检索结果-内蒙古大学图书馆

SLC22A12及SLC2A9基因多态性与宁夏地区人群低尿酸血症的相关性

基础医学与临床 2018年第5期38卷 638-642页

作者：尹逸丛马超超吴洁禹松林国秀芝侯立安由婷婷王丹晨李洪雷徐涛邱玲中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科北京100730 大连医科大学检验医学院辽宁大连116044 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病及统计学系北京100005

目的研究宁夏地区人群SLC22A12基因rs505802位点和SLC2A9基因rs6855911、rs737267、rs12498742、rs7442295、rs734553和rs16890979位点的基因多态性与低尿酸血症的相关性。方法用多阶段、分层、随机整群抽样的方法于2011年10月至11月在宁夏回族自治区纳入受试者6 056例,确定98例为低尿酸血症受试者,用1∶1配对病例对照研究法,按照性别和年龄严格匹配84名尿酸正常受试者作为对照组,进行体格检查及实验室生化指标检测,用配对t检验比较一般体检资料及生化指标,用Sequenom Mass ARRAY i PLEX GOLD技术进行SNP位点检测,χ2检验比较各组间基因型频率及等位基因频率,通过Hardy-Weinberg检验确认标本的群体代表性。结果低尿酸组三酰甘油、低密度脂蛋白和肌酐均低于对照组(P<0.05)。SLC2A9基因rs7442295位点低尿酸组G的频率高于对照组(6.00%vs 1.00%,Pc<0.05),携带A/A基因型人群低尿酸血症的患病风险低于含有A/G基因型人群,提示A突变为G与低尿酸血症发生相关(Pc<0.05)。其余6个SNPs位点均未体现与低尿酸血症的相关性。结论 SLC2A9基因的rs7442295位点基因多态性与宁夏人群低尿酸血症相关。

关键词：低尿酸血症宁夏人群单核苷酸多态性

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北京协和医学院神经解剖教学改革回顾与展望

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基础医学与临床 2018年第1期38卷 136-140页

作者：刘克陆菁菁申新华李德岭刘伟曹承刚马超中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005 北京协和医院放射科北京100730 北京天坛医院神经外科北京100050

北京协和医学院(PUMC)自成立以来,解剖学系就开设了局部解剖和神经解剖两门重要基础课。具有百年历史的PUMC历经老协和(解放前)、新协和(解放后)和今协和(改革开放后)3个历史阶段。伴随着时代的变迁,PUMC的神经解剖教学也在与时俱进地... 详细信息

北京协和医学院(PUMC)自成立以来,解剖学系就开设了局部解剖和神经解剖两门重要基础课。具有百年历史的PUMC历经老协和(解放前)、新协和(解放后)和今协和(改革开放后)3个历史阶段。伴随着时代的变迁,PUMC的神经解剖教学也在与时俱进地发生巨大变化,由老协和时的内容多、学时长和以强化学科基础为主,到新协和的少而精,再到今协和的基础与临床全方位结合教学理念的形成,PUMC的神经解剖学经历了脱胎换骨的蜕变,如今的神经解剖课程已成为既古老又年轻,既传统又创新,与临床全方位结合、丰富多彩和深受同学们喜爱的基础课。

关键词：神经解剖学基础与临床全方位结合医学教育改革

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无烟立法对心血管病影响的评估研究进展

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中华预防医学杂志 2017年第7期51卷 656-660页

作者：刘阳杨功焕万霞中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病与卫生统计学系 100005

二手烟暴露可导致非吸烟者心血管病的发生和急性发作.为保护公众免于公共场所二手烟暴露,全球很多国家和地区颁布了无烟立法.美国、加拿大、英国、爱尔兰、意大利、西班牙等发达国家研究了无烟立法对心血管病的入院、发病以及死亡的影响... 详细信息

二手烟暴露可导致非吸烟者心血管病的发生和急性发作.为保护公众免于公共场所二手烟暴露,全球很多国家和地区颁布了无烟立法.美国、加拿大、英国、爱尔兰、意大利、西班牙等发达国家研究了无烟立法对心血管病的入院、发病以及死亡的影响,以证实无烟立法的健康效益,推动立法的有效执行.本文检索了PubMed、EMBASE、Web of Science、Cochrane Library、中国知网、万方数据库,对相关研究中的设计方法、评估指标、统计分析方法、研究结果等方面进行综述,为我国评估无烟立法健康效益提供参考.

关键词：烟草烟污染立法心血管疾病影响健康效益

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靶向HER2嵌合抗原受体修饰T细胞的构建及其特异性杀伤肿瘤的作用

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中华病理学杂志 2017年第10期46卷 714-720页

作者：唐海军刘玉琴卞晓翠冯海凉顾蓓孙昊左春霞周芳颖刘兢中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心 100005 中国科学技术大学生命科学学院

目的以靶向HER2的人源化单克隆抗体H1．2scFv为基础构建第三代嵌合抗原受体（CAR），并探讨CAR修饰的T淋巴细胞（CAR—T）对HER2高表达肿瘤的杀伤作用。方法运用分子克隆方法将CAR的表达框和H1．2scFv装人慢病毒表达载体，利用慢病毒载... 详细信息

目的以靶向HER2的人源化单克隆抗体H1．2scFv为基础构建第三代嵌合抗原受体（CAR），并探讨CAR修饰的T淋巴细胞（CAR—T）对HER2高表达肿瘤的杀伤作用。方法运用分子克隆方法将CAR的表达框和H1．2scFv装人慢病毒表达载体，利用慢病毒载体将H1—2CAR基因转导至T淋巴细胞构建CAR．T细胞，通过酶联免疫吸附测定检测细胞因子白细胞介素2的表达，通过LDH释放实验检测CAR—T细胞杀伤肿瘤细胞的效率。最后用NOD／SCID小鼠移植瘤模型来检测CAR．T细胞在体内杀伤肿瘤细胞的能力。结果成功构建了靶向HER2的第三代嵌合抗原受体H1—2CAR表达载体，该载体转染的H1—2CAR—T细胞能与HER2’的肿瘤细胞结合并提高了细胞因子白细胞介素2的释放。在本研究中Hi一2CAR—T细胞与HER2高表达的肿瘤细胞相互作用时白细胞介素2分泌量可达到1000¨g／L以上，而外周血单个核细胞与肿瘤细胞相互作用时基本上不分泌白细胞介素2。在体外肿瘤细胞培养体系中，H1—2CAR—T细胞对HER2高表达肿瘤细胞的杀伤率明显高于HER2低／不表达的细胞。当效靶比为20：1时，H1—2CAR—T细胞对HER2高表达的乳腺癌细胞SK—BR-3的杀伤率可以达到（90．1±2．8）％．而H1．2CAR—T对HER2阴性的乳腺癌细胞MDA—MB-231的杀伤率只有（13．5±4．7）％。在NOD／SCID小鼠体内，CAR．T细胞治疗组乳腺癌移植瘤的生长速度减慢，实验结束时H1-2CAR—T细胞治疗组肿瘤质量平均为（0．74-0．1）g，未转染T细胞治疗组为（1．2±0．2）g，PBS组为（1．2±0．2）g。H1—2CAR—T治疗组与未转染T细胞治疗组相比较有明显差异（P〈0．05），而未转染T细胞治疗组与PBS治疗组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向HER2的H1．2CAR．T细胞能特异性杀伤HER2高表达的肿瘤细胞，为CAR—T靶向治疗HER2’的肿瘤提供了研究基础。

关键词：基因 erbB.2 T淋巴细胞分子靶向治疗

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胶质瘤中PTB调控长非编码RNA选择性剪接的筛选

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基础医学与临床 2018年第6期38卷 787-792页

作者：卫群芳朱丽媛韩为彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的探究在神经胶质瘤发生发展过程中PTB调控选择性剪接的长非编码RNA。方法全转录组芯片分析筛选受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA。提取胶质瘤和正常细胞系及临床病例组织样品和敲低PTB的神经胶质瘤细胞总RNA,实时荧光定量PC... 详细信息

目的探究在神经胶质瘤发生发展过程中PTB调控选择性剪接的长非编码RNA。方法全转录组芯片分析筛选受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA。提取胶质瘤和正常细胞系及临床病例组织样品和敲低PTB的神经胶质瘤细胞总RNA,实时荧光定量PCR验证候选基因不同剪接异构体的表达及比值变化。核质分离实验鉴定长非编码RNA细胞定位。结果筛选出16条受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA,其中linc00882的不同剪接异构体的表达模式受PTB调控所产生的差异最明显。检测到linc00882定位于细胞质。结论神经胶质瘤中PTB蛋白参与长非编码RNA linc00882的选择性剪接。

关键词：选择性剪接长非编码RNA PTB 神经胶质瘤

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RNA结合蛋白KSRP在急性髓系白血病(AML)M5型细胞中的功能

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基础医学与临床 2018年第6期38卷 821-826页

作者：王小爽于姗何金蓉余佳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨RNA结合蛋白KSRP在不同类型急性髓系白血病(AML)中的表达,并研究KSRP对AML细胞增殖的调控功能。方法利用基因表达汇编(GEO)数据集和癌基因组图谱(TCGA)的数据分析KSRP在AML中的表达水平;在人外周血的单核细胞系(THP-1)中利用慢... 详细信息

目的探讨RNA结合蛋白KSRP在不同类型急性髓系白血病(AML)中的表达,并研究KSRP对AML细胞增殖的调控功能。方法利用基因表达汇编(GEO)数据集和癌基因组图谱(TCGA)的数据分析KSRP在AML中的表达水平;在人外周血的单核细胞系(THP-1)中利用慢病毒传导分别抑制KSRP的内源表达或者过表达miR-129,检测细胞的增殖和凋亡。结果 KSRP在t(15;17)型急性早幼粒细胞白血病中低表达,而在混合谱系白血病(MLL)易位的急性单核细胞白血病或急性粒-单核细胞白血病中高表达。抑制内源KSRP的表达后显著抑制了THP-1细胞的增殖(P<0.01)而促进细胞凋亡(P<0.01)。过表达miR-129后促进THP-1细胞的增殖(P<0.05)。结论KSRP通过促进miR-129的加工调控AML-M5型细胞的增殖。

关键词： KSRP RNA结合蛋白 miR-129 细胞增殖急性髓系白血病

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蒙特利尔认知评估量表在中国中老年人群筛查轻度认知功能障碍中的截断值的系统评价

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中国循证医学杂志 2017年第4期17卷 450-457页

作者：黄菲芸王艳红李娟娟王丽江宇廖苏苏北京协和医学院公共卫生学院北京100730 中国医学科学院基础医学研究所流行病与卫生统计学系北京100005

目的系统评价蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)在中国中老年人群筛查轻度认知功能障碍中不同截断值的诊断价值。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library(2016年5期)、OVID、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data数据... 详细信息

目的系统评价蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)在中国中老年人群筛查轻度认知功能障碍中不同截断值的诊断价值。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library(2016年5期)、OVID、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data数据库,搜集MoCA量表中文版本在中国中老年人群中以Petersen标准诊断MCI的相关诊断性试验,检索时限均为从2005年4月9日到2015年12月31日。由两位评价者独立筛选文献、提取资料,并采用QUADAS-2工具评价纳入研究的方法学质量后,采用STATA14.0软件进行Meta分析。结果共纳入27个研究,共计5 755研究对象(平均年龄60~80岁),按Petersen标准其中1 997人被诊断为MCI。Meta分析结果显示:以合并后受试者工作特征曲线下面积最大且合并灵敏度、特异度都相对较高为标准,Mo CA量表在中老年人群中轻度认知障碍筛查的最佳诊断截值为25/26[Sen合并=0.96,95%CI(0.93,0.97);Spe合并=0.83,95%CI(0.75,0.89);DOR=107,95%CI(61,188)]。按照不同研究设计(横断面研究和病例对照研究)、不同研究对象来源(社区与医院)或仅纳入使用北京版MoCA量表的亚组分析结果均显示:25/26仍是MoCA量表筛选MCI的最佳截断值。结论在中国中老年人群筛查轻度认知功能障碍,MoCA量表25/26分为最佳截断值,其准确性和特异性均较好。

关键词：蒙特利尔认知评估量表轻度认知功能障碍中国人群诊断性试验 Meta分析

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利用CRISPR/Cas9构建R778L类型肝豆状核变性疾病小鼠模型

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基础医学与临床 2018年第12期38卷 1702-1707页

作者：朱基彦瞿思遥张祝琴刘德培中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑系统构建针对人肝豆状核变性R778L突变类型的R780L突变小鼠。方法通过BLAST比对人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列,证明二者保守性。通过CRISPR/Cas9系统进行小鼠受精卵显微注射,并对小鼠肝豆状核变性... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑系统构建针对人肝豆状核变性R778L突变类型的R780L突变小鼠。方法通过BLAST比对人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列,证明二者保守性。通过CRISPR/Cas9系统进行小鼠受精卵显微注射,并对小鼠肝豆状核变性症状进行病理和生理学检测。结果人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列高度保守。通过CRISPR/Cas9技术成功获得纯合的R780L突变小鼠,该小鼠存在明显的肝脏铜离子淤积以及血清ALT、AST的升高且未发现有可检测出的脱靶效应。结论成功利用CRISPR/Cas9介导的基因敲入系统构建了针对人肝豆状核变性R778L类型的R780L突变小鼠模型。

关键词：肝豆状核变性 CRISPR/Cas9 点突变R778L 小鼠模型

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基于微小RNA架构的新型随机短发夹RNA文库构建

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中国医学科学院学报 2017年第4期39卷 518-524页

作者：郭倩朱宁卜萌萌郭思超闫雪静陈倩陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建高效发夹状随机短发夹RNA(shRNA)文库。方法构建由polⅡ启动子(CMV)驱动的增强绿色荧光蛋白(EGFP)下游连接shRNA的表达载体,转染细胞后收取蛋白,用Western blot和荧光素酶报告基因系统检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制... 详细信息

目的构建高效发夹状随机短发夹RNA(shRNA)文库。方法构建由polⅡ启动子(CMV)驱动的增强绿色荧光蛋白(EGFP)下游连接shRNA的表达载体,转染细胞后收取蛋白,用Western blot和荧光素酶报告基因系统检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制效率。在由CMV启动的EGFP下游连接shRNA的表达载体基础上,构建EGFP下游连接基于微小RNA(miRNA)架构的shRNA表达载体,转染细胞后收取RNA,用实时定量荧光PCR法检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制效果。基于EGFP下游连接基于miRNA架构的shRNA表达载体实时定量荧光PCR的检测结果,构建基于miRNA架构的大容量随机shRNA文库。结果由polⅡ启动子(CMV)驱动发夹状shRNA转录时,shRNA要位于一个大的转录本之后才能被有效转录。基于miRNA架构环境可提高shRNA的干扰效率。构建了一个容量为1.8×10~7的基于miRNA架构的大容量随机shRNA文库。结论构建了一个大容量的新型随机shRNA文库。

关键词：微小RNA 短发夹RNA 随机文库

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Zika病毒NS3具有依赖于ATP水解的dsDNA解链活性

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基础医学与临床 2018年第5期38卷 674-678页

作者：徐杉王蕾杰石磊中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究Zika病毒NS3蛋白是否具有依赖于ATP水解的ds DNA解链活性。方法构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21菌株中表达带有His标签的Zika NS3蛋白,并用Ni琼脂糖珠进行纯化;利用ATPase检测试剂盒对NS3的ATP水解活性进行检测;利用荧光共振... 详细信息

目的研究Zika病毒NS3蛋白是否具有依赖于ATP水解的ds DNA解链活性。方法构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21菌株中表达带有His标签的Zika NS3蛋白,并用Ni琼脂糖珠进行纯化;利用ATPase检测试剂盒对NS3的ATP水解活性进行检测;利用荧光共振能量转移(FRET)原理,对NS3的ds DNA解链活性进行实时动力学检测;利用定点突变方法将NS3蛋白的第198位甘氨酸(G)突变为丙氨酸(A),得到G198A突变体,检测其是否影响NS3解旋酶活性。结果 Zika NS3蛋白在体外可以水解ATP,酶解最大反应速率为2.76μmol/(L·min),Km值为0.11 mmol/L;Zika NS3蛋白在体外可以解链ds DNA;G198A突变体与野生型相比,ATP水解速率和ds DNA的解链速率均明显减弱。结论 Zika NS3蛋白在体外具有ATP水解活性以及ds DNA解链活性,且第198位甘氨酸对于NS3酶活性至关重要。

关键词： Zika病毒 NS3蛋白 ATP dsDNA 解旋酶

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