检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2017年第11期37卷 1513-1518页

作者：李嘉宁周俊洁刘伟彭小忠舒鹏程中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005

目的检测长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中的表达及作用。方法 1)通过UCSC基因组浏览器获取其基因组座位,利用Coding Potential Calculator工具对其编码能力进行预测;2)原位杂交及免疫荧光技术确定其在大脑皮质发育过程... 详细信息

目的检测长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中的表达及作用。方法 1)通过UCSC基因组浏览器获取其基因组座位,利用Coding Potential Calculator工具对其编码能力进行预测;2)原位杂交及免疫荧光技术确定其在大脑皮质发育过程中的表达谱;3)TALEN技术构建AK046999完全敲除小鼠,并且在DNA及RNA水平对其进行敲除鉴定;4)免疫荧光及TUNEL技术对敲除小鼠大脑皮质在发育过程的功能进行检测。结果 1)AK046999可认为是非编码RNA(Coding Potential Score<-1);2)AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中,前体区相对高表达;3)成功构建了AK046999敲除小鼠;4)与对照相比,AK046999敲除小鼠中表达PAX6、TBR2和NEUROD2的细胞数量无明显改变,并且在这两组小鼠中凋亡细胞的数量无明显改变。结论 AK046999在发育期的小鼠大脑皮质表达,但敲除后不影响小鼠大脑皮质中神经祖细胞的增殖、分化和细胞凋亡过程。

关键词： AK046999 长链非编码RNA 时空表达谱大脑皮质发育

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HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者HBsAg清除率：基于真实世界的比较效果研究

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中华肝脏病杂志 2016年第5期24卷 335-340页

作者：程凯亮徐曼曼邱倩李雁杨丽坤段小宛陈煜段钟平王丽中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病与卫生统计学系北京100005 首都医科大学附属北京佑安医院 100069

目的以临床诊疗数据评估核苷（酸）类和干扰素类药物初治HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的HBsAg清除率及其影响因素。方法采用回顾性队列研究设计，以2008年2月14日至2012年12月31日于北京佑安医院门诊就诊的1767例HBeAg阳性慢性乙型肝炎初... 详细信息

目的以临床诊疗数据评估核苷（酸）类和干扰素类药物初治HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的HBsAg清除率及其影响因素。方法采用回顾性队列研究设计，以2008年2月14日至2012年12月31日于北京佑安医院门诊就诊的1767例HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者为研究对象，计算不同特征患者的HBsAg清除率，同时采用COX回归模型探讨HBsAg清除的影响因素。结果1767名患者总HBsAg年清除率为0．46％。阿德福韦组、恩替卡韦组、替比夫定组、普通干扰素组的HBsAg年清除率分别为0．52％、0．47％、0．45％和1．18％。拉米夫定组和聚乙二醇干扰素α组未观察到HBsAg清除者，可能与观察人数较少有关。单因素分析结果显示HBsAg清除率与就诊时的年龄、基线HBsAg滴度水平有关。在校正了其他因素后仍然观察到使用普通干扰素者发生HBsAg清除的可能性显著高于恩替卡韦治疗者（ErR=8．33，95％CI：1．19～58．50，P：0．0329），其他核苷（酸）类药物组与恩替卡韦组差异无统计学意义。患者年龄超过50岁发生HBsAg清除的概率是50岁以下者的4．92倍（HR=4．92，95％CI：1．38～17．50，P=0．0139）；基线HBsAg滴度水平〈3 log10IU／ml发生HBsAg清除的概率较≥3log10IU／ml者升高22．77倍（ErR=23．77，95％CI，：6．17～91．51，P〈0．0001）。结论HBeAg阳性慢性乙型肝炎卡刀治患者在目前抗病毒药物治疗方案下HBsAg年清除率低，尤其是核苷（酸）类药物；基线HBsAg滴度水平与HBsAg清除密切相关。

关键词：肝炎表面抗原乙型肝炎,乙型,慢性抗病毒药

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寨卡病毒NS4A蛋白影响小鼠大脑皮质神经元的迁移

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 988-993页

作者：韦智钟阴彬彭小忠刘伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005

目的在体研究寨卡病毒(Zika virus)NS3和NS4A蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响。方法通过c DNA末端快速扩增技术(RACE)及反转录PCR测定Zika病毒SZ01株基因组的开放阅读框,确定NS3和NS4A蛋白编码序列,构建融合Flag标签的p CIG蛋白表达载... 详细信息

目的在体研究寨卡病毒(Zika virus)NS3和NS4A蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响。方法通过c DNA末端快速扩增技术(RACE)及反转录PCR测定Zika病毒SZ01株基因组的开放阅读框,确定NS3和NS4A蛋白编码序列,构建融合Flag标签的p CIG蛋白表达载体。通过子宫内电转技术在E13.5 d小鼠的大脑皮质的神经前体细胞中表达病毒蛋白。免疫组化检测Flag标签、TBR1与e GFP,观察表达NS3和NS4A蛋白的细胞在E18.5 d大脑皮质中的分布,评估Zika病毒蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响。结果 1)NS4A的氨基酸序列与NCBI数据库一致,NS3存在1处氨基酸位点突变。2)Flag标签荧光信号与e GFP荧光共定位,提示e GFP可以指示病毒蛋白在皮质中的表达。3)TBR1荧光显示在体表达NS4A后,神经元的分布与p CIG对照组及表达NS3相比有显著差异(P<0.001)。结论在体表达Zika病毒的NS4A蛋白可能影响神经元迁移。

关键词：寨卡病毒 NS4A蛋白子宫内电转神经元迁移

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空气中SO_2和NO_2对糖尿病患者影响的病例交叉研究

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基础医学与临床 2017年第6期37卷 812-816页

作者：张瑞明李润奎罗凯徐晶赵梅朵裴璐许群中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病与卫生统计学系北京100005 中国医学科学院环境与健康研究中心北京100005 中国科学院大学资源与环境学院北京100049 中国科学院地理科学与资源研究所资源与环境信息系统国家重点实验室北京100101

目的采用病例交叉设计研究空气污染物(SO_2、NO_2和PM10)对糖尿病患者健康结局的影响。方法收集南京市2008年1月1日至2011年12月31日空气污染物数据、气象数据以及糖尿病患者死亡数据。用双向病例交叉设计,调整气象因素影响后,研究空气... 详细信息

目的采用病例交叉设计研究空气污染物(SO_2、NO_2和PM10)对糖尿病患者健康结局的影响。方法收集南京市2008年1月1日至2011年12月31日空气污染物数据、气象数据以及糖尿病患者死亡数据。用双向病例交叉设计,调整气象因素影响后,研究空气中SO_2、NO_2、PM10与糖尿病患者死亡之间的关系。同时,对年龄、性别和季节因素进行分层分析。结果空气中SO_2、NO_2平均每增加10μg/m^3,糖尿病患者死亡的OR值及其95%可信区间(95%CI)分别为1.031(1.005,1.058)和1.042(1.012,1.074);空气污染物中NO_2和SO_2对老年人影响较大,且在冬季存在显著的有害效应。结论空气中NO_2和SO_2可能对糖尿病患者死亡产生影响。

关键词： NO2 SO2 糖尿病病死率病例交叉设计

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开展八年制医学生生理设计实验课的教学经验

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基础医学与临床 2016年第4期36卷 570-573页

作者：闫莉曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学系北京100005

中国医学科学院基础学院生理学系自20世纪80年代以来开展八年制临床医学生生理学设计实验课。本文介绍开展设计实验的经验和存在的问题,强调在设计实验教学中要注重对学生创新能力的培养,努力培养其创新思维和团结协作的精神,为今后参... 详细信息

中国医学科学院基础学院生理学系自20世纪80年代以来开展八年制临床医学生生理学设计实验课。本文介绍开展设计实验的经验和存在的问题,强调在设计实验教学中要注重对学生创新能力的培养,努力培养其创新思维和团结协作的精神,为今后参与临床实践奠定良好基础。

关键词：生理学实验设计实验教学模式

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利用蛋白质芯片技术筛查多发性硬化患者的自身抗体

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基础医学与临床 2016年第7期36卷 941-945页

作者：周瑜蔡孟华何维张建民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的用高通量蛋白质芯片技术筛选多发性硬化(Multiple Sclerosis,MS)患者血清中可能存在的自身抗体,为筛选新的疾病辅助性诊断的指标奠定基础。方法 15例MS患者作为疾病组,选取同样数量MS阴性并无其他自身免疫疾病的性别和年龄相匹配的... 详细信息

目的用高通量蛋白质芯片技术筛选多发性硬化(Multiple Sclerosis,MS)患者血清中可能存在的自身抗体,为筛选新的疾病辅助性诊断的指标奠定基础。方法 15例MS患者作为疾病组,选取同样数量MS阴性并无其他自身免疫疾病的性别和年龄相匹配的健康人15位作为健康对照组。两组组内随机分为3个小组,血清充分混匀后,采用高通量蛋白质芯片法检测MS患者血清中可能存在的自身抗体。结果通过高通量蛋白质芯片技术检测及与对照组分析比对,共筛出MS患者血清27种自身抗体。其中阳性率较高为SLC16A4、NOL3和DTX1,提示其可能是MS患者血清中特异性自身抗体的靶蛋白。阳性蛋白数量上,MS组高于HC组。功能聚类结果显示,自身抗体主要针对神经相关的蛋白质。结论采用高通量蛋白质芯片技术,可以较为有效筛选出MS血清中的自身抗体的靶抗原,为进一步验证MS相关自身抗体的功能及作用机制奠定了基础。

关键词：多发性硬化蛋白质芯片自身抗体

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同步原位检测CTC多重瘤标蛋白表达与染色体异倍体的意义及应用

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临床与实验病理学杂志 2017年第3期33卷 297-302页

作者：由磊赵烨阚秀李一林王东民张爱群王红霞刘颖王丹丹林平郑直北京协和医院基本外科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系及中心实验室北京100005 北京大学人民医院病理科北京100044 北京博雅医学健康研究所北京100005 北京大学肿瘤医院消化内科北京100044 北京大学第一医院乳腺癌中心北京100044 中国人民解放军总医院(301医院)肝胆中心北京100853 上海第一人民医院肿瘤中心上海200080 赛特生物医药科技有限公司江苏泰州225300 Cylelligen San DiegoCaliforniaUSA

循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)及播散肿瘤细胞(disseminated tumor cell,DTC)的可靠检测主要取决于有效的细胞分离与鉴别,目前最为新颖的"差相富集-多重瘤标免疫荧光染色-染色体荧光原位杂交(SE-i FISH)"技术平台... 详细信息

循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)及播散肿瘤细胞(disseminated tumor cell,DTC)的可靠检测主要取决于有效的细胞分离与鉴别,目前最为新颖的"差相富集-多重瘤标免疫荧光染色-染色体荧光原位杂交(SE-i FISH)"技术平台,首次将CTC/DTC的富集方法与后续的原位、同步检测肿瘤细胞染色体异倍体的核型分析及多种肿瘤标志物的表型分析等进行有效整合,并成功应用于肿瘤细胞的基础分析与临床检测。大量临床实验证明,独特的SE-i FISH可以为分析CTC/DTC在肿瘤早期诊断、疗效快速评估、肿瘤耐药与复发的实时监测等提供可靠的技术保障。该文阐述SEi FISH在不同瘤种患者及人源肿瘤动物模型体内的有效检测方法,并锁定具有不同临床意义的不同表型与核型的CTC/DTC亚类细胞,为后续的肿瘤单细胞分析与实验提供指导。

关键词：肿瘤转移染色体异倍体肿瘤标志物 CTC亚类文献综述

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CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白与钙联蛋白在内侧颞叶癫痫模型小鼠海马中的表达

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中国医学科学院学报 2016年第3期38卷 265-270页

作者：沙志强沙龙泽许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的观察CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙联蛋白(CNX)在内侧颞叶癫痫小鼠海马区域中表达的时间和空间分布。方法采用海人酸(KA)诱导内侧颞叶癫痫小鼠模型,免疫印迹和免疫荧光技术检测CHOP和CNX在急性期(12、24 h)小鼠海马CA3区... 详细信息

目的观察CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙联蛋白(CNX)在内侧颞叶癫痫小鼠海马区域中表达的时间和空间分布。方法采用海人酸(KA)诱导内侧颞叶癫痫小鼠模型,免疫印迹和免疫荧光技术检测CHOP和CNX在急性期(12、24 h)小鼠海马CA3区的表达量及分布差异,并与注射PBS的正常小鼠进行对照。结果免疫印迹检测结果显示,KA注射后12 h小鼠海马中的CHOP(F=1.136,P=0.4069)和CNX表达量(F=2.378,P=0.2087)与对照组差异没有统计学意义,KA注射后24 h注射侧海马中的CHOP(F=8.510,P=0.0362)和CNX表达量(F=6.968,P=0.0497)明显高于对照组。免疫荧光结果显示,KA注射后12 h CHOP的表达主要集中于CA3区,注射后24 h在CA1和CA3区表达水平均升高;KA注射后24 h CHOP蛋白(F=24.480,P=0.0057)和CNX蛋白(F=7.149,P=0.0478)的表达量显著高于对照组。结论伴随着癫痫发作的产生,CHOP蛋白表达量上升,提示神经元内质网应激水平不断增加,可能需要更多CNX作为分子伴侣帮助更多未折叠蛋白完成折叠过程。

关键词：内侧颞叶癫痫内质网应激 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白钙联蛋白

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遗传性乳光牙本质家系致病基因突变的鉴定

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中华医学遗传学杂志 2016年第1期33卷 34-37页

作者：刘彦山黄颖之高劲松李闪赵秀丽张学中国医学科学院基础医学研究所一北京协和医学院基础学院医学遗传学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院妇产科

目的对一个遗传性乳光牙本质（dentinogenesis imperfecta shieldstype Ⅱ ，DGI-Ⅱ）家系进行DSPP基因的突变分析。方法采集家系成员外周血或胎儿绒毛组织，用酚氯仿法提取基因组DNA。应用聚合酶链反应（polymerasechain reaction，PCR... 详细信息

目的对一个遗传性乳光牙本质（dentinogenesis imperfecta shieldstype Ⅱ ，DGI-Ⅱ）家系进行DSPP基因的突变分析。方法采集家系成员外周血或胎儿绒毛组织，用酚氯仿法提取基因组DNA。应用聚合酶链反应（polymerasechain reaction，PCR）-Sanger测序方法鉴定先证者DSPP基因第2～5外显子及外显子／内含子衔接区序列，并进行突变分析；针对突变位点设计错配引物引入AluI酶切位点，通过限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳方法在该家系正常人及60名无关正常个体中进行致病突变验证；构建含微型DSPP基因的pcDNA3．1基因表达载体，在体外培养细胞中验证突变致病性。结果该家系3例患者和一名胎儿均携带DSPP基因内C．52—1G〉A的杂合突变，突变造成该基因第3外显子5’端剪接点变异；60名对照者和家系正常个体均未携带该突变；微小基因（Minigene）体外表达显示e．52—1G〉A导致DSPP基因转录产物第3外显子的跳跃剪接。结论本研究在一个DGI-Ⅱ家系中发现了DSPP基因内一个新的致病剪接突变（c．52—1G〉A），并在此基础上为先证者提供了产前基因诊断。

关键词：乳光牙 DSPP基因剪接点突变微小基因

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辛伐他汀对大鼠神经病理性疼痛行为学和RhoA通路表达的影响

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中国疼痛医学杂志 2016年第7期22卷 493-500页

作者：丘玥陈唯韫王之遥刘帆马超黄宇光中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院解剖与组胚学系中国医学科学院神经科学中心北京100005

目的：观察Rho A相关细胞骨架调控信号通路在慢性坐骨神经结扎（chronic sciatic nerve constriction injury,CCI）神经病理性疼痛大鼠背根神经节激活及辛伐他汀（simvastatin）鞘内给药对该通路影响。方法：42只质量180~200 g SD雄性... 详细信息

目的：观察Rho A相关细胞骨架调控信号通路在慢性坐骨神经结扎（chronic sciatic nerve constriction injury,CCI）神经病理性疼痛大鼠背根神经节激活及辛伐他汀（simvastatin）鞘内给药对该通路影响。方法：42只质量180~200 g SD雄性大鼠随机分为5组：Na？ve组（n=6）、Sham组（n=6）、CCI组（n=18）、Simvastatin组（n=6）及Rho激酶（Rho kinase,ROCK）抑制剂Y-27632组（n=6）。对大鼠行鞘内置管,于造模后7天结扎CCI组、Simvastatin组及Y-27632组大鼠单侧坐骨神经构建CCI模型,术后Simvastatin组每天鞘内注射10μl辛伐他汀（10μg/μl）,Y-27632组每天鞘内注射12μl Y-27632（4 mg/ml）,Na？ve组、Sham组、CCI组术后每天鞘内注射生理盐水10μl,连续注射7天。于CCI建模后1、3、7、14天进行动物行为学评估,观察大鼠对机械和热刺激的反应。于建模后第14天处死大鼠,取手术侧L4~6背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）,并进行实时定量PCR观察RhoA、ROCK的m RNA表达变化,免疫荧光观察Rho A蛋白在DRG伤害性神经元中的分布及改变,以及免疫荧光强度随建模时间梯度增加,Western blot检测通路中主要因子RhoA、LIMK和cofilin蛋白水平表达的改变。结果：1 Simvastatin组大鼠给予辛伐他汀后第3天起缩足反射热辐射潜伏期、缩足反射机械刺激阈值明显高于CCI组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;ROCK抑制剂Y-27632组大鼠缩足反射热辐射潜伏期、缩足反射机械刺激阈值给药后3天起较CCI组明显提高,差异具有统计学意义（P〈0.05）。2 CCI组大鼠DRG中Rho A、ROCK m RNA于术后第7天起表达显著增加（P〈0.05）;Rho A蛋白在背根神经节神经元中表达,CCI术后14天Rho A免疫荧光强度与Na？ve组比显著增高（P〈0.05）。3鞘内注射辛伐他汀能显著抑制通路主要因子Rho A、p-LIMK、p-cofilin的表达（P〈0.05）。结论：大鼠CCI慢性神经病理性疼痛存在Rho A/LIMK/cofilin通路的激活,辛伐他汀鞘内注射可抑制该通路的活化,为治疗神经病理性疼痛提供新的靶点。

关键词：神经病理性疼痛辛伐他汀 Rho A 坐骨神经结扎

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