检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2009年第10期29卷 1039-1043页

作者：彭清林张婷范东升郑伟谢喜秀许于飞许雪梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物物理与结构生物学系北京100005

目的优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV18L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清。方法联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV18L1基因,合成后克隆入pFastBac1载体... 详细信息

目的优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV18L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清。方法联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV18L1基因,合成后克隆入pFastBac1载体,构建重组病毒,感染sf9昆虫细胞72h后进行Western blot表达鉴定,密度梯度离心法纯化后进行纯度鉴定及形态学鉴定,获得HPV18L1VLP,联合弗氏佐剂免疫豚鼠制备抗血清。结果HPV18L1优化基因在昆虫细胞中可有效表达,纯化的HPV18L1蛋白纯度达90%以上,电镜观察可见直径约为50nm的VLP,豚鼠免疫血清中HPV18L1VLP特异性抗体滴度达5.12×105。结论HPV18L1优化基因可在昆虫细胞中高效表达并组装成VLP,制备的高滴度抗血清为HPV18L1VLP疫苗的进一步研究打下基础。

关键词：人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒杆状病毒表达系统抗血清

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基础医学网络信息资源整合及应用

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医学与哲学（B） 2009年第5期30卷 63-64页

作者：司超增郝志勇单广良王恒中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院流行病与卫生统计学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院网络中心北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原生物学系分子寄生虫实验室北京100005

结合基础医学网络资源的分布现状,阐述了基础医学资源整合的必要性和紧迫性,介绍了基础医学数据共享网建设中资源整合的技术方法和共享资源管理方式。并针对我国目前网络环境下基础医学资源整合建设中存在的问题提出相应的解决策略。

关键词：基础医学资源整合门户技术数据共享

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高分辨率熔解曲线小扩增子法结合混样法在线粒体13928G>C突变分析中的应用

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中国医药生物技术 2009年第6期4卷 445-448页

作者：张建佚冯洁杨泽霍正浩宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系银川750004 北京协和医学院/中国医学科学院 100730 卫生部北京老年医学研究所/卫生部北京医院医学遗传室 100730

目的探讨高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术在线粒体13928G>C突变分析中应用的可行性。方法在PCR前,体系中加入饱和染料、高温寡核苷酸内参(96℃)、低温寡核苷酸内参(60℃)和与待测样本等体积的已知基因型为GG的模... 详细信息

目的探讨高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术在线粒体13928G>C突变分析中应用的可行性。方法在PCR前,体系中加入饱和染料、高温寡核苷酸内参(96℃)、低温寡核苷酸内参(60℃)和与待测样本等体积的已知基因型为GG的模板进行混样扩增,运用HRM技术对定量DNA的PCR产物进行基因分型,并从中随机抽取20例进行测序验证。结果930例样本中野生型GG占728例,突变型CC占202例;DNA定量有助于HRM分析时对分型结果的判断;同时联合运用高、低温内参比只用一种内参分型效果好;随机抽取的20例样本的测序结果与HRM分型结果相一致。结论运用高分辨率熔解曲线小扩增子法结合混样法可对线粒体基因组13928G>C突变进行准确分型。

关键词：突变多态性,单核苷酸线粒体高分辨率熔解曲线

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骨髓造血干细胞微环境

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细胞生物学杂志 2008年第3期30卷 323-328页

作者：唐红梅马静韩代书中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院细胞生物学系北京100005

近来成体干细胞的研究进展为许多重大疾病的治疗带来了新的希望。造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)是迄今认识到的最为典型的成体干细胞,骨髓是干细胞研究的主要组织,许多成体干细胞的概念及其基本特征源于对骨髓中造血干细... 详细信息

近来成体干细胞的研究进展为许多重大疾病的治疗带来了新的希望。造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)是迄今认识到的最为典型的成体干细胞,骨髓是干细胞研究的主要组织,许多成体干细胞的概念及其基本特征源于对骨髓中造血干细胞的研究。近年来的重要进展之一是微环境对HSCs的调节功能,干细胞微环境有准确的解剖学定位,也是一个生理功能的基本单位,整合介导机体对干细胞需求的反应信号,从而调节干细胞的数量和命运。在病理条件下,微环境仍然调节干细胞的功能,因此对造血微环境的认识已成为干细胞研究的中心内容。现对骨髓造血干细胞微环境的组成、信号及修饰的研究进展进行综述,为深入研究干细胞微环境的结构和功能提供背景资料。

关键词：造血干细胞微环境信号通路

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纳米转基因技术可用于大鼠心梗后血管再生

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基础医学与临床 2008年第10期28卷 1035-1039页

作者：唐红梅廉瑞青张晓东中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所细胞生物学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所人体解剖与组织胚胎学系北京100005 清华大学医学院北京100084

目的探讨包载VEGF165质粒的聚乳酸-乙醇酸(PLGA)纳米粒子对大鼠心肌梗死后血管再生治疗的可行性。方法制备大鼠心梗模型36只,实验组24只、对照组12只,术后1周在梗死区和与正常心肌交界处注射pVEGF165-PLGA纳米粒子和pVEGF165。应用RT-PC... 详细信息

目的探讨包载VEGF165质粒的聚乳酸-乙醇酸(PLGA)纳米粒子对大鼠心肌梗死后血管再生治疗的可行性。方法制备大鼠心梗模型36只,实验组24只、对照组12只,术后1周在梗死区和与正常心肌交界处注射pVEGF165-PLGA纳米粒子和pVEGF165。应用RT-PCR和免疫组化检测血管内皮生长因子在不同的时间点(3、7、11、14和21 d)的表达;组织切片观察梗死区血管形成特点及其密度;以及纳米粒子对人体的毒副作用。结果与对照组相比,实验组VEGF可在心肌组织持续稳定表达;梗死区血管内皮细胞增生活跃,再生血管数量增加。注射48 h后心肌细胞核内可见纳米粒子,8周后组织活检未见血管瘤。结论PLGA纳米粒子有效介导pVEGF165转染心肌,并通过心肌细胞表达VEGF165,促进缺血区心肌组织的血管再生。

关键词：心肌梗塞纳米粒子血管再生转基因技术

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4.1B蛋白的抑制肿瘤作用

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生命的化学 2008年第6期28卷 711-714页

作者：盛誉乔梅珊祁元明董文吉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞生物学系北京100005 郑州大学生物工程系郑州450001 中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所艾滋病研究中心北京100005

4.1R和Merlin是4.1蛋白超家族中两个功能比较清楚的成员,前者通过结合肌动蛋白和血影蛋白维持红细胞骨架结构的完整性;后者为抑癌蛋白,其缺失与脑膜瘤发生有关。4.1B蛋白是4.1R和Merlin的同源蛋白,与二者的结构和功能具有相似性。4.1B... 详细信息

4.1R和Merlin是4.1蛋白超家族中两个功能比较清楚的成员,前者通过结合肌动蛋白和血影蛋白维持红细胞骨架结构的完整性;后者为抑癌蛋白,其缺失与脑膜瘤发生有关。4.1B蛋白是4.1R和Merlin的同源蛋白,与二者的结构和功能具有相似性。4.1B蛋白由三个保守的结构域构成,即FERM、SABD和CTD,通过这三个结构域,能与一系列蛋白质相互作用。4.1B蛋白表达缺失与脑膜瘤、乳腺癌和非小细胞肺癌的发生相关,而过量表达则可激活JNK信号途径,促进细胞凋亡;此外,4.1B蛋白还具有抑制肿瘤转移的功能。因此,目前多认为4.1B基因可能是一个抑癌基因。

关键词： 4.1起家族 4.1B蛋白抑癌基因细胞信号蛋白质相互作用

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D-酪氨酰-tRNA 脱酰基酶(DTD)在小鼠胚胎和脑中的分布

D-酪氨酰-tRNA 脱酰基酶(DTD)在小鼠胚胎和脑中的分布

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2008年全国生物化学与分子生物学学术大会

作者：刘伟赵志强赵理强伯勤袁建刚彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学及分子生物学系

目的:D-酪氨酰-tRNA 脱酰基酶(DTD)参与了中枢神经系统中的 D-氨基酸的去毒机制,观察 DTD 在小鼠胚胎的时空表达和在脑中的分布情况。方法:自制的多克隆抗体通过免疫组织化学 ABC 法显示 DTD 免疫阳性物质在小鼠胚胎和脑中的分布情况,... 详细信息

目的:D-酪氨酰-tRNA 脱酰基酶(DTD)参与了中枢神经系统中的 D-氨基酸的去毒机制,观察 DTD 在小鼠胚胎的时空表达和在脑中的分布情况。方法:自制的多克隆抗体通过免疫组织化学 ABC 法显示 DTD 免疫阳性物质在小鼠胚胎和脑中的分布情况,同时用 DTD 探针在 mRNA 水平上检测 DTD 分布。

关键词： DTD 中枢神经系统小鼠胚胎

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人Ndfip1和Nedd4的原核表达,纯化和抗体制备

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生命科学研究 2008年第1期12卷 40-44页

作者：黄守均张勇菅记涌朱大海中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础医学院生化与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国北京100005

为了进一步从蛋白水平上检测Ndfip1(Nedd4 family interacting protein 1)和Nedd4(Neuronal precursor cell-expressed developmentally down-regulated 4)在肢带型肌营养不良(Limb-girdle muscular dystrophy,LGMD)患者的肌肉组织中的表达及功能,以正常人的脑和肾脏组织的总RNA为模板,RT-PCR扩增Ndfip1和Nedd4部分编码序列,构建原核表达重组质粒pET28b-hNdfip1和pET28b-hNedd4,转化大肠杆菌BL21后,加IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA层析柱纯化蛋白,免疫BALB/c小鼠制备抗体.Westernblot检测显示抗体能识别人和小鼠的Ndfip1和Nedd4,小鼠各组织中Ndfip1的蛋白表达谱与文献报道的Ndfip1 mRNA表达谱不一致,暗示Ndfip1具有转录和翻译水平的调控.

关键词： Ndfip1 Nedd4 肢带型肌营养不良抗体

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载脂蛋白AI及其半胱氨酸突变体结合脂质状态下对内毒素血症小鼠作用的研究

载脂蛋白AI及其半胱氨酸突变体结合脂质状态下对内毒素血症小鼠作...

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中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议

作者：王云龙中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室

目的利用内毒素血症小鼠模型来检测我们构建的八种重组高密度脂蛋白(野生型载脂蛋白AI及其7种半胱氨酸突变体结合脂质构成)的治疗效果。方法我们实验室构建了7种AI的半胱氨酸突变体:A-I(s52C),A-I(N74C),A-I(K107C),A-I(G129C),A-I(K19... 详细信息

目的利用内毒素血症小鼠模型来检测我们构建的八种重组高密度脂蛋白(野生型载脂蛋白AI及其7种半胱氨酸突变体结合脂质构成)的治疗效果。方法我们实验室构建了7种AI的半胱氨酸突变体:A-I(s52C),A-I(N74C),A-I(K107C),A-I(G129C),A-I(K195C)和A-I(S228C)。将这7种突变体及野生型AI与脂质结合构成八种重组的HDL:rHDL52,rHDL74,rHDL107,rHDL129,rHDL173.

关键词：内毒素血症野生型炎症因子半胱氨酸突变体小鼠模型

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