检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2015年第4期31卷 501-508页

作者：孙蕊朱琰冯海凉卞晓翠顾蓓王春景刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系和细胞资源中心北京100005

目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(Listeriolysin O,LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(Sc Fv-p LLO),初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单抗VH和VL基因序列,构建抗CD2... 详细信息

目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(Listeriolysin O,LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(Sc Fv-p LLO),初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单抗VH和VL基因序列,构建抗CD20单链抗体(Sc Fv)基因序列,选取LLO的2个CD4+T细胞表位,构建单链抗体融合抗原表位的重组蛋白基因序列,克隆至原核表达载体,经诱导表达纯化,流式细胞术和免疫共沉淀分析其与淋巴瘤细胞结合能力,细胞增殖实验测定其对淋巴瘤细胞生长的影响,凋亡实验分析其诱导淋巴瘤细胞凋亡的能力,淋巴细胞增殖实验分析其免疫原性。结果:成功诱导表达重组蛋白Sc Fv-p LLO。Sc Fv-p LLO可不同程度地靶向结合不同淋巴瘤细胞系,并明显抑制Raji细胞生长和诱导其凋亡。Sc Fv-p LLO可刺激免疫小鼠脾细胞增殖。结论:重组蛋白Sc Fv-p LLO保留了Sc Fv的功能,可靶向结合和抑制CD20阳性淋巴瘤细胞的生长,同时可激活机体免疫应答,为进一步研究其模拟瘤细胞表面抗原和作为瘤细胞疫苗佐剂的功能奠定基础。

关键词： CD20 单链抗体 B细胞淋巴瘤抗原表位李斯特菌溶细胞素O

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2013年新疆汉族成人城乡居民血脂异常患病率及相关因素研究

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中华疾病控制杂志 2016年第5期20卷 464-468页

作者：马腾韩慧君阿迪力·司马义葩丽泽木合布里亚生江陶宁单广良廖苏苏中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学与卫生统计学系北京100005 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心公共卫生科新疆乌鲁木齐830001 新疆医科大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的了解新疆汉族成人城乡居民血脂异常患病率及相关因素。方法样本为多阶段分层整群抽取的新疆5个市县3 095名20~80岁的汉族居民,其中城市居民1 970人(63.65%)。本文比较了城乡居民血脂总胆固醇(total cholesterol,TC),甘油三酯(trigly... 详细信息

目的了解新疆汉族成人城乡居民血脂异常患病率及相关因素。方法样本为多阶段分层整群抽取的新疆5个市县3 095名20~80岁的汉族居民,其中城市居民1 970人(63.65%)。本文比较了城乡居民血脂总胆固醇(total cholesterol,TC),甘油三酯(triglyceride,TG),低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)异常患病率及相关因素。结果血脂异常总患病率为28.11%,城市居民总患病率高于农村居民(30.00%vs 24.80%,X^2=9.58,P=0.002);高TC血症患病率为7.69%,城市高于农村(8.83%vs 5.69%,X^2=9.97,P=0.002);高TG血症患病率为19.97%,城市高于农村(21.47%vs 17.35%,X^2=7.61,P=0.006);高LDL-C血症患病率为4.52%,城市高于农村(5.33%vs 3.11%,X^2=8.16,P=0.004);低HDL-C血症患病率为7.40%,城市与农村差异无统计学意义(7.56%vs 7.11%,X^2=0.21,P=0.644)。多因素Logistic回归显示,超重和肥胖是血脂TG、HDL-C异常共同的独立相关因素(均有P<0.05)。结论新疆五市县汉族成人血脂水平高于全国。城市居民血脂异常水平高于农村。控制超重和肥胖是预防新疆汉族城乡居民血脂异常的重要手段。

关键词：汉族血脂异常患病率流行病学因素

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荧光探针及流式分选法追踪胰腺癌细胞增殖的研究

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医学研究杂志 2016年第6期45卷 29-32页

作者：米蕊芳潘春晓张俊文刘福生金贵善首都医科大学附属北京天坛医院、北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心 100050 中国医学科学院基础医学研究所/清华大学医学部北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的应用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(5,6-carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE)荧光探针及流式分选的方法追踪胰腺癌细胞增殖情况。方法应用低血清培养法(0.5%)对细胞进行细胞周期同步化;利用CFSE染色追踪胰腺... 详细信息

目的应用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(5,6-carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE)荧光探针及流式分选的方法追踪胰腺癌细胞增殖情况。方法应用低血清培养法(0.5%)对细胞进行细胞周期同步化;利用CFSE染色追踪胰腺癌全基因组突变文库细胞增殖;并于一定的时间点,应用流式分选法分选增殖速度减慢细胞群;通过CCK-8法检测分选前后的细胞增殖曲线。结果 CFSE探针可均匀染色胰腺癌细胞,呈现较强的绿色荧光;在CFSE荧光探针染色后的不同时间点(0、48、96及144h),胰腺癌细胞荧光强度呈现逐级衰减趋势;应用细胞饥饿法对细胞进行同步化后,细胞呈现更好的同步化衰减趋势;在一定的荧光衰减时间点(144h),通过流式分选从细胞突变文库中获得了胰腺癌增殖减慢细胞群;CCK-8实验显示,相对于分选前的细胞,分选出的荧光强度强的胰腺癌细胞群增殖速度明显减慢(P=0.006)。结论 CFSE荧光探针可很好追踪胰腺癌细胞增殖,结合流式分选法可获得肿瘤突变文库中的增殖减慢细胞群。

关键词：胰腺癌荧光探针流式分选 ASPC-1细胞

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长链非编码RNA Gm15577参与小鼠小脑神经元增殖与分化

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中华病理学杂志 2015年第7期44卷 504-508页

作者：岳永松张伟龙刘春英牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所神经科学中心北京协和医学院基础学院病理学系 100005 北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（NBS）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（1ncRNA），并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组，Nbsl^CN... 详细信息

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（NBS）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（1ncRNA），并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠小脑中RNA的表达差异；利用即时荧光定量PCR技术对芯片结果加以验证；针对目的RNA，检测其全身表达及小脑中表达模式、细胞内定位以及对母基因的表达调控模式。结果IncRNA Gm15577是由神经生长调节因子一1（Negrl）基因内部的内含子区反向转录而成，特异性表达于小脑，且在其发育过程中呈动态变化趋势，而Nbs1缺失之后整体表达水平显著降低；同时，与未分化期比较，分化后的小鼠小脑原代神经前体细胞中Gm15577及其母基因Negrl均有显著升高；Gm15577敲低之后导致Negr1以及小脑增殖分化相关因子Shh与β-catenin在RNA水平的表达显著下调；人髓母细胞瘤临床样本数据分析表明Negr1基因在正常人群与肿瘤患者之间有显著的表达差异。结论从神经特异性敲除Nbs1小鼠模型出发报道了一个新的与小鼠小脑发育相关的IncRNA Gm15577，初步结果表明Gm15577通过调控Negr1进而影响小脑神经元增殖与分化进程中的Shh与β—catenin信号通路，其基因行为异常有可能与髓母细胞瘤发病有一定的相关性。

关键词：小脑 Nbs1 细胞增殖细胞分化长链非编码RNA

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LIN28B调控miRNAs维持MCF-7肿瘤干细胞的干性特征

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基础医学与临床 2015年第6期35卷 754-760页

作者：白丽鹏陈翀刘妍谢俊岭王威罗云萍中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的研究LIN28B对人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤干细胞的干性状态维持的作用机制。方法在MCF-7细胞中瞬时过表达LIN28B,用q PCR和Western blot检测干性相关基因SOX2、NAONG、c-Myc和OCT4的表达;用流式细胞仪检测CD44high/CD24low细胞亚群的比... 详细信息

目的研究LIN28B对人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤干细胞的干性状态维持的作用机制。方法在MCF-7细胞中瞬时过表达LIN28B,用q PCR和Western blot检测干性相关基因SOX2、NAONG、c-Myc和OCT4的表达;用流式细胞仪检测CD44high/CD24low细胞亚群的比例;利用体外成球培养检测肿瘤干细胞自我更新的能力,通过RNA第二代测序技术检测在LIN28B过表达后MCF-7细胞中miRNAs的表达差异,通过转染差异表达的miRNA,检测其对MCF-7细胞肿瘤干细胞比例和体外成球能力的影响。结果转染p-CMV6-LIN28B后能明显提高LIN28B的mRNA和蛋白水平(P<0.001);过表达LIN28B后MCF-7细胞中SOX2、NANOG和OCT4在RNA和蛋白水平表达都明显增高(P<0.05);CD44high/CD24low细胞比例由1.71%上升至11.60%(P<0.05);体外成球培养发现成球细胞数量明显增多(P<0.01);通过RNA测序发现有16个miRNAs在LIN28B过表达后差异表达倍数在2倍以上且P<0.05,LIN28B过表达后miR-92b-5p表达显著上调(P<0.01);转染miR-92b-5p mimic后MCF-7细胞的CD44high/CD24low细胞比例由1.14%上升至3.59%(P<0.05),体外成球能力明显增强(P<0.01)。结论 LIN28B能维持MCF-7肿瘤干细胞的干性状态,其作用机制可能是通过miRNAs的表达来实现的。

关键词： LIN28B 肿瘤干细胞肿瘤相关干性 miRNAs

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成骨不全症患者COL1A1/2致病突变谱和基因诊断研究

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中华医学杂志 2015年第43期95卷 3484-3489页

作者：赵秀丽肖继芳汪涵任秀智高劲松吴易阳卢超霞张学中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系北京100005 天津市武清区人民医院小儿骨科北京协和医院妇产科

目的在成骨不全症（OI）患者中鉴定Ⅰ型胶原基因（COL1A1和COL1A2）致病突变,构建中国人OI致病基因突变谱,并在此基础上完成OI高危胎儿的产前基因诊断.方法应用酚/氯仿法提取先证者及家系成员外周血基因组DNA,联合应用聚合酶链反应（... 详细信息

目的在成骨不全症（OI）患者中鉴定Ⅰ型胶原基因（COL1A1和COL1A2）致病突变,构建中国人OI致病基因突变谱,并在此基础上完成OI高危胎儿的产前基因诊断.方法应用酚/氯仿法提取先证者及家系成员外周血基因组DNA,联合应用聚合酶链反应（PCR）-Sanger DNA测序和靶向高通量测序技术对200例OI先证者进行COL1A1/2编码区及外显子/内含子衔接区的DNA序列分析;采用PCR-高分辨熔解曲线（HRM）技术对先证者及其家系成员进行突变验证;通过PCR-测序对散发病例的父母样本进行突变检测,进而确定突变来源;联合应用PCR-测序和微卫星标记等位基因分析的方法进行胎儿产前基因诊断.结果在158例先证者中,发现COL1A1/2基因致病突变125种,包含COL1A1突变74种（91例）,COL1A2突变51种（67例）,阳性检出率79％（158/200）;发现新突变63种,包括33种COL1A1突变和30种COL1A2突变.在上述125种COL1A1/2基因突变中,13种突变分别在2例以上先证者中重复出现（其中6种突变重复出现4次以上）,合计检出46次,检出率为29.11％（46/158）;完成产前基因诊断74例,其中包括患儿40例,正常胎儿34例.结论建立基于Sanger DNA测序、靶向高通量测序和PCR-高分辨熔解曲线分析技术的OI基因诊断平台.在中国人群中,构建了OI相关COL1A1/2基因致病突变谱,并在此基础上完成大样本OI患者和高危胎儿的基因诊断.

关键词：致密成骨不全症 COL1A1基因 COL1A2基因基因诊断

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Fcγ和Fcε受体在小鼠三叉神经节的表达

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基础医学与临床 2015年第6期35卷 729-733页

作者：刘帆李春艳徐鲁斌陈纳泽周末姜浩武马超中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

目的检测正常小鼠三叉神经节(TG)是否表达免疫球蛋白G(Ig G)和免疫球蛋白E(Ig E)Fc段Fcγ受体和Fcε受体,及其在过敏小鼠TG中的变化。方法通过腹腔注射OVA和铝剂,建立小鼠过敏性结膜炎(ACJ)模型。ELISA检测血清总Ig E。用Western blot... 详细信息

目的检测正常小鼠三叉神经节(TG)是否表达免疫球蛋白G(Ig G)和免疫球蛋白E(Ig E)Fc段Fcγ受体和Fcε受体,及其在过敏小鼠TG中的变化。方法通过腹腔注射OVA和铝剂,建立小鼠过敏性结膜炎(ACJ)模型。ELISA检测血清总Ig E。用Western blot和免疫荧光检测Fcγ受体和Fcε受体的表达。结果小鼠TG表达Fcγ受体和Fcε受体。其中Ig G激活型高亲和力受体FcγRI和抑制型低亲和力受体FcγRⅡ只表达在小鼠TG神经元上,而Ig G激活型低亲和力受体FcγRⅢ表达在小鼠TG中的卫星胶质细胞上。Ig E激活型高亲和力受体FcεRⅠ表达在小鼠TG神经元上,而Ig E低亲和力受体FcεRⅡ同时表达在小鼠TG神经元和卫星胶质细胞上。与正常小鼠比较,ACJ小鼠的血清总Ig E水平升高,TG的FcεRⅠ和FcγRⅡ表达增加(P<0.05)。而ACJ小鼠的FcεRⅡ和FcγRI表达下降(P<0.05)。FcγRⅢ在正常和ACJ小鼠TG中的表达无显著差别。结论小鼠TG表达的Fcγ和Fcε受体可能参与ACJ及其他过敏性疾病的发生和发展。

关键词： Fcγ受体 Fcε受体免疫球蛋白G 免疫球蛋白E 过敏

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89例发作性运动诱发性肌张力障碍的临床和遗传学分析

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中风与神经疾病杂志 2015年第12期32卷 1081-1083页

作者：柳青郭夏楠崔博周祥琴卢强杨英麦王含黄颜万新华彭斌张学崔丽英中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经科北京100730 中国医学科学院神经科学中心北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院临床遗传室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所遗传学系北京100005

目的探讨发作性运动诱发性肌张力障碍(PKD)/婴儿痉挛及手足徐动症(ICCA)患者PRRT2突变分布、基因型-表型关系。方法收集我中心诊断家族性或散发性PKD/ICCA患者共89例,应用Sanger测序筛查PRRT2编码外显子和外显子-内含子交界区,新突变在... 详细信息

目的探讨发作性运动诱发性肌张力障碍(PKD)/婴儿痉挛及手足徐动症(ICCA)患者PRRT2突变分布、基因型-表型关系。方法收集我中心诊断家族性或散发性PKD/ICCA患者共89例,应用Sanger测序筛查PRRT2编码外显子和外显子-内含子交界区,新突变在父母DNA和164例正常对照DNA中验证。结果本组病例男女比例3∶1,家族性PKD/ICCA占31.5%。共37.1%(33人)查到PRRT2突变,c.649dup C(p.R217Pfs*8)占全部突变的69.7%;在1例散发PKD发现一个新突变,c.959C>T(p.A320V)。PRRT2突变组平均起病年龄(11.52±4.17)岁,无突变组(14.34±3.55)岁,两组比较有明显差异(P=0.005),发作时间和发作时症状分布两组均无明显差异。结论 c.649dup C突变是中国汉族PKD/ICCA患者最常见突变;发现的一个新突变扩大了PRRT2突变谱;PRRT2突变患者平均起病年龄较无突变早。

关键词：肌张力障碍 PRRT2 婴儿痉挛及手足徐动症突变基因型-表型

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组织学考试的质量测评

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基础医学与临床 2015年第4期35卷 567-571页

作者：钱晓菁仇文颖徐园园陈咏梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

目的了解北京协和医学院组织学的考试质量。方法对2006级至2010级临床医学专业八年制学生组织学考试试卷共393份进行教育测量学计算与统计学分析。结果组织学考试5年的成绩总平均分为79．5±12．9，学生成绩在各学年间无显著差异。... 详细信息

目的了解北京协和医学院组织学的考试质量。方法对2006级至2010级临床医学专业八年制学生组织学考试试卷共393份进行教育测量学计算与统计学分析。结果组织学考试5年的成绩总平均分为79．5±12．9，学生成绩在各学年间无显著差异。试卷分析显示5年间试卷难易度在0．77-0．84之间小幅变化，区分度从0．26逐渐增加到0．34。信度和效度全部达到优秀水平。试题分析显示综合评价为优秀的试题从2006级的59．09％上升到2010级的88．89％，全部230道试题中优秀试题占72．17％。2006级与2010级在试题难易度、区分度方面存在显著差异。结论组织学考试的质量整体较高，试题的质量也在逐年提高，但仍存在一些不足有待改进。考试质量分析为今后教学质量的提高和试题库的建设提供了重要参考。

关键词：考试质量分析教育测量学参数组织学

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以创新为理念的临床应用解剖学教学改革

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基础医学与临床 2015年第6期35卷 854-856页

作者：刘伟刘克李文婷申新华陈咏梅马超中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

为了适应21世纪解剖教学改革的趋势,培养研究生的动手能力、创新意识和创新能力,北京协和医学院研究生院临床应用解剖学课程从2010年开始改革,经过5年的教学实践,对所获得的经验及存在的问题进行总结,以期为未来的课程发展提供借鉴。

关键词：临床应用解剖学创新教学改革

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