法Northern blot检测DPY30与ASH2L在多种人体组织中的表达及佛波醇肉豆蔻酸酯(PMA)诱导人慢性髓源白血病(K562)细胞分化过程中的DPY30与ASH2L表达变化;Western blot与RT-qPCR分别检测ASH2L条件性敲除小鼠(ASH2L-cKO)大脑皮质TrxG成员的蛋白及TrxG核心成员RNA表达情况;利用IGV软件可视化分析小鼠大脑皮质ChIP-seq结果中ASH2L、H3K4me3在ASH2L、DPY30基因染色质上的分布情况。结果DPY30与ASH2L的表达在人体各组织中分布有一定相似性;DPY30与ASH2L在PMA诱导K562细胞分化过程中的表达均逐渐减少;ASH2L-cKO小鼠大脑皮质中DPY30蛋白水平减少,DPY30的RNA水平改变无统计学意义。结论DPY30与ASH2L的表达具有相关性,ASH2L可能调控了DPY30蛋白水平。

关键词： DPY30 ASH2L 基因表达

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内源性代谢小分子X以信号分子的方式通过激活Erk/Cyclin D1信号通路促进骨骼肌干细胞增殖与再生

内源性代谢小分子X以信号分子的方式通过激活Erk/Cyclin D1信号通...

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2012全国发育生物学大会

作者：邹小停孟姣李莉张勤王威钟冉李常银周玉长张勇朱大海中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系

最新研究发现,内源性代谢中间产物在不同的生物学过程中都发挥着十分重要的调控功能,但目前已知具有这样功能的内源性代谢小分子却寥寥无几。我们通过系统发现鉴定了一个与骨骼肌发育相关的内源性代谢小分子X。实验表明内源性代谢小分子... 详细信息

最新研究发现,内源性代谢中间产物在不同的生物学过程中都发挥着十分重要的调控功能,但目前已知具有这样功能的内源性代谢小分子却寥寥无几。我们通过系统发现鉴定了一个与骨骼肌发育相关的内源性代谢小分子X。实验表明内源性代谢小分子X剂量和时间依赖的促进C2C12和原代骨骼肌干细胞的增殖。同时,X可以协同IGF-1对肌细胞增殖的促进作用和拮抗Myostatin对骨骼肌干细胞增殖的抑制作用。同时,利用cardiotoxin诱导的小鼠骨骼肌再生模型,我们探讨了该小分子在骨骼肌再生种的功能。我们的结果表明,该内源性代谢小分子可以通过调控骨骼肌干细胞的激活和增值加速骨骼肌的再生。本研究的重要发现是,内源性代谢小分子X通过非Ras和不依赖能量代谢的方式激活Mek/Erk/Cyclin D1信号通路从而促进骨骼肌干细胞的激活、增殖和再生。结论:内源性代谢小分子X除了可以为细胞提供能量外,本研究首次证明了该代谢小分子还具有细胞信号分子的重要调控功能。该研究结果为揭示内源性代谢中间产物的细胞信号转导功能提供了全新的视野和研究方向。同时,也为应用该代谢小分子治疗骨骼肌疾病展示了良好的临床前景。

关键词：骨骼肌干细胞小分子 Erk/Cyclin D1 内源性 Cyclin 信号通路信号分子

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MRG通过影响骨骼肌干细胞微环境调控骨骼肌干细胞功能

MRG通过影响骨骼肌干细胞微环境调控骨骼肌干细胞功能

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2012全国发育生物学大会

作者：孟姣邹小停张勇朱大海中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系

骨骼肌干细胞在骨骼肌损伤再生中起着十分重要的作用,而各种细胞因子和细胞间的相互作用为骨骼肌干细胞的活化、增殖、分化以及融合提供了关键的微环境。因此,研究微环境对骨骼肌干细胞功能的调控作用具有十分重要的理论意义和临床价值... 详细信息

骨骼肌干细胞在骨骼肌损伤再生中起着十分重要的作用,而各种细胞因子和细胞间的相互作用为骨骼肌干细胞的活化、增殖、分化以及融合提供了关键的微环境。因此,研究微环境对骨骼肌干细胞功能的调控作用具有十分重要的理论意义和临床价值。最近我们实验室发现了一个在转录和翻译水平都受Myostatin上调,而且在骨骼肌损伤早期高表达的泛素连接酶基因MRG(Mmyostatin Regulated Gene)。为了研究MRG在骨骼肌发育以及再生中的功能,我们建立了MRG基因敲除小鼠。利用MRG基因敲除小鼠进行的骨骼肌再生研究表明,与野生型相比MRG基因敲除小鼠骨骼肌损伤后再生速度加快。有趣的是,我们发现单个肌纤维上骨骼肌干细胞的数目在野生型和MRG基因敲除小鼠间并没有明显差异。同时,我们还发现CTX损伤2小时后MRG的表达就迅速升高。基于以上结果我们假设,MRG很可能是通过影响细胞因子的分泌从而改变骨骼肌干细胞的微环境进而影响其活化增殖和再生过程。为了验证这一假设,我们检测了损伤后血清中细胞因子的浓度变化,发现在MRG基因敲除小鼠中大部分细胞因子浓度均低于野生型小鼠,而这些细胞因子在mRNA水平的表达却没有明显差异。以上结果为我们的假设提供了部分理论依据。同时,分子机制研究表明,MRG对骨骼肌干细胞微环境的影响可能是通过泛素化它的底物Snapin来调节细胞因子的分泌来实现的。

关键词：骨骼肌干细胞细胞因子野生型 MRG 基因敲除小鼠干细胞微环境

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盲肠结扎穿孔术建立急性肺损伤小鼠模型

盲肠结扎穿孔术建立急性肺损伤小鼠模型

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第九届中青年呼吸学者论坛

作者：郭峰邹镇蒋澄宇中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系

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